GC-KLF11-MAO通路介导糖皮质激素受体功能对单胺氧化酶A表达的影响

发布时间：2020-03-27 04:20

【摘要】：目的:探究GC-KLF11-MAO通路介导糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)功能对单胺氧化酶A(monoamine oxidase A,MAOA)表达的影响。方法:(1)分组及给药方法:采用3周龄SHR(spontaneously hypertensive rat,SHR)大鼠为研究对象,随机分为对照(control,CON)组,哌甲酯(methylphenidate,MPH),地塞米松(dexamethasone,DEX)组及米非司酮(mifepristone,RU486)组,每组各7只。MPH组予以MPH 4mg/kg.d;DEX组予以DEX 0.5mg/kg.d;RU486组予以RU486 54mg/kg.d;CON组则均予以灭菌注射用水。均于每日清晨8:00给药一次,灌胃,给药容积1ml/100g.d,连续用药14d。(2)行为学评估:分别采用开场实验和LAT迷宫评估各组大鼠自发活动程度和注意水平。(3)各组大鼠前额叶区GR表达:采用免疫组织化学检测,取平均分光光密度值反映其表达水平。(4)KLF11、MAOA的表达:采用免疫细胞化学染色法检测SD大鼠原代培养前额叶神经细胞KLF11和MAOA表达情况,取平均分光光密度值反映其表达水平。(5)统计学分析:采用单因素方差分析、两独立样本t检验、LDS-t检验以及Pearson相关分析对数据进行统计学处理,P㩳0.05表示差异有统计学意义。结果:(1)行为学测试结果:MPH干预后,LAT迷宫中SHR大鼠的直立次数(24.11±7.28)及穿越角落数(61.67±19.37)较干预前(33.44±7.32,87.78±20.63)明显减少(P0.05),同时在开场实验中直立次数(24.44±11.27)及穿越格子数(56.44±12.50)也较干预前(48.67±12.65,81.67±13.10)明显减少(P0.05)。DEX干预可明显减少SHR在LAT迷宫及开场实验中的直立次数(22.00±5.39,25.44±6.88)(P0.05),以及在LAT迷宫中穿越角落数(81.11±14.09,P0.05)。(2)免疫组化结果:与对照相(0.158±0.044)比较,MPH、DEX干预可明显提升SHR前额叶区GR表达(0.242±0.102,0.230±0.001)(P0.05);两药干预差异无显著性(P0.05)。(3)相关性分析:GR表达与LAT迷宫中SHR直立次数(R=0.635,R~2=0.403,P0.05)和穿越角落数(R=0.914,R~2=0.836,P0.05),开场试验中SHR直立次数(R=0.897,R~2=0.805,P0.05)及穿越格子数(R=0.92,R~2=0.846,P0.05)呈负相关。(4)细胞免疫化学结果:GR激动剂DEX干预后,SD大鼠脑神经细胞中KLF11(0.139±0.01)及MAOA(0.143±0.01)的表达均较对照组(0.108±0.01,0.123±0.00)升高(P0.05)。GR抑制剂RU486可降低MAOA(0.112±0.01)的表达,但并不能降低KLF11(0.124±0.00)的表达(P0.05)。MPH干预对KLF11(0.112±0.01)及MAOA(0.123±0.00)表达的影响与对照组比较均无明显差异(P0.05)。结论:(1)GR激动剂及MPH均能减少ADHD模型动物SHR注意缺陷多动障碍症状。(2)MPH可能通过提高前额叶区GR功能而减轻SHR ADHD样行为。(3)GR激动剂可通过GC-KLF11-MAO通路,影响单胺类神经递质功能,改善SHR ADHD样行为。
【图文】：

大鼠,对照组,浅蓝色,棕黄色

染色相对较浅，呈现棕黄色表示 GR 阳性表达，呈现浅蓝色表示 GR 阴性表达。2.2 各组 GR 表达情况根据表3及图3可见，MPH组SHR大鼠前额叶区GR表达较对照组及RU486组显著高（t=2.576，P<0.05；t=5.736，P<0.05）；DEX 组与对照组及 RU486 组相比，，GR 表达显著较高（t=2.204，P<0.05; t=5.364，P<0.05）；MPH 组与 DEX组差异无显著性（t=0.372，P>0.05）；对照组与 RU486 组相比

免疫组化染色

- 20 - 组免疫组化染色结果（×200）图 5 DEX 组免疫组化染色结果（umohistochemical staining result ofCON group(×200)Fig.5 Immumohistochemical stainingDEX group(×200)6 组免疫组化染色结果（×200）图 7 MPH 组免疫组化染色结果（×mohistochemical staining result ofRU486 group(×200)Fig.7 Immumohistochemical staining MPH group(×200)
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R749.94

【参考文献】