MS儿童皮质醇代谢及MS幼鼠皮质醇代谢关键酶5α-R1及11β-HSD1的研究

发布时间：2020-06-13 08:59

【摘要】： 一、肥胖代谢综合征幼鼠模型建立及肝脏组织5α-还原酶1及11β-羟类固醇脱氢酶1的研究目的:在本研究第一部分,以高脂、高脂高盐饮食诱导大鼠胰岛素抵抗,脂代谢紊乱等。观察不同饮食对体脂分布、胰岛素敏感性及相关代谢指标影响,以期构建代谢综合征幼鼠模型。探讨代谢综合征幼鼠肝脏中皮质醇代谢关键酶5α-还原酶1及11β-羟类固醇脱氢酶1的表达及其对皮质醇代谢功能的影响。方法:50克左右雄、雌性SD大鼠随机分为3组:普通饮食组(NC组):高脂组(FC组);高脂十高盐组(FSC组)。测体重、体长、腹围、血压,观测内脏脂肪重量、血脂、血皮质醇等,行口服葡萄糖耐量试验及胰岛素释放试验评价血糖及胰岛细胞功能。取新鲜肝脏组织,测定5α-还原酶1及11β-羟类固醇脱氢酶1mRNA含量及两酶mRNA含量比值。结果:高脂高盐饮食使大鼠腹围、血压、内脏脂肪、空腹血糖、胰岛素水平均比对照组显著增加,血脂紊乱加重并表现出显著的胰岛素抵抗。高脂和高脂高盐饮食使幼鼠5α-还原酶1 mRNA增加而11β-羟类固醇脱氢酶1 mRNA含量减少,两酶mRNA含量比值显著增加,上述指标均与血皮质醇水平显著相关。结论:我们成功以高脂高盐饮食诱导了肥胖代谢综合征幼鼠模型,幼鼠体内出现了胰岛素抵抗及脂代谢紊乱等,腰围、血压、体重、内脏脂肪重量等代谢综合征相关指数显著增加。肝脏组织高表达5α-还原酶1及低表达11β-羟类固醇脱氢酶1可加重胰岛素抵抗和血脂紊乱,糖皮质激素代谢及调控异常可能与代谢综合征发生相关。提示针对性调控5α-还原酶1及11β-羟类固醇脱氢酶1表达和活性可能是代谢综合征的一个病因治疗。二、肥胖代谢综合征儿童皮质醇代谢的研究目的:探讨血清皮质醇(COR)在儿童代谢综合征(MS)发生、发展过程中的意义,找寻其中规律。方法:对96名确诊的肥胖儿童,按照Cook提出MS的标准,根据腰围(WC)、血压(BP)、血脂及血糖将患儿分为MS组和非MS组,收集其临床基本资料,测量人体参数,测定血清COR、血脂,行口服糖耐量试验(OGTT)和胰岛素释放试验,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并对上述资料进行统计学分析。结果:血清COR水平MS组高于非MS组(P＜0.05);相关分析提示COR水平与WC、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)及MS组分数(nMSc)呈正相关(P＜0.05),与血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平呈负相关(P＜0.05);回归分析表明WC、SBP、DBP是血清COR的显著影响因素。结论:血清COR与胰岛素抵抗及其他多因素可能共同参与MS发病及进展过程。
【图文】：

扩增曲线,循环数,拷贝数,模板

通过比较产物积累的速度(时间)来间接比较初始模板值(thresholdcycle)是指每个反应管内的荧光信号到达设定的循环数(如图1所示)。在LightCyCler上用交点(croSSingpoi以荧光超过本底达到可检测水平时的临界数值(threshOld)作一相交，交点所对应的循环数。PCR循环在到达Ct值所在的循环数正的指数期，此时微小误差尚未放大，因此Ct值重现性极好，与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多，此成为定量的检测指标。对定量时，同一cDNA样品不但进行待测目的基因的扩增还有同基因以消减各部试验步骤的误差。最终某一目的基因的相对表达的基因的相对含量/内参照基因的相对含量”的比值来体现的，经为2内“照从Ik]C‘值一翎基’”C‘位即2△C‘。为保证标准质粒模板的稳定性以个实验的重复性和均一性，需避免试剂的反复冻融，稀释的标准存，样品需分装，且全部操作过程应在冰浴中进行。峭的瀚娜切阴

血脂代谢,状况

平均显著高于NC组(P(0.05)HDL一C水平均低于NC组 (P>0.05);FSC组与FC组I司，TC、TG、HDL一C和LDL一C水平的差异均无统计学意义(P)0.05)。见表3及图2。表3各组之间血脂代谢状况比较(x士s)LDL一C(nunol/L)HDH一C(mmol/L)TG(nunol/L)TC(nunol/L)NC组 0.94士 0.021.11士0.03FC组 1.99士0.04林0.98士0.03*FSC组2.11士0.07**0.73士0.02*‘与NC组比较”只0.05，’P>0.05.81士0.03.97士0.03材 1.02士0.04林 3.22士0.22 3.56士0.14** 4.04士0.09**
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R725.8

【参考文献】