【摘要】： 肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)在儿童肺炎中约占20～40%,除了肺部症状以外,还有肺外并发症多样性的特点,近几年来该病的发病率有所增加。肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia,MP)的致病机制到目前为止仍不十分清楚,主要有细胞吸附损害及免疫损害两种学说,尤其以免疫损害学说为研究热点。针对MPP患儿免疫方面的研究,虽然国内外学者在血液、痰液水平上已经有大量文献报道,但结论并不完全一致,而且很少有支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)免疫学改变的报道。BALF直接来自病变的肺组织,能更客观、更直接的反应肺组织的病变炎症程度及MP感染后肺部的免疫功能状态。在细胞免疫中,T淋巴细胞在调节人体免疫系统方面扮演着重要角色,一旦发现抗原递呈细胞(antigen-presenting cell,APC)递呈的抗原,T淋巴细胞用自身表面的抗原受体与这些抗原结合,这种结合引起T淋巴细胞的活化并克隆增殖,同时分泌多种细胞因子,引起免疫系统中的巨噬细胞和B细胞活化并参与协调其一系列免疫反应。因此,研究MPP患儿BALF中的T淋巴细胞和活化后表面分子表达、BALF中细胞因子水平的变化、BALF中细胞学分类情况,有助于我们了解MPP的免疫损伤机制。 研究目的: 探讨MPP患儿BALF中CD_3~+T淋巴细胞及活化后表面分子CD~(3+)CD_(69)~+、CD_3~+CD_(25)~+、CD_3~+HLA-DR~+的表达水平,白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10),细胞学分类的改变,以了解MPP的免疫损伤机制。 研究对象: 2008年8月～2009年3月在我院同期住院的部分患儿,根据诊断分成3组:(1)肺炎支原体肺炎组(MPP组):患儿共33例,其中包括轻症23例、重症10例;另外有13例患儿做了急性期和恢复期的自身对照。(2)非肺炎支原体感染肺炎组(nMPP组):同期在我院呼吸科收治的非肺炎支原体肺炎患儿15例。(3)对照组:共10例,均为本院支气管异物患儿及无肺部病变的手术患儿。 研究方法: 所有患儿均进行支气管肺泡灌洗术,收集BALF采用流式细胞仪检测活化T细胞表面活化分子CD_3~+CD_(69)~+、CD_3~+CD_(25)~+、CD_3~+HLA-DR~+的表达水平,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6和IL-10水平,BALF细胞学检查采用染色后进行细胞学分类。所有资料采用SPSS 11.5软件分析统计分析。各组间均数的比较采用独立样本t检验,样本例数较少方差不齐采用矫正t检验。 研究结果: 1.MPP组与nMPP组和对照组之间BALF中活化T细胞、细胞因子及细胞分类比较:MPP组患儿BALF内CD_3~+T淋巴细胞的表达明显低于nMPP组和对照组(P＜0.01):而CD_3~+CD_(69)~+、CD_3~+CD_(25)~+、CD_3~+HLA-DR~+的表达则明显高于nMPP组和对照组(P＜0.01)。MPP组BALF内巨噬细胞百分数高于nMPP组(P＜0.05),与对照组无显著差异。MPP组BALF内中性粒细胞百分数明显低于nMPP组(P＜0.01),高于对照组(P＜0.05)。MPP组BALF内淋巴细胞百分数低于nMPP组和对照组(P＜0.05)。嗜酸性粒细胞百分数在三组间比较均无差别(P＞0.05)。MPP组BALF内IL-6、IL-10的表达明显高于对照组(P＜0.01),与nMPP组无显著差异。 2.MPP自身对照恢复期与急性期比较:与急性期比较,MPP恢复期患儿BALF内T细胞的CD_3~+的百分数显著增高(P＜0.01),CD_3.+CD_(69)~+的百分数显著降低(P＜0.01),CD_3~+CD_(25)~+的百分数降低(P＜0.05),CD_3~+HLA-DR~+两者无显著差异。恢复期组BALF内淋巴细胞百分数显著增加(P＜0.01),巨噬细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞百分数均无显著差异。恢复期组BALF内IL-6显著降低(P＜0.01),IL-10无显著变化。 3.MPP重症组与轻症组之间的比较:MPP重症组BALF内T细胞CD_3~+CD_(25)~+表达明显高于MPP轻症组(P＜0.01),而两者的CD_3~+、CD_3~+CD_(69)~+、CD_3~+HLA-DR~+的表达无统计学意义。MPP轻症组与MPP重症组BALF内巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞分类计数均无显著差异。BALF内IL-6和IL-10的表达MPP重症组均高于轻症组(P＜0.05)。 结论: 1.MP感染可导致肺部T细胞活化功能明显增强,表明T细胞活化异常可能是MP肺炎的发病机制之一; 2.T细胞活化功能的强弱与MP肺炎的病情及病程有关; 3.MP感染可导致BALF中淋巴细胞百分比降低及CD_3~+T淋巴细胞减少,表明T淋巴细胞产生减少参与MPP的发病机制; 4.急性期MPP患儿BALF内IL-6和IL-10水平明显高于正常组,而且重症高于轻症,表明BALF内IL-6和IL-10水平与病情及病程有关。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R725.6
【图文】：
Cn3+及eD3+Co69+、Cn3+Cn25+、Co3+HLA一nR+检测原理示意图
ELISA法检测IL一10(或IL一6)原理示意图
【参考文献】
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2729135
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