特发性血小板减少性紫癜患儿骨髓巨核细胞GATA-1和NF-E2的研究

发布时间：2020-05-18 08:05

【摘要】： 研究目的特发性血小板减少性紫癜(ITP)是儿科最常见的出血性疾病。目前普遍认为ITP发病机制主要是因为病理免疫使巨核细胞成熟障碍及血小板释放障碍。近年来，国外学者通过体外细胞系和基因敲除(gene knockout)小鼠的研究发现，转录因子(transcription factor)GATA-1对巨核细胞的分化成熟起重要作用，而另一个转录因子NF-E2则作用于巨核细胞成熟的晚期和血小板的生成阶段。本实验通过检测ITP患者巨核细胞上的GATA-1、NF-E2的表达情况，研究它们对巨核细胞的成熟和血小板分化的影响，从而探讨这两个转录因子在ITP发病中的作用。对象和方法 (1)ITP患儿47例，其中AITP患儿28例，CITP患儿19例，均于治疗前抽取骨髓1.5ml～3ml进行检验。观察其中9例大剂量静脉注射丙种球蛋白(HDIVIgG)治疗有效的AITP患儿，待血小板升至正常后，再次抽取骨髓检验。对照组为21例正常儿童。(2)骨髓巨核细胞分离：将1.5ml～3ml骨髓迅速注入改良PBS中，采用免疫磁珠法分离出单个骨髓巨核细胞，制备巨核细胞涂片。(3)骨髓巨核细胞GATA-1和NF-E2检测：采用ABC法进行免疫细胞化学染色，，检测GATA-1和NF-E2的阳性率和积分值。(4)用统计学分析软件包SPSS10.0进行统计学分析，实验数据用均数±标准差(±s)表示，分别采用单因素方差分析，配对样本t检验及直线相关分析，以P＜0.05为差异有显著性。结果 1．骨髓巨核细胞GATA-1阳性率的比较：AITP患儿组GATA-1的郑州大学2003年硕士学位论文特发性血小板减少性紫瘫患儿骨髓巨核细胞GAI’A一1和NF一EZ的研究阳性率为82.36士3.53%，正常对照组为76.29士3.87%，9例^ITP患儿HnlvlgG 治疗前为81.89士3.95%，治疗后为91.89士3.95%，CITP患儿组为96.16士2.83%。 AITP患儿组G戌1’A一1的阳性率高于正常对照组(尸0.05)，CITP患儿组GAI人一1 的阳性率高于正常对照组(尸0.05)，且CITP患儿组GAI’A一1的阳性率高于AITP 患儿(p0.05)，9例AITP患儿经HDIVIgG治疗后明显高于治疗前(t=ll.339，尸0.01)。2.骨髓巨核细胞GAI，A一1积分值的比较:AITP患儿组GAI’A一1的积分值为1.584士0.1457，正常对照组为一726士0.1284，9例AITP患儿HoIVIgG治疗前为1.877士0.1128，治疗后为2.884士0.1683，CITP患儿组为3.253士0.1565。 AITP患儿组GAI’A一1的积分值高于正常对照组(尸0.05)，CrrP患儿组GAI’A一1 的积分值高于正常对照组(尸0.05)，且CITP患儿组GArA一1的积分值高于ArrP 患儿组(p0.05)，9例AITp患儿经HDIVIgG治疗后明显高于治疗前(t=24.487， P0.01)。3.骨髓巨核细胞NF一EZ阳性率的比较:AITP患儿组GAI’A一1的阳性率为81.82士3.59%，正常对照组为73.90士3.71%，9例AITp患儿HDIVIgG治疗前为79.44士2.40%，治疗后为91.44士5.25%，CITP患儿组为94.68士2.36%。AITP 患儿组NF一EZ的阳性率高于正常对照组(PO，05)，CITP患儿组NF一EZ的阳性率高于正常对照组(尸0.05)，且CITP患儿组NF一EZ的阳性率高于AITP患儿组 (尸0.05)，9例AITP患儿经HnIVIgG治疗后明显高于治疗前(t=9.219，p0.01)。 4.骨髓巨核细胞NF一EZ积分值的比较:AITP患儿组GAI人一1的积分值为1 .857 士0.1491，正常对照组为1.683士0.1218，9例AITp患儿HDIVIgG治疗前为1.812 士0.0646，治疗后为2.871士0.1886，CITP患儿组为3，232士0.1316。AITP患儿组 NF一EZ的积分值高于正常对照组(尸0.05)，CITP患儿组NF一EZ的积分值高于正常对照组(尸0.05)，且CITP患儿组NF一EZ的积分值高于AITP患儿组(尸0.05)， 9例AITP患儿经HDIVIgG治疗后明显高于治疗前(t二18.231，P0.01)。5.相关性分析:正常对照组GATA一1与NF一EZ的含量有显著相关性(二+0.877，尸0.01); AITP患儿组GAI’A一l与NF一EZ的含量有显著相关性(r=+0.836，P0.01);CITP患儿组GAI…A一1与NF一EZ的含量有显著相关性(r=+0.919，尸0.01)。结论(l)转录因子GAI’A一1与NF一EZ在rrP患儿骨髓巨核细胞的表达增二者在CITP患儿组的表达水平不仅高于正常，且明显高于AITP患儿组，表 GATA.1和NF一EZ在rrP时对巨核细胞的分化成熟确有一定作用;(2)转录因强明郑州大学2003年硕士学位论文特发性血小板减少性紫瘫患儿骨髓巨核细胞GATA一1和NF一EZ的研究子GAI’A一1与NF一EZ之间存在正相关关系，即随着GAIA一1水平的升高，NF一EZ 的表达也随之升高，NF一EZ可能作用于G户a人一1的“下游”;(3)尽管ITP时巨核细胞GAI’A一1和NF一EZ的表达增强，但是仍然能发现巨核细胞的成熟障碍，血小板的数量也并没有因此显著升高，说明尚有其它因素参与调控巨核细胞成熟与血小板生成;(4)大剂量静脉注射丙种球蛋白可促进G川叭一1与NF一EZ的表达，具体机制尚不清楚。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R725.5

【参考文献】