新生鼠窒息后氧化应激与心肌细胞凋亡的相关性实验研究

发布时间：2020-04-18 14:52

【摘要】：目的通过建立新生鼠窒息模型,观察窒息后不同时间点心肌组织中氧化应激相关酶类(SOD、GSH-PX、XOD)活力、脂质过氧化物产物(MDA)含量和心肌细胞凋亡指数的变化。研究在窒息致心肌损伤中氧化应激对心肌凋亡的影响,为新生儿窒息致心肌损伤的预防和治疗提供可靠实验依据。 方法取7日龄新生大鼠48只,随机分为6组(第1组为正常对照组,第2-6组为窒息组：分别为窒息后6h、24h、48h、72h、7d组),每组8只。将实验动物分别放入55ml的磨口瓶中,瓶内放入0.005kg的钠石灰,待动物安静后,窒息组塞紧瓶塞半小时,取出复氧120min后,放回母鼠身边继续喂养,分别于窒息后6h、24h、48h、72h、7d后处死;正常对照组放入55ml的磨口瓶中半小时不塞瓶塞,取出120min后放回母鼠身边继续喂养,6h后全部处死。在不同的时间段采取心肌组织样本,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,并进行阳性细胞的计数；采用黄嘌呤氧化酶法测心肌组织匀浆SOD活性；采用二硫代二硝基苯甲酸法检测心肌组织匀浆GSH-PX活力；采用硫代巴比妥酸法检测心肌组织匀浆MDA含量；采用化学比色法测定心肌组织匀浆XOD活性。最后应用单因素方差分析、相关性分析等统计学方法进行数据分析。 结果(1)窒息后6h、24h、48h、72h组与对照组相比心肌SOD活力、心肌GSH-PX活力明显下降(P值0.01),窒息后7d组与对照组相比两组差异无统计学意义(P值0.05)。(2)窒息后6h、24h、48h、72h组与对照组相比心肌MDA含量、心肌XOD活性明显增高(P值0.05),窒息后7d组与对照组相比两组差异无统计学意义(P值0.05)。(3)窒息后各组心肌细胞凋亡指数明显高于对组,有显著差异(P值0.05),72h组心肌凋亡指数最高,7d组阳性细胞数减少,但仍高于正常对照组。(4)心肌细胞凋亡指数与心肌SOD活力、心肌GSH-PX活力呈直线负相关,心肌细胞凋亡指数与心肌MDA含量、心肌XOD活力呈直线正相关。 结论窒息后心肌组织氧化应激促进心肌细胞凋亡；心肌细胞凋亡为窒息后心肌损伤的一种主要形式；抗氧化剂可能是治疗窒息致心肌损伤中的一种重要的方法；在窒息后7天时心肌组织氧化应激逐渐恢复正常,心肌细胞凋亡开始减少但仍高与正常,提示对心肌损伤的防治应持续至窒息后7天,以免加重心肌损伤和产生后遗症。
【图文】：

躁动不安、呼吸频率加快;约15min时躁动不安较剧烈;约23而n时开始倦怠、不爱活动口周、眼眶明显发组;约28min时嗜睡，对外界刺激发应差，全身皮肤发组。(见图2一5)1.2心肌组织石蜡切片HE染色的病理变化:正常组:心肌细胞呈条索状排列，胞浆清晰可见，无凋亡细胞及炎性细胞渗出(见图6);窒息组:心肌细胞排列紊乱，，失去条索状结构，心内膜表面有少许炎性渗出，伴炎性细胞浸润，可见凋亡细胞。(见图7一11)图l刚入缺氧瓶:安静图2入缺氧瓶8~:开始躁动不安图3入缺氧瓶15min:躁动不安较剧烈图4入缺氧瓶23~:开始倦怠口周、眼眶明显发给

L己明医学院硕十研究生学位论文结果1动物模型的鉴定1.1缺氧表现:实验前各组新生大鼠表现正常(见图1)，窒息模型制作中随着时间的持续全部发生缺氧表现，为主要表现为入缺氧瓶后约7一8min开始出现躁动不安、呼吸频率加快;约15min时躁动不安较剧烈;约23而n时开始倦怠、不爱活动口周、眼眶明显发组;约28min时嗜睡，对外界刺激发应差，全身皮肤发组。(见图2一5)1.2心肌组织石蜡切片HE染色的病理变化:正常组:心肌细胞呈条索状排列，胞浆清晰可见，无凋亡细胞及炎性细胞渗出(见图6);窒息组:心肌细胞排列紊乱，失去条索状结构，心内膜表面有少许炎性渗出，伴炎性细胞浸润，可见凋亡细胞。(见图7一11)
【学位授予单位】：昆明医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R722.1

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本文编号：2632207