SB203580对病毒性心肌炎鼠的影响的实验研究

发布时间：2020-05-09 20:22

【摘要】： 病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)是小儿心血管科常见的疾病。近年来,我国VMC的发病呈上升趋势,并且已成为青少年不明原因猝死的主要原因之一。不仅如此,慢性VMC还可导致扩张性心肌病的发生,严重危害小儿生命健康,故加强研究力度很有必要。迄今,VMC的治疗尚无有效的办法,因此,阐明VMC的发病机制并根据其机制提出有效的治疗方法具有重要的理论和实践意义。本研究应用CVB3感染BALB/c小鼠建立VMC小鼠模型,干预组在感染后第四天始应用SB203580干预3天,各组在CVB3感染后第0、4、7、10天取心肌组织应用RT-PCR法及应用Western blot法对各组小鼠心肌细胞核NFκB的mRNA表达和心肌细胞核NFκB的含量进行了检测,同时测定心肌病毒载量、心肌病理积分,血TNF-α水平,观察SB203580对CVB3体内感染后不同时间、不同CVB3载量对心肌病理积分,心肌组织NFκBmRNA表达和心肌细胞核NFκB的含量的影响及心肌病理积分和NFκB的相关性。以期望了解NFκB在病毒性心肌炎体内模型的作用及SB203580对病毒性心肌炎体内模型的干预作用。研究结果表明:干预组第7、10天血中TNF-α水平、心肌细胞中病毒滴度、心肌病理积分、心肌细胞核NFκB的mRNA表达及心肌细胞核中NFκB的含量均较病毒组降低,二者4、7、10天相应指标均高于对照组。由此可见,应用SB203580干预可减轻病毒性心肌炎小鼠的心肌损害,主要通过对转录因子NFκB抑制作用,进而抑制TNF-α等细胞因子合成来完成。从新的角度解释了病毒性心肌炎的发病机制。本研究还通过直线相关研究发现病毒在心肌细胞内的繁殖在早期VMC心肌组织的病理变化有重要作用。NFκB在调节炎性细胞浸润心肌组织中发挥了重要作用,病毒性心肌炎心肌组织的病理变化与NFκB有关,揭示NFκB在心肌炎的发生发展中起重要作用。干预NFκB的激活,可能减少免疫效应细胞对心肌的攻击,从而减轻心肌的炎症浸润及坏死,维持其结构及功能完整。本研究病毒性心肌炎的防治提供了有益的探索,也为其它炎症相关疾病的治疗研究提供一个新思路。
【图文】：

吸管,柯萨奇B3病毒,细胞的,细胞

将柯萨奇B3病毒液在灭菌小试管内作连续的10倍稀释，即用1ml吸管吸，加入已装有 l.8ml 的 MEM 培养液（含 2%新生牛血清）的第一支小试充分振荡；）另换 1 支新的 lml 吸管，吹打混合后，吸取 0.2ml 移入第二管 MEM 换吸管，如上充分振荡和吹打混匀后，再吸取 0.2ml 移于第三管；）连续如此操作，将 CVB3病毒液稀释成 10-1-10-6十个滴度。吸取每一 0.2ml，，加到已铺 HeLa 细胞的 96 孔极中。每个稀释度四个复孔；）每天观察细胞的病变情况，病变细胞浮起、折光性增强。病变细胞>变孔。连续观察 5 天，并作记录。按 Reed- Muench 方法计算 CVB3的 T统计学处理量资料用 x ±S 表示，分别采用 F 检验、t 检验、直线相关分析进行数据理由 SPSS10.0 完成。实验结果：CVB3的 TCID50 为：107/0.1ml。

细胞,小鼠,毛色

病毒性心肌炎小鼠模型料与方法分组及动物模型制备：160只4周龄BALB/c雄性小鼠随机分为正常对照毒组（n=60）、治疗组（n=60）将病毒组及干预组每只小鼠均腹腔接/0.1ml[40,41,42]的CVB3病毒液0.lml，正常对照组小鼠均腹腔接种不含病毒lm1。治疗组从病毒接种第4天开始，给予SB203580（配制成10μmol/L），1次/天，共3天。实验观察：接种后每天观察动物的活性状态、饮食情况及毛色变化，记，并于 0 天（接种当日）、4 天、7 天、10 天断髓处死小鼠前分别给存活图 1.1.4.2 hela 细胞 50%病变Fig1.1.4.2 50% hela cell inflammatory lesion
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R725.4

【参考文献】