TLR3在HBsAg阳性孕妇婴儿HBV宫内感染中作用机制的研究
本文选题：HBV 切入点：宫内感染 出处：《山西医科大学》2012年硕士论文
【摘要】：目的 ①了解HBsAg阳性孕妇婴儿脐静脉血PBMC中TLR3与HBV宫内感染的关系。 ②探讨HBsAg阳性孕妇婴儿脐静脉血PBMC中相关免疫细胞与HBV宫内感染的关系。 ③探讨TLR3在HBsAg阳性孕妇婴儿HBV宫内感染中可能的作用机制。 方法 ①收集2011年7月至2012年1月于太原市传染病医院妇产科分娩的HBsAg阳性孕妇产后脐血共52例。无菌采集分娩时脐血抗凝血30ml，并收集母儿的流行病学资料。 ②婴儿脐静脉血PBMC的分离及培养，体外HBV干预宫内感染组和非宫内感染组，以HBV+PolyI:C干预宫内感染组婴儿PBMC。 ③多色流式细胞术（FCM）对两组TLR3蛋白表达的荧光强度值以及T细胞、B细胞、DC细胞和CD4+CD25+Treg的百分比进行测定。 结果 ①采用多色FCM测定TLR3蛋白表达荧光强度值，经比较：非宫内感染组的TLR3蛋白表达的平均荧光强度值（32.18±11.36）高于宫内感染组（30.29±11.04），差异无统计学意义（t=0.410,P=0.684）；宫内感染组TLR3活化后（即PolyI:C刺激后），TLR3蛋白表达的平均荧光强度值（32.16±9.40）升高，与非宫内感染组的（32.18±11.36）相比，无统计学差异（t=-1.824,P=0.078）。 ②采用多色FCM测定B细胞的百分比，经比较：非宫内感染组的B细胞的百分比（7.38±6.40）高于宫内感染组（6.76±4.01），没有统计学差异（t=0.210,P=0.834）；宫内感染组TLR3活化后，B细胞的百分比（5.14±2.64）降低，与非宫内感染组（7.38±6.40）比较，差异没有统计学意义（t=0.768,P=0.447）。 ③非宫内感染组的CD4+T细胞的百分比（41.14±20.08）高于宫内感染组（33.82±2.60），差异尚不能认为有统计学意义（t=0.618,P=0.543）；非宫内感染组的CD8+T细胞的百分比（11.30±5.87）与宫内感染组（11.14±9.64）相比，，差异无统计学意义（t=0.041,P=0.968）；非宫内感染组的CD4+/CD8+比值（4.30±2.28）与宫内感染组的（4.75±3.23）比较，差异尚不能认为有统计学意义（t=-0.30,P=0.767）。 ④非宫内感染组的mDC的百分比（0.84±0.58）高于宫内感染组（0.67±0.34），差异尚不能认为有统计学意义（t=-0.485,P=0.633）；非宫内感染组的pDC（0.92±0.91）与宫内感染组的（0.91±0.46）比较，差异没有统计学意义（t=0.020,P=0.984）。 ⑤非宫内感染组的CD4~+CD25~+Treg细胞的百分比（4.69±3.41）与宫内感染组（3.00）比较，差异无统计学意义（t=0.474,P=0.646）。 结论 ①非宫内感染组的TLR3蛋白表达平均荧光强度值高于宫内感染组，而宫内感染组经PolyI:C刺激后其表达水平升高，提示宫内感染可能与婴儿TLR3表达有关。 ②非宫内感染组的B细胞、CD4~+T细胞、mDC的百分比高于宫内感染组，提示宫内感染与婴儿B细胞、CD4~+T细胞、mDC表达可能有关。 ③本次研究未发现宫内感染与CD8~+T细胞、pDC、CD4~+CD25+Treg细胞的百分比以及CD4~+/CD8~+比值相关，有待于进一步研究。
[Abstract]:Purpose1 to investigate the relationship between TLR3 and HBV intrauterine infection in umbilical vein PBMC of pregnant women with HBsAg positive.2 to investigate the relationship between PBMC related immunocytes in umbilical vein blood of pregnant women with HBsAg positive and intrauterine infection of HBV.To explore the possible mechanism of TLR3 in intrauterine HBV infection of HBsAg positive pregnant infants.Method1 from July 2011 to January 2012, 52 cases of HBsAg positive pregnant women delivered in Department of Gynecology and Obstetrics of Taiyuan Infectious Diseases Hospital were collected.The anticoagulant blood of umbilical cord blood was collected 30 ml during delivery, and the epidemiological data of mother and infant were collected.2isolation and culture of PBMC in umbilical vein blood of infants. In vitro HBV was used to interfere intrauterine infection group and non-intrauterine infection group, and HBV PolyI:C was used to interfere with intrauterine infection group.3 the fluorescence intensity of TLR3 protein expression and the percentage of T cell B cell / DC cells and CD4 CD25 Treg were measured by polychromatic flow cytometry (FCM).Result1the fluorescence intensity of TLR3 protein expression was measured by polychromatic FCM.There was no statistical difference between the non-intrauterine infection group and the non-intrauterine infection group (32.18 卤11.36).2 the percentage of B cells in non-intrauterine infection group (7.38 卤6.40) was higher than that in intrauterine infection group (6.76 卤4.01) by polychromatic FCM assay, and the percentage of B cell was 5.14 卤2.64 after TLR3 activation in intrauterine infection group.There was no significant difference between non-intrauterine infection group and non-intrauterine infection group (7.38 卤6.40).The CD4 / CD8 ratio of non-intrauterine infection group (4.30 卤2.28) was not significantly different from that of intrauterine infection group (4.75 卤3.23).5 the percentage of CD4 ~ CD25 ~ Treg cells in non-intrauterine infection group (4.69 卤3.41) was not significantly different from that in intrauterine infection group (0.474).Conclusion1the average fluorescence intensity of TLR3 protein expression in non-intrauterine infection group was higher than that in intrauterine infection group, but the expression level of PolyI:C in intrauterine infection group was higher than that in intrauterine infection group, suggesting that intrauterine infection might be related to the expression of TLR3 in infants.(2) the percentage of B cell CD4T cell mDC in non-intrauterine infection group was higher than that in intrauterine infection group, suggesting that intrauterine infection might be related to the expression of CD4T cell mDC in infantile B cell.3There was no correlation between intrauterine infection and the percentage of CD8T cell / CD4- CD25 Treg cells and the ratio of CD4- / CD8- to CD4- / CD8-, which need to be further studied.
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R512.62
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