氨基酸和神经递质与注意缺陷多动障碍的相关性研究

发布时间：2020-04-28 06:35

【摘要】： 注意缺陷多动障碍(ADHD)是儿童期尤其是学龄期儿童最常见的行为障碍。ADHD的病因是多方面的,包括生理、心理、社会等因素。本实验从神经生化的角度来寻找病因线索,重点研究单胺类神经递质和氨基酸在ADHD发病中的作用。 本实验在以下三个方面进行了研究:1)建立多种氨基酸同时测定的方法(包括已有和未见文献报道的可能与ADHD相关的氨基酸;2)建立与ADHD相关的单胺类神经递质及其代谢物的灵敏准确的测定方法;3)研究这些神经递质及氨基酸在ADHD中的改变,探讨ADHD可能的病理生化机制。论文主要工作如下: 一、建立柱前衍生化-高效液相色谱法测定氨基酸类神经递质的方法及其评价 所研究的几种氨基酸由于不含有芳香环等生色团,无法直接检测,因此选用柱前衍生试剂-丹酰氯,先将氨基酸衍生为具有较强紫外和荧光吸收的衍生物,通过测定其衍生产物的荧光强度对氨基酸进行定量分析。 本实验建立了一种同时快速测定谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、甘氨酸、牛磺酸5种氨基酸类神经递质的高效液相色谱法。采用KromasilC18 (4.6×250mm,5um)为色谱柱,丹酰氯为柱前衍生试剂,以曲唑酮为内标,0.1mol/L醋酸钠缓冲液:甲醇=58:42,14mmol/L庚烷磺酸钠溶液为流动相,流速为1ml/min,荧光检测器检测,等度洗脱。在1～200mg/L范围内,各组分线性关系良好(r=0.999),每种氨基酸的回收率为80.1%～92.9%。本方法简便、快速、准确,可用于脑组织中氨基酸类神经递质的测定。 二、建立高效液相色谱法测定单胺类神经递质的方法及其评价 根据实验的需要,分别建立了高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-Flu)和丹酰氯柱前衍生化-高效液相色谱法-紫外(Dns-HPLC-UV)测定单胺类神经递质及其代谢物的方法。 HPLC-Flu法是以KromasilC18 (4.6×250mm, 5μm)为色谱柱,0.1mol/L的醋酸钠溶液:甲醇(体积比10:90)为流动相,用冰醋酸调pH为5.5,其中含0.2mmol/L乙二胺四乙酸二钠。流速1.5ml/min,进样量20μl,柱温为室温,激发波长286nm,发射波长318nm。各待测物的检出限可达1.0pmol~3.0pmol,相对标准偏差(RSD%)分别为2.3%, 2.6%, 3.1%、2.9%、2.7%、1.4%和2.9%(n=5),在2~300pmol范围内,各组分线性关系良好
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R749.94

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本文编号：2643174