wnt5a对心肌祖细胞向心肌细胞诱导分化作用研究

发布时间：2020-05-09 02:10

【摘要】：目的:探讨wnt5a诱导CP15-5a细胞向心肌细胞分化的作用。方法:利用HEK293细胞扩增重组腺病毒Ad-wnt5a和Ad-GFP;转染CP15-5a细胞后,实验设置wnt5a组、GFP组和空白对照组。采用流式细胞技术检测Ad-wnt5a和Ad-GFP的转染效率;1周后,通过实时定量PCR(qRT-PCR)检测经Ad-wnt5a诱导CP15-5a细胞的心肌组织特异性转录因子GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌增强因子2C(MEF2C)的表达;2周后,Western blotting及免疫荧光技术检测经Ad-wnt5a诱导CP15-5a细胞的心肌连接因子43(CX43)、心肌肌钙蛋白T(cTn T)的表达;全细胞膜片钳技术检测钠电流(I_(Na))表达。结果:Ad-wnt5a和Ad-GFP转染效率分别为42.8%、44.3%。腺病毒转染CP15-5a细胞1周后,wnt5a组GATA4和MEF2C基因的表达量(分别为1.717±0.0.220、1.847±0.190)较GFP组和空白对照组(GATA4:1.003±0.087、0.961±0.063,P0.05,MEF2C:0.456±0.042、0.500±0.095,P0.05)明显升高,GFP组与空白对照组差异无统计学意义;腺病毒转染2周后,wnt5a组CX43和cTnT基因的表达量(分别为1.597±0.267、0.727±0.100)较GFP组和空白对照组(CX43:0.723±0.047、0.783±0.1333,P0.05;cTnT:0.217±0.021和0.253±0.102,P0.01)明显升高,GFP组与空白对照组差异无统计学意义。结论:wnt5a能诱导CP15-5a细胞向心肌细胞分化。
【图文】：

细胞倒置相差显微镜(×100)

HEK293细胞倒置相差显微镜和荧光显微镜对比图(×100)
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R725.4

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本文编号：2655423