纯氧与空气复苏对窒息新生大鼠肾小管上皮细胞的影响

发布时间：2020-05-09 13:54

【摘要】： 目的 建立窒息新生大鼠动物模型,比较纯氧与空气复苏对窒息新生大鼠肾组织超微结构和细胞凋亡的影响,为临床选择使用纯氧或空气复苏提供动物实验依据。 方法 实验动物随机分成3组,分别为纯氧复苏组(PO,n=10),空气复苏组(RA,n=10)正常对照组(N,n=10)。每组分为两个亚组,(n=5):复苏后24h组(PO24h、RA24h、N24h)及复苏后72h组(PO72h、RA72h、N72h)。 建立新生大鼠缺氧模型,按实验分组给予纯氧和空气复苏30min,建立复氧模型。分别于复苏后24h及72h断颈处死乳鼠,取双侧肾脏。按照光学显微镜及电子显微镜标本制作要求分别固定。通过HE染色、免疫组织化学技术测定细胞调亡相关酶的表达及原位末端标记技术(TUNEL)确认调亡细胞,运用图象分析技术检测各组的阳性单位PU值和调亡指数。运用透射电子显微镜观察肾近端小管及远端小管上皮细胞及肾小球超微结构的改变。 结果 PO及RA组的肾组织HE染色均可观察到肾近端和远端小管上皮水肿,管腔变小,未见出血坏死,肾小球结构清楚,未见受损,以上病理变化72h组均较24h组明显减轻,PO组与RA组之间未见明显差别。电子显微镜观察显示PO组肾组织线粒体肿胀,空泡化,嵴断裂程度均较相应RA组严重,以24h组明显。PO及RA72h组的肾组织线粒体肿胀,空泡化,嵴断裂等病变均比相应的24h组减轻。PO组Caspase-3在肾组织的表达高于RA组(P＜0.01),复苏后24h组Caspase-3在肾组织的表达高于相应72h组(P＜0.01)。TUNEL凋亡检测试剂盒检测凋亡细胞RA组的凋亡指数低于PO组(P＜0.01),相应24h组与72h组均无差异(P＞0.05) 结论 电镜观察发现PO组肾小管上皮细胞线粒体病变比RA组更为严重,提示纯氧复苏比空气复苏造成较严重的氧化应激损伤。 和RA组相比,PO组凋亡相关酶Caspase-3表达增高,TUNEL检测凋亡指数升高。提示,氧化应激可能通过细胞凋亡造成更多的组织损伤。 本实验还发现PO及RA72h组的肾小管上皮细胞线粒体肿胀,空泡化,嵴断裂等病变均比相应的24h组减轻,提示,线粒体具有自身修复能力。
【图文】：

表1复苏对窒息新生大鼠肾小管上皮细胞casPase-3表达Pu值的影响(x士s)Tab.1InfiueneeofresuscitationonthePositiveunitofcasPase-3exPressioninrenaltubularePithelialcellsofasPhy对alneonatalrats(x士s)24h72hPO8.76士1.415.08士0.77RA5.86士0.814.17士0.84N2.82士0.592.98士0.63

表2复苏对窒息新生大鼠肾小管上皮细胞凋亡指数的影响(x士s)Tab.2InfluenceofrcsuseitationontheaPoPtotieindexofrcnaltUbularePithelialcellsofasPhyxialneonatalrats(x士s)24h72h5.85%士1.73%5.79%士1.67%1.20%士0.42%0.90%士0.22%0.58%士0.32%0.42%士0，41%
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R722.1

【参考文献】

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本文编号：2656240