谷氨酰胺对新生儿外周血单个核细胞免疫特性的影响

发布时间：2020-04-14 18:31

【摘要】：研究目的 探讨谷氨酰胺(Glutamine，GLN)对不同新生儿外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC)的增殖和不同阶段的激活，以及对PMBC中T细胞亚群分化和自然杀伤细胞(NK细胞)活性的影响。 研究方法和内容 分别对健康早产儿、健康足月儿和感染性疾病患儿的PBMC经添加GLN(GLN组)或不添加GLN(非GLN组)培养后进行以下研究： 1、PBMC的增殖度：四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测经T细胞丝裂原—植物血凝素(Phytohemagglutinin，PHA)刺激96小时后PBMC的增殖度； 2、PBMC早期激活标志IL-2mRNA的表达：逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)检测经PHA刺激48小时后PBMC中IL-2mRNA的表达； 3、PBMC晚期激活标志CD25的表达：流式细胞仪(Flow-cytometry，FCM)检测经T细胞丝裂原—刀豆蛋白(Concanavalin A，ConA)刺激66—72小时后PBMC中CD25分子的表达； 4、T细胞亚群分化：FCM检测经ConA刺激66—72小时后PBMC中CD4、CD8T细胞亚群的阳性细胞表达率(Positive expression cell rate，PECR)； 5、NK细胞活性：FCM检测经脂多糖(Lipopolysaccharides，LPS)和白介素—2(Interleukin-2，IL-2)刺激96小时后PBMC中表型为CD3—CD16+CD56+的成熟NK细胞阳性细胞表达率。 结果 1、免疫细胞增殖度：GLN组健康早产儿和足月儿、感染患儿PBMC受PHA刺激96小时后其细胞增殖度的水平均明显高于非GLN组(P＜0.05)。 2、IL-2mRNA的表达：经RT-PCR检测，GLN对PHA激活的不同新生儿PBMC的早期激活标志IL-2mRNA表达均无明显影响(P＞0.05)。 3、CD25分子的表达：经FCM检测，GLN能使健康早产儿和足月儿外周血中ConA 谷氨酞胺对新生儿外周血单个核细胞免疫特性的彭响中文提要 激活的PBMC表面表达的晚期激活标志CD25阳性细胞表达率升高(P0.05)及健康 足月)匕外周血中ConA激活的PBMC表面表达晚期激活标志的CD25表达水平升高 (P0 .05);而对健康早产儿外周血中ConA激活的PBMC表面CD25表达水平和感 染患儿外周血中ConA激活的PBMC表面CD25分子的表达无明显影响(P0.05)。 4、T细胞亚群:GLN明显增加受ConA刺激后不同新生儿外周血单个核细胞中CD4+ 淋巴细胞数量和比例(P0.05)，同时提高CD4/CDS的比值。 5、NK细胞的活性:GLN对健康早产儿和足月儿的PBMC受LPS和IL一2刺激%小 时后cD3一cD16十cD56十分子的阳性细胞表达率无明显影响(P0.05)，但能提高感染患 儿PBMC表面的eo3一en 16+CD56+分子的阳性表达(p0.05)。 结论 1、GLN能提高体外新生儿PBMC的增殖水平，同样是体外新生儿细胞培养中增殖和 存活必不可少的物质; 2、GLN能增强体外新生儿PBMC的激活，可能有利于其免疫功能的发挥;; 3、GLN能促进CD4十T细胞增殖，提高CD4+/ CDS+比例，从而提示GLN可能对新 生儿T细胞亚群的分化成熟有明显促进作用; 4、GLN对感染患儿NK细胞的活性恢复有一定的促进作用，提示在感染情况下GLN 可减轻NK细胞功能抑制。 总之，GLN能在一定程度上能促进新生儿外周血单个核细胞体外的增殖和免疫功 能的成熟。
【图文】：

(a0eg为非GLN组;bdfg为GLN组)图2IL一ZmRNA扩增产物电泳图表2各组IL一ZmRNA的表达水平的比较(与p一actin的灰度比)例数非GLN组0.96士0.210.92士0.240.76士0.18GLN组0，95士0.210.99士0.370.85士0.02>0.05>0.05>0.050，..1CU月.1月.1j..1早产组足月组感染组对照组哥。nl叮2。RNA达水表平
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R722.1

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本文编号：2627579