Fzd6在儿童急性T淋巴细胞白血病中的异常表达及对预后的影响

发布时间：2020-06-21 01:41

【摘要】：目的:急性淋巴细胞白血病(ALL)是儿童最常见的恶性肿瘤疾病,根据受累的淋巴细胞类型不同可分为急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)和急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)。其中,T-ALL仅占约10%~15%的儿童ALL,但其5年生存率仅60%~75%。因此,阐释新的T-ALL发病机制及增加有效评估患儿预后的指标将有助于改进治疗方案,提高患儿生存率。方法:本研究通过提取13例T-ALL病人骨髓样本及4例对照样本单个核细胞RNA,进行全转录组测序,分析测序数据,绘制热图、采用GO分析、KEGG信号通路,筛选出病人样本中表达增高的Wnt信号通路相关Fzd6基因;分析GEO数据库全球多中心数据中T-ALL的Fzd6基因表达;采用实时荧光定量PCR、Western-blot和免疫荧光检测T-ALL病人标本和T-ALL细胞株(Jurkat、CCRF-CEM、Molt4以及Cutll1)的Fzd6蛋白表达水平;收集40例T-ALL患儿从确诊到2019年3月病历资料,统计患儿复发率及总生存率,绘制生存曲线分析Fzd6对T-ALL患儿预后的影响。结果:通过分析全转录组测序数据,发现与对照组相比,T-ALL病人骨髓细胞中Wnt通路相关基因Fzd1、Fzd2、Fzd6表达分别增高7倍、16倍和13倍,Fzd3表达下降5倍;全球多中心数据库数据显示T-ALL中Fzd6表达增高;采用实时荧光定量PCR检测14例T-ALL病人样本及T-ALL细胞株(Jurkat、CCRF-CEM、Molt4、Cutll1)的基因表达水平,发现仅Fzd6变化趋势与测序结果一致,采用Western-blot和免疫荧光检测T-ALL细胞株中Fzd6蛋白表达水平,发现其表达水平较正常T细胞增高;统计分析40例T-ALL患儿从确诊到2019年3月病历资料,发现在MRD阳性的24例患儿中,Fzd6表达增高的患儿预后较差。结论:Fzd6在儿童T-ALL中表达增高,高表达Fzd6的T-ALL患儿预后差。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R733.71
【图文】：

信号通路,差异表达,对照组,数据显示

15图 1-1 T-ALL 与对照组中差异表达 GPCR 及关信号通路Figure 1-1 Differential expression of GPCR and related signal pathways in T-ALLa): The heatmap of differential expression GPCRs; b): GO analysis of differential expressionGPCRs ; c): KEGG pathway analysis of differential expression GPCRs. *, p＜0.05 vs Ctrl; ** ,p＜0.01 vs Ctrl.2.4 GEO 数据显示 Wnt 信号通路相关基因在 T-ALL 中表达增加

数据库,对照组,无差异,样本

重庆医科大学硕士研究生学位论文在 70 个差异表达的 GPCR 基因中，参与 Wnt 信号通路的 GPCR 有 4 个，分别为 Fzd1、Fzd2、Fzd3 和 Fzd6。其中，Fzd1、Fzd2 和 Fzd6 在 T-ALL 中均较对照组表达增加，而 Fzd3 较对照组表达降低（图 1-1 a）。为进一步验证上述 4 个 GPCR基因在 T-ALL 中的表达情况，本研究通过检索 GEO 数据库全球多中心数据，发现在 GSE26713 数据库中与 7 例正常样本相比，117 例 T-ALL 样本中 Fzd1、Fzd2 及Fzd3 表达无差异，而 Fzd6 表达增加，差异有统计学意义（p＜0.0001，图 1-2）；在 GSE66638 数据库中与 2 例正常样本相比，8 例 T-ALL 样本中 Fzd1 和 Fzd2 表达无差异，Fzd3 表达下降 (p=0.0089，图 1.3 c)，Fzd6 表达增加 (p=0.0115，图 1-3d)。

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