表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对鼻咽癌CNE2细胞端粒酶活性的影响。

发布时间：2018-12-08 19:50

【摘要】：【背景】鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)是头颈部常见恶性肿瘤，临床上以放疗和化疗为主要治疗手段，虽然随着调强放疗技术发展，鼻咽患者治愈率提高及副反应减少，但是晚期患者五年生存率仍不理想，且放疗后仍有不可忽视的毒性反应。而且容易产生多药耐药（multidrug resistance, MDR）现象。目前，寻找出高效、不良反应小的新一代抗肿瘤药物已是当务之急。表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是绿茶多酚的主要成份，从绿茶中提练出来的一种高效低毒的天然化合物，同时兼有抗肿瘤和免疫调节双重作用，因此研究EGCG抗鼻咽癌的药理作用机制，具有重大的理论及实践意义，具有广阔的市场前景。随着国内外对EGCG研究的深入，其抑制肿瘤细胞增殖及促进肿瘤细胞凋亡已达到共识[1-3]。但其具体机制不是明确。端粒酶是一种具有逆转录活性的DNA聚合酶，它与细胞生长密切相关。大部分人类体细胞无或低端粒酶活性，故其分裂次数有限，最终细胞走向衰老与凋亡。相反，，少部分增殖活跃人类体细胞、生殖细胞与大部分肿瘤细胞（约占90%）其端粒酶活化，端粒不因复制而缩短，细胞走向永生化。端粒酶包含具有逆转录酶活性的逆转录蛋白（human telomerase reverse transcriptaseprotein，hTERT）和端粒酶RNA（TERC/TR）。hTERT是端粒酶的催化亚基，也是端粒酶激活的关键限速因子。本文将从细胞分子水平探讨EGCG对鼻咽癌细胞株CNE2的端粒酶hTERT及其基因表达的影响，为探讨广谱天然绿茶多酚EGCG在体内、外的抗鼻咽癌机制，为EGCG的新药开发提供理论和科研依据。【目的】通过细胞生物学、分子生物学实验，探讨广谱天然绿茶多酚EGCG在体外鼻咽癌CNE2细胞的抗鼻咽癌机制，为EGCG的新药开发提供理论和科研依据。【方法】 1.通CCK-8试验来检测EGCG对鼻咽癌CNE2细胞株的增殖抑制作用。 2.通过流式细胞学实验检测EGCG对鼻咽癌CNE2细胞株周期及凋亡的影响。 3.利用RT-PCR实验来检测EGCG对鼻咽癌CNE2细胞株hTERT mRNA表达的影响。 4.利用Western blot实验来检测EGCG对鼻咽癌CNE2细胞株hTERT蛋白及c-Myc蛋白表达的影响。【结果】 1. EGCG对鼻咽癌CNE2细胞株的增殖具有明显抑制作用，且呈现时间及药物浓度依赖性。 2. EGCG具有阻滞鼻咽癌CNE2细胞周期进展作用，使G0/G1期比例升高（P0.001），S期比例下降（P0.002）。低浓度组（100ug/mL）细胞周期阻滞呈时间依赖性，随着浓度增大及作用时间廷长细胞周期阻滞时间依赖性不明显，但细胞凋亡率升高。 3. EGCG具有促鼻咽癌CNE2细胞凋亡作用，随着作用时间廷长其凋亡率升高（P0.001），呈时间依赖性。 4. EGCG具有下调鼻咽癌CNE2细胞株hTERT mRNA（P0.001）及其蛋白的表达，且两者成正相关性。 5. EGCG具有下调鼻咽癌CNE2细胞株c-Myc蛋白的表达，且与hTERT mRNA及其蛋白的表达呈正相关性。【结论】 EGCG对鼻咽癌CNE2细胞株具有抑制增殖，促进凋亡作用，其可能原因是通过下调鼻咽癌CNE2细胞株C-Myc蛋白的表达从而抑制了hTERT mRNA的转录及hTERT蛋白翻译，造成端粒酶的活性下降。
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【学位授予单位】：广州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R739.63

【参考文献】