X-连锁淋巴细胞异常增生症的临床、基因和蛋白分析
发布时间：2020-04-22 18:08
【摘要】：背景:X-连锁淋巴细胞异常增生症(X-linked lymphoproliferative disease,XLP)是一种罕见的X连锁原发性免疫缺陷疾病。该病常由Epstein-Barr病毒(EBV)感染诱发,引起各种免疫细胞功能改变,从而出现噬血淋巴组织细胞增生症( Hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH)或致死性传染性单核细胞增生症(Fatal infectious mononucleosis,FIM)。迄今为止,XLP根据其致病基因的不同,分为两型:XLP-1和XLP-2,相对应的致病基因分别为SH2D1A和XIAP。这两种类型的XLP都具有复杂的临床症状,其中XLP-1型多见的有EBV相关HLH和FIM(60%)、异常丙种球蛋白血症(30%)和恶性淋巴瘤(20%~30%)3种,少见者如再生障碍性贫血、淋巴细胞性脉管炎等。值得一提的是,在XLP-1型患者中,以上临床症状并不一定是单独出现的,各个症状之间可以重叠发生。XLP-2型的临床表现也较为复杂,HLH尤其是复发性HLH尤为常见。XLP患者的临床表现在出现典型症状之前大多数都非常隐匿,由于目前诊断和治疗的手段非常有限,大多数该病患者死于儿童期,即使在使用化疗等治疗手段的情况下,生存率仍然非常低,目前唯一可以根治的方法为骨髓造血干细胞移植(Hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)。 目的:由于XLP临床表现多样,在EBV感染前临床症状轻微,早期诊断较为困难,目前针对其两种致病基因SH2D1A和XIAP的突变分析是主要的确诊手段。为了进一步了解此疾病,为临床诊断提供准确可靠的依据,本课题利用基因突变分析和流式细胞分析等手段对两型的XLP进行了临床、基因和蛋白等方面的探讨和研究。 方法:跟据患者的临床表现、家族史、免疫学特征等拟诊为XLP。提取患儿及部分亲属的基因组DNA,采用PCR法扩增SH2D1A和XIAP基因,PCR产物直接进行双向序列测定,采用流式细胞仪检测外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中SAP和XIAP蛋白表达及部分XLP-2型患者的NKT细胞数量。 结果:本课题分析了21例XLP-1型疑似患者和25例XLP-2型疑似患者,发现并确诊了1例XLP-1型患者和6例XLP-2型患者。所有的XLP患者均发现SH2D1A或BIRC4基因突变。除了1例XLP-2型患者的XIAP蛋白表达正常外,其余XLP患者的SAP和XIAP蛋白表达均明显下降或缺失。XLP-2型患者的NKT细胞数量有显著的下降。 结论:通过临床及实验室检查,本课题确诊了1例XLP-1型和6例XLP-2型患者。研究结果表明,除了针对致病基因SH2D1A和XIAP的基因突变分析,采用流式细胞仪检测PBMC中SAP和XIAP蛋白表达及NKT细胞数量也是对该病进行快速诊断的一个重要手段。通过对XLP的发病机理及临床特征进行更加深入的了解和研究,为该病的临床诊断提供了更加科学的依据。
【图文】：
阳性提示为伯基特淋巴瘤。PET-CT 提示病变侵犯双肾、肝脏、腹腔、腹膜后巴结、全身骨质，疾病分期为 IV 期。行 BFM 化疗方案，并于疗程中加用美罗，，化疗后肿块明显缩小。6 岁于我院就诊时，患儿呈缓解状态，外周血白细胞0.5×109/L，红细胞 5.09×1012/L，血红蛋白 111 g/L，血小板 362×109/L。免疫蛋白 IgG: 3.83g/L、IgM: 0.361g/L、IgA: 0.90g/L。外周血 T 淋细胞 94%（正常：50％～84％）, B 淋巴细胞 0（正常值 5％～18％）, NK 细胞 4%（正常值 7～40％），CD4+/CD8+T 淋巴细胞比值 1.71（正常值 0.7～2.8），EBV-DNA 检测36.9 拷贝/ml（ ＞500 拷贝/ml 为 EBV 阳性），肝肾功能未见明显异常。.2 SH2D1A 基因筛查结果对患儿 SH2D1A 基因的 4 个编码区进行 PCR 扩增及直接序列分析，发现第 2显子 462 位碱基 C 突变为 T，形成 TGA 终止密码子（Arg55X），为无义突变。儿母亲、姨妈及外婆该位点为 C/T 杂合，均为携带者。
A B C图 1-2 SAP 蛋白在外周血单个核细胞中的表达Figure 1-2 SAP protein express in PBMCA:Patient’s SAP express in PBMC showed a significant decrease；B: Patient’s mother’s SAP express inPBMC showed normal；C: Normal person’s SAP express in PBMC；2.4 疾病系谱：根据此家系绘制的疾病系谱。ⅠⅡ
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R725.9
本文编号：2636791
【图文】：
阳性提示为伯基特淋巴瘤。PET-CT 提示病变侵犯双肾、肝脏、腹腔、腹膜后巴结、全身骨质，疾病分期为 IV 期。行 BFM 化疗方案，并于疗程中加用美罗，，化疗后肿块明显缩小。6 岁于我院就诊时，患儿呈缓解状态，外周血白细胞0.5×109/L，红细胞 5.09×1012/L，血红蛋白 111 g/L，血小板 362×109/L。免疫蛋白 IgG: 3.83g/L、IgM: 0.361g/L、IgA: 0.90g/L。外周血 T 淋细胞 94%（正常：50％～84％）, B 淋巴细胞 0（正常值 5％～18％）, NK 细胞 4%（正常值 7～40％），CD4+/CD8+T 淋巴细胞比值 1.71（正常值 0.7～2.8），EBV-DNA 检测36.9 拷贝/ml（ ＞500 拷贝/ml 为 EBV 阳性），肝肾功能未见明显异常。.2 SH2D1A 基因筛查结果对患儿 SH2D1A 基因的 4 个编码区进行 PCR 扩增及直接序列分析，发现第 2显子 462 位碱基 C 突变为 T，形成 TGA 终止密码子（Arg55X），为无义突变。儿母亲、姨妈及外婆该位点为 C/T 杂合，均为携带者。
A B C图 1-2 SAP 蛋白在外周血单个核细胞中的表达Figure 1-2 SAP protein express in PBMCA:Patient’s SAP express in PBMC showed a significant decrease；B: Patient’s mother’s SAP express inPBMC showed normal；C: Normal person’s SAP express in PBMC；2.4 疾病系谱：根据此家系绘制的疾病系谱。ⅠⅡ
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R725.9
【引证文献】
相关硕士学位论文 前1条
1 欧丹艳;淋巴增生性疾病相关基因FAS、FASLG、SH2D1A及XIAP变异型和临床表现[D];广西医科大学;2012年
本文编号：2636791
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