β2-MG与ADA联合检测儿童传染性单核细胞增多症诊断价值研究

发布时间：2020-06-26 13:44

【摘要】：目的:传染性单核细胞增多症(Infectious mononucleosis,IM)多是由EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)导致的一种急性或者亚急性淋巴细胞良性增生的传染性疾病。原发性EBV感染多呈隐性感染,有临床表现者近50%表现为IM。IM的发病机制尚未完全阐明,目前一致认为免疫病理损伤与其密切相关。3~5岁是我国儿童EBV感染的高峰年龄,感染率高达90%。本病临床表现多样,多具有不同程度的发热、颈部淋巴结肿大、咽峡炎、眼睑水肿、肝脾肿大、皮疹、肝功能损害、外周血淋巴细胞及异型淋巴细胞增多等,因临床表现缺乏特异性以及首发症状的多样性,而易被误诊。由于儿童的自身发育特征特别是婴幼儿的细胞免疫和体液免疫系统尚未发育完善,一些常规的实验方法对于诊断儿童IM存在一定局限性,有些实验需要特殊设备,费用较为昂贵,不易普遍开展,尤其是广大基层医院,且目前又没有新的检测方法出现。β2-微球蛋白(Bata2-microglobulin,β2-MG)是细胞表面人类淋巴细胞抗原(HLA)的β链(轻链)部分,与免疫球蛋白稳定区的结构相似。血清β2-MG存在于除红细胞和胎盘滋养层细胞以外的有核细胞内,主要由淋巴细胞产生。目前国内外研究报道β2-MG在一些淋巴增殖性疾病中明显增高。腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase,ADA)是一种与机体免疫系统密切相关的代谢酶类,参与细胞免疫,是T淋巴细胞活力的标志物。鉴于IM患儿多表现为B淋巴细胞的增殖,T淋巴细胞处于激活状态,因此本研究拟探索新的检测指标为目的,检测血清中与淋巴细胞相关的β2-MG与ADA在IM患儿中的表达水平,辅助诊断儿童IM,以探讨β2-MG与ADA联合检测对儿童IM临床诊断的价值,同时对其变化的原因进行初步探讨。β2-MG与ADA在普通生化分析仪均能检测,且结果稳定,重复性好,敏感性高,方法简便快速,且价格低廉,具有在一般的实验室均可开展的优势。方法:1研究对象病例来自2018年1月-2019年1月期间河北北方学院附属第一医院儿内科,分3组:(1)IM组:明确诊断为IM的患儿80例,其中男性患儿44名,女性患儿36名,年龄6个月~13岁,平均4.61±3.40岁;(2)非IM组:首诊症状与IM相似,诊断为非IM的住院患儿120例,其中男性患儿61名,女性患儿59名,年龄3个月~14岁,平均4.26±3.51岁(其中包括最终诊断为肺炎支原体感染患儿30名及病毒感染患儿68名);(3)健康对照组:健康体检儿童40例,其中男性20名,女性20名,年龄6个月~12岁,平均4.55±4.20岁。各组间性别、年龄均无显著差异。所有入选者均签署医院科研伦理和知情同意书。2检测内容收集所有受试儿童每人2份血液样本,分别进行以下项目的检测:2.1分离血清采用胶乳增强免疫比浊法测定β2-MG的含量,采用胶体金增强免疫法测定胱抑素C(Cystatin c,Cys C)的含量,采用酶法测定ADA活性,采用速率法测定谷草转氨酶(Glutamic-oxaloacetic transaminase,AST)和谷丙转氨酶(Glutamic-pyruvic transaminase,ALT)的活性,采用间接免疫荧光法检测EBV特异性抗体,包括EBV衣壳抗体Ig M(VCA-Ig M)、EBV早期抗体Ig G(EA-Ig G)和EBV核心抗体(EBNA-Ig G)、EBV衣壳抗体Ig G(VCA-Ig G)及抗体亲和力。2.2全血采用半导体激光流式细胞术法检测白细胞计数(White blood cell,WBC)、淋巴细胞计数(Lymphocyte,LYM);采用涂片分类法计数异型淋巴细胞百分比。2.3检测指标在各组间进行对比,并建立受试者工作特征曲线(ROC)分析β2-MG与ADA联合检测对IM的临床诊断价值。采用SPSS 24.0软件对数据进行统计分析,数据用均数±标准差表示,组间比较采用独立样本t检验,多个均数之间的两两比较采用方差分析,(方差齐用SNK-q检验,方差不齐用Dunnett-t检验),采用受试者工作特征曲线(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评估β2-MG与ADA联合检测对IM的诊断效能,采用皮尔逊相关性分析研究实验室指标的相关性。结果:1.IM组的β2-MG、Cys C的含量;ADA、AST及ALT的活性;WBC、LYM及异型淋巴细胞百分比均显著高于非IM组及健康对照组IM组:β2-MG的含量为4.30±1.05 mg/L,Cys C含量为0.96±0.22mg/L,ADA的活性为55.19±18.97 U/L,AST活性为64.68±26.37 U/L,ALT活性为69.09±23.82 U/L,WBC为14.38±7.01(×109),LYM为10.31±6.14(×109),异型淋巴细胞百分比为10.37±8.55(%)(其中大于10%的有32例,最低为2%,最高为40%);非IM组:β2-MG的含量为2.40±0.99 mg/L,Cys C含量为0.85±0.21mg/L,ADA的活性为29.68±15.43 U/L,AST活性为33.61±18.43 U/L,ALT活性为22.90±13.16 U/L,WBC为9.47±4.14(×109),LYM为4.30±2.26(×109),异型淋巴细胞百分比为5.15±4.39(%);健康对照组:β2-MG的含量为1.60±0.51 mg/L,Cys C含量为0.85±0.11mg/L,ADA的活性为16.81±3.27 U/L,AST活性为21.95±4.94 U/L,ALT活性为11.0±4.24 U/L,WBC为6.21±1.27(×109),LYM为2.73±0.85(×109),异型淋巴细胞百分比为0.78±0.73(%)。