新生鼠高浓度氧肺损伤机制及临界值的研究

发布时间：2020-04-09 01:01

【摘要】： 目的高浓度氧(简称高氧)指氧含量高于常压下空气的气体，在新生儿救治中具有重要作用，但长时间吸入高氧可造成肺损伤而引起呼吸衰竭甚至死亡，亦可发展为支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia，，BPD)。目前，新生儿高氧肺损伤的发病机制尚未完全清楚，临床上使用高氧救治患儿时，既无明确的吸氧浓度和时间安全临界值作为参考，也无好的措施来防治高氧肺损伤。本课题旨在通过研究新生鼠不同时间内吸入不同浓度氧肺组织的病理改变、丙二醛(malondiadehyde，MDA)含量、总抗氧化能力(total anti-oxygen capability，TAOC)、一氧化氮(nitric oxide，NO)含量，以及内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的表达，试图：①探索新生鼠高氧肺损伤与肺组织脂质过氧化程度、TAOC、NO含量，以及eNOS和iNOS表达的关系，为防治高氧肺损伤提供依据。②探索新生鼠吸氧浓度和吸氧时间的安全临界值，为选择合适的氧疗浓度和时间提供实验依据。方法 1．160只出生12小时内的清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠(简称新生鼠)作为研究对象。 2．按吸入氧浓度不同随机分成4组，Ⅰ. 95%O2组，Ⅱ.60%O2组，Ⅲ.40%O2组，Ⅳ.正常空气对照组，将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组新生鼠置于密闭氧舱内，分别通入对应的已知浓度的氧气，Ⅳ组置于正常空气中。取不同时相点(12、24、48、72小时)的肺组织用于实验研究。 3．采用硫代巴比妥酸法测肺组织匀浆中MDA含量。 4．采用硝酸还原酶法测肺组织匀浆中NO含量。 5．采用化学比色法测肺组织匀浆中TAOC。 6．采用免疫组织化学染色法研究肺组织eNOS和iNOS的表达，然后采用MIG2000图像分析测量系统进行半定量分析。 7．在光镜和透射电镜下观察肺组织病理改变。结果 1．肺组织MDA含量：Ⅰ组各时相点MDA含量均显著高于其余三组(P0.01)； WP=8 Ⅱ组48和72小时的MDA含量显著高于Ⅲ组和Ⅳ组(P0.01)；Ⅲ组48和72小时的MDA含量显著高于Ⅳ组(P0.01，P0.05)。随着吸氧浓度的升高和时间的延长，MDA含量逐渐增高，而且各时相点MDA含量与吸氧浓度呈显著正相关(P0.01)。 2．肺组织NO含量：Ⅰ组各时相点的NO含量均显著高于其余三组(P0.05，P0.01)；Ⅱ组24、48、72小时的NO含量显著高于Ⅳ组(P0.05，P0.01)，72小时的NO含量显著高于Ⅲ组(P0.05)；Ⅲ组72小时的NO含量显著高于Ⅳ组(P0.01)。各时相点NO含量与吸氧浓度呈显著正相关(P0.01)。 3．肺组织TAOC：Ⅰ组各时相点TAOC均显著低于其余三组(P0.05，P0.01)；Ⅱ组24、48和72小时的TAOC显著低于Ⅳ组(P0.05，P0.01)，48和72小时的TAOC显著低于Ⅲ组(P0.01)；Ⅲ组48和72小时的TAOC又显著低于Ⅳ组(P0.01)。吸氧浓度越高，时间越长，TAOC越低，各时相点TAOC与吸氧浓度呈显著负相关(P0.01)。 4．肺组织eNOS表达：Ⅰ组各时相点eNOS的表达均显著强于Ⅲ组和Ⅳ组(P0.05，P0.01)，24和48小时显著强于Ⅱ组(P0.05，P0.01)；Ⅱ组各时相点eNOS的表达显著强于Ⅳ组(P0.05，P0.01)，48和72小时显著强于Ⅲ组；Ⅲ组48和72小时eNOS的表达显著强于Ⅳ组(P0.05，P0.01)。各时相点eNOS的表达与吸氧浓度呈显著正相关(P0.01)。 5．肺组织iNOS表达：Ⅰ组各时相点iNOS的表达均显著强于其余三组(P0.05，P0.01)；Ⅱ组各时相点iNOS的表达显著强于Ⅳ组(P0.05，P0.01)；Ⅲ组48和72小时iNOS的表达显著强于Ⅳ组(P0.05，P0.01)。各时相点iNOS的表达与吸氧浓度呈显著正相关(P0.01)。 6．肺组织病理改变：新生鼠吸入95% O212小时、60% O248小时、40%O272小时后出现不同程度的肺组织病理改变，如光镜下可见微血管扩张、充血，肺间隔增宽，肺泡内有蛋白渗出，炎症细胞浸润，出血，肺组织结构紊乱，肺大泡数量增多等；透射电镜下可见内皮细胞线粒体肿胀，内质网肿胀、破坏，吞饮小泡增多，Ⅱ型肺泡上皮细胞脱落等。随着吸氧浓度的增高和时间的延长，肺损伤程度加重。结论 1．新生鼠吸入高氧后肺组织过量的内源性NO和氧自由基的生成可能导致肺损伤；肺组织脂质过氧化程度、NO含量，以及iNOS和eNOS的表达与吸氧浓度显著正相关，而TAOC与吸氧浓度显著负相关。 2．新生鼠吸入95%O212小时，60%O248小时，40%O272小时均可引起肺损伤，随着吸氧浓度的增高和时间的延长，肺损伤加重。这提示适当控制吸氧浓度和时间，有助于减少肺损伤的发生，减轻肺损伤的程度。
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R722.1

【参考文献】