胆红素脑病时皮层及海马TrkB及其mRNA表达的实验研究

发布时间：2020-06-13 08:11

【摘要】： 目的通过建立胆红素脑病模型,观察脑源性神经营养因子(brain derivedneurotrophic factor,BDNF)的特异性受体酪氨酸激酶B(Tyrosine kinase B,TrKB)及其mRNA在大脑皮层及海马的表达情况,探讨其在胆红素脑病中可能的保护作用及机制,为探索新生儿胆红素脑病临床治疗提供新的理论基础。 方法取出生后2-5天内的新生豚鼠60只(昆明医学院动物中心提供),随机分为6组(C4h组、C8h组、T_14h组、T_18h组、T_24h组、T_28h组),每组10只。对照组分为4小时组(C4h组)和8小时组(C8h组);实验组分为:腹腔注射晶体胆红素100μg/g后4h处死组(T_14h组)、8h处死组(T_18h组),腹腔注射晶体胆红素200μg/g后4h处死组(T_24h组)、8h处死组(T_28h组)。分别在给药后相应时间处死,其脑组织按相应步骤进行固定、石蜡包埋等制成石蜡切片后用免疫组化、原位杂交技术进行实验研究,并应用图像分析仪分别进行阳性细胞的计数和平均灰度值的测量,最后应用单因素方差分析等统计学方法进行数据分析。 结果(1)对照组和实验组在大脑皮层和海马区域均可见到表达TrKB及TrKBmRNA的阳性神经细胞。(2)TrKB的表达情况如下:①大脑皮层:大脑皮层实验组较对照组表达均有升高趋势,T_18h组较T_14h组,T_28h组较T_24h组表达均增高(P＜0.05),T_28h组较其他各组表达明显升高(P＜0.01)。②海马区域:实验组较对照组表达均有升高趋势但海马各区升高趋势各有所不同。(3)TrKB mRNA的表达情况如下:①大脑皮层:实验组较对照组表达均增高,T_18h组较T_14h组,T_28h组较T_24h组表达均增高(P＜0.05),T_28h组较其他各组表达均增高(P＜0.01)。②海马区域:实验组较对照组表达均有升高趋势,且阳性细胞表达强度升高明显(P＜0.05),但海马各区升高趋势各有所不同。 结论(1)TrKB、TrKB mRNA在正常新生豚鼠大脑皮层及海马各区均有表达,提示TrKB在神经元的正常生存、分化、生长、增殖和其他正常的生理功能方面有重要作用。(2)TrKB及TrKB mRNA在皮层的表达是随着时间和损伤程度的加重而表达增高的,存在一定的时间剂量依赖关系;TrKB及TrKB mRNA在海马各区表达是升高的,但各区升高趋势不尽相同,时间剂量依赖关系不明显。(3)不同区域TrKB及TrKB mRNA对胆红素导致的神经损伤反应也不尽相同。TrKB及TrKB mRNA在胆红素脑病的表达存在时空变化,不同时间段、不同损伤程度表达的方式和程度不一样,皮层和海马对胆红素损伤做出的反应速度和强弱也不尽相同,皮层对胆红素损伤的反应可能早于海马。(4)TrKB及TrKB mRNA在胆红素脑病时表达上调,提示其在胆红素脑病神经修复中有一定的作用;提示胆红素脑病时大脑对TrKB的配体BDNF需求增加,适时地补充BDNF,可以使TrKB与其配体BDNF最大限度的结合发挥其对脑神经元的保护作用。
【图文】：

组豚眼呼吸平祖

组反应迟钝.呼吸节伸加
【学位授予单位】：昆明医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R722.17

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本文编号：2710891