IM组的β2-MG和Cys C的含量,ADA、AST及ALT的活性,WBC、LYM及异型淋巴细胞百分比均显著高于非IM组及健康对照组(P0.05);非IM组β2-MG的含量,ADA、AST及ALT的活性,WBC、LYM及异型淋巴细胞百分比均高于健康对照组(P0.05),而后两组Cys C的含量比较差异无统计学意义(P0.05)。2.IM组抗VCA-Ig M阳性患儿与抗VCA-Ig M阴性患儿的β2-MG、ADA水平无显著差别80例IM患儿抗VCA-Ig M阳性23例;抗EA-Ig G阳性44例;抗VCA-Ig G 80例均为阳性,且均为低亲和力抗体。抗VCA-Ig M是IM患儿处于EBV感染早期特异性抗体,根据抗VCA-Ig M结果将80例IM患儿分为抗VCA-Ig M阳性患儿23例,抗VCA-Ig M阴性患儿57例,抗VCA-Ig M阳性患儿的β2-MG的含量为4.34±1.14 mg/L,ADA活性为56.78±19.24 U/L;抗VCA-Ig M阴性患儿的β2-MG的含量水平为3.96±1.00mg/L,ADA活性为54.55±18.99 U/L。两组β2-MG、ADA比较差异均无统计学意义(P0.05)。3.β2-MG及ADA与淋巴细胞计数及异型淋巴细胞百分比之间均不相关β2-MG、ADA与LYM相关性分别为r=0.157,P0.05;r=0.092,P0.05。β2-MG、ADA与异型淋巴细胞百分比相关性分别为r=0.034,P0.05;r=0.111,P0.05。β2-MG及ADA与淋巴细胞计数及异型淋巴细胞百分比之间相关程度弱,基本无相关。4.IM患儿肝损害组ADA活性高于IM患儿肝功正常组;IM患儿肝功正常组ADA活性明显高于非IM组及健康对照组80例IM患儿中存在肝损害的有52例,占所有IM患儿的65%。肝损害患儿的ADA活性为59.0±18.86 U/L,高于肝功正常患儿ADA活性49.04±14.28 U/L,差异有统计学意义(P0.05);而IM患儿肝功正常组ADA活性显著高于非IM组ADA活性29.68±15.43 U/L及健康对照组ADA活性16.81±3.27 U/L,差异有统计学意义(P0.05)。5.IM组β2-MG及ADA水平高于肺炎支原体组和病毒组IM组中β2-MG含量为4.30±1.05 mg/L,ADA活性为55.19±18.97 U/L;肺炎支原体组β2-MG含量为2.33±1.02 mg/L,ADA活性为27.69±11.68U/L;病毒组β2-MG含量为2.40±0.93 mg/L,ADA活性为29.54±17.76 U/L。IM组β2-MG含量、ADA活性均显著高于肺炎支原体组、病毒组(乙型流感病毒、柯萨奇A1、B7、副流感病毒、埃可病毒、呼吸道合胞病毒、巨细胞病毒、风疹病毒),差异有统计学意义(P0.05)。6.ROC曲线分析β2-MG与ADA联合检测对诊断儿童IM具有较高的准确性、灵敏度、特异度β2-MG诊断IM的ROC曲线下面积AUC为0.884,灵敏度为88.8%,特异度为83.3%,约登指数为0.721;ADA诊断IM的ROC曲线下面积AUC为0.884,灵敏度为82.5%,特异度为83.3%,约登指数为0.658;β2-MG与ADA联合检测诊断IM的ROC曲线下面积AUC为0.91,灵敏度为90.0%,特异度为84.2%,约登指数为0.742。β2-MG、ADA以及β2-MG与ADA联合检测准确性、特异度、灵敏度均高于对AST、ALT、WBC、LYM、Cys C及异型淋巴细胞百分比的检测;β2-MG与ADA联合检测准确性更高,灵敏度、特异度均高于单独检测β2-MG和ADA,最佳Cutoff值β2-MG为3.05 mg/L,ADA为39.50 U/L。结论:1.血清β2-MG、ADA诊断儿童传染性单核细胞增多症的准确性、灵敏度、特异性均高于AST、ALT、WBC、LYM、Cys C及异型淋巴细胞百分比,且两者联合检测优于单项,对于辅助诊断儿童IM具有一定的临床价值。2.肝损害可能不是IM患儿血清ADA活性升高的主要原因,但肝损害可增强ADA活性升高程度。IM患儿β2-MG、ADA水平与淋巴细胞计数、异型淋巴细胞百分比之间基本不相关。3.β2-MG与ADA对于辅助鉴别诊断IM、肺炎支原体感染及一些其他病毒感染,有一些参考价值。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R725.1
【图文】：

β2-微球蛋白,增强免疫,比浊法,胶乳

的活性（Fig.4），WBC、LYM 计数（Fig.5）Fig.6）均显著高于非 IM 组及健康对照组（P<0含量（Fig.1），ADA（Fig.3）、AST 及 ALT 的活计数（Fig.5）及异型淋巴细胞百分比（Fig.6）05），两组 Cys C 含量比较差异无统计学意义（*#

增强免疫,血清胱抑素C,β2-微球蛋白,比浊法

1 胶乳增强免疫比浊法检测血清 β2-微球蛋白含ination of β2-microglobulin in serum by dimetry.*compare with non-IM group, P<0.05; #ol group, P<0.05*##2-MGβoncntraeiont(g/L)m

【参考文献】