新生大鼠缺血缺氧性脑损伤NF-κB（P65）的表达及与细胞凋亡的关系

发布时间：2020-06-25 15:19

【摘要】： 目的:利用新生大鼠缺血缺氧性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)动物模型,观察缺血缺氧性脑损伤后不同时间脑皮质细胞形态变化、NF-κB(P65)的表达及脑细胞死亡形式,探讨HIBD后NF-κB(P65)的表达与细胞凋亡的关系,为缺血缺氧性脑病提供实验和理论依据。 方法:7日龄SD大鼠128只,雌雄不限,体重12～18g,随机分为假手术组和缺血缺氧组(均分为处理前、处理后2h、6h、12h、18h、24h、48h、72h组)共16组,每组各8只,缺血缺氧组动物采用阻断右侧颈总动脉后置于含8%O_2的低氧环境中2小时,建立缺血缺氧性脑损伤动物模型并对其行为进行观察。根据实验设计取各组新生大鼠脑组织,用组织化学(HE染色法)、免疫组织化学和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)在光镜下观察皮质脑组织的病理改变,通过免疫组化法测定NF-κB(P65)核阳性细胞数及用TUNEL法测定凋亡细胞指数。 结果:缺血缺氧后新生大鼠出现不同程度的行为异常。HE染色缺血缺氧后2-6h右侧脑神经细胞水肿及少量局灶性坏死,缺血缺氧后72h右侧脑组织中可见界限清楚的坏死灶。正常脑组织内仅观察到少量位于胞浆中的NF-κB(P65)阳性细胞及凋亡细胞。缺血缺氧后NF-κB(P65)阳性细胞数明显增加,且发生核移位,缺血缺氧后2h即可在皮质部位观察到NF-κB(P65)核阳性细胞数;缺血缺氧后6-18h,NF-κB(P65)核阳性细胞数明显增多;缺血缺氧后24～48h达到高峰:然后,随缺血缺氧时间的延长,NF-κB(P65)核阳性细胞数逐渐减少,至缺血缺氧后72h时,NF-κB(P65)核阳性细胞数仍比假手术组高。缺血缺氧后2h皮质部位出现凋亡细胞;缺血缺氧后6h凋亡细胞明显增多,凋亡细胞出现高峰时间为18h～24h,然后凋亡细胞逐渐减少,细胞形态逐渐以坏死为主,缺血缺氧后48h～72h凋亡细胞明显减少,坏死严重。 结论:在HIBD后24h内,随着NF-κB(P65)的合成,脑组织内凋亡细胞逐渐增多,表明在此阶段神经细胞仍处于可逆性损伤阶段,提示此阶段NF-κB(P65)的促损伤作用主要以促进细胞凋亡为主。HIBD 18h～24h后,凋亡细胞逐渐减少,神经细胞的死亡以坏死为主,此阶段神经细胞呈不可逆性损伤,提示此阶段NF-κB(P65)的促损伤作用主要以促进细胞坏死为主。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R722.1
【图文】：

HIBD48h(X200)HIBD72h(X200)5:假手术组大脑皮质部位仅有极少量的胞浆染色，未见明显的NF一出(P65)胞;缺血缺氧后6-18h右侧大脑皮质部位NF一妞(P65)核阳性细胞逐渐增多氧后2今碑8h，右侧大脑皮质部位NF瑰B(P65)核阳性细胞数达到高峰。48刁脑皮质部位NF一妞(P65)阳性细胞逐渐减少。

【参考文献】

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本文编号：2729334