钙离子对新生大鼠脑缺氧缺血后CREB磷酸化及神经元凋亡的影响

发布时间：2020-05-22 04:38

【摘要】：研究背景：缺氧缺血性脑病(HIE)是围生期常见并发症，主要由于窒息后缺氧缺血性脑损伤(HIBD)引起，可影响新生儿的生命和健康，甚至可遗留严重后遗症如脑瘫、癫痫等或致患儿死亡。发病机制尚不明确，以前对缺氧缺血(HI)后钙离子内流触发神经元凋亡的作用机理研究较多，现今国内外己从分子水平对c-AMP反应元件结合蛋白(CREB)在缺氧缺血性脑损伤中的作用进行研究，并表明P-CREB(磷酸化的CREB，即活化的CREB)在HIBD中起着抑制凋亡、促进修复的作用。另有研究报道了钙离子内流对CREB调控的后效基因转录有激活的作用，这种激活作用是通过影响CREB磷酸化实现的。本实验通过探讨细胞内钙超载对CREB磷酸化的影响，从而进一步探索钙离子在HIBD后神经元损伤中的作用及钙离子拮抗剂在HIBD治疗中的应用价值。目的：本研究探讨Ca~(2+)对新生大鼠脑缺氧缺血(HI)后c-AMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化及神经元凋亡的影响，进一步研究HIE的发病机制，为临床治疗缺氧缺血性脑损伤(HIBD)提供一定理论依据。方法： 7日龄SD大鼠(n=126)，完全随机分为3组：假手术组42 第四军医大学硕士学位论文只(仅作颈部正中切口，游离但不结扎右颈总动脉);缺氧缺血组42只、缺氧缺血加钙离子拮抗剂组(干预组)42只。后两组用O号线结扎右颈总动脉2h，然后放入80mL·L一，氧气和 920mL一’氮气的混合气仓中予以低氧2h，制备成缺氧缺血(Hl) 脑损伤模型。干预组动物分别在模型制成前、后腹腔内注射钙离子拮抗剂尼莫地平。用免疫组织化学ABC法观察各组HI后不同时间点右侧海马CAI区P一CREB阳性细胞数;用TUNEL法观察各组HI后不同时间点右侧海马以，区凋亡细胞数。结果: Hl组右侧海马CAI区P一CREB表达较对照组明显增强(尸 0.01)，并于缺氧缺血后4h达高峰后逐渐下降;HI组的凋亡细胞数较对照组也明现增多，并于缺氧缺血后48h达高峰后逐渐下降。干预组右侧海马CA，区P一CREB的表达较HI组无明显减少 (乃0.05)，但凋亡细胞数较HI组明显减少(尸0.01)。结论: 1.钙离子超载是触发神经元死亡的主要原因之一。 2.未发现钙离子拮抗剂对CREB磷酸化激活产生影响，因此，，钙离子内流通过激活CREB而在HIBD发病中起一定的保护作用的机制需进一步研究确定。 3.钙离子拮抗剂(尼莫地平)在HIBD治疗中的确能减轻神经元损伤，又未发现对CREB磷酸化激活产生影响，有望成为临床预防和治疗缺氧缺血性脑病的理想用药。
【学位授予单位】：第四军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R722.12

【参考文献】