中国广西壮族儿童原发性肾病综合征CD2AP基因突变相关研究

发布时间：2020-06-29 20:34

【摘要】：目的:分析广西壮族儿童原发性肾病综合征患者CD2AP基因突变情况及其特征,探索PNS患者外周血中CD2AP表达特点。方法:(1)采集155例中国广西壮族儿童原发性肾病综合征(47例局灶节段性肾小球硬化、45例微小病变型肾病、36例IgA肾病、9例膜性肾病、18例未行肾脏穿刺)患者及98名广西壮族健康儿童血液样本,应用二代测序技术分别对两组样本CD2AP基因的18个外显子测序,将检测到的SNV/InDel与最新发布的群体数据库、功能数据库以及疾病数据库等已知信息进行比对分析,评估该突变位点的致病性、功能特征、变异频率等。(2)通过ELISA方法分别检测患病组和正常组血清样本中CD2AP浓度水平,对两组数据进行统计学分析。结果:(1)测序结果显示:在155例患病组中发现6种杂合CD2AP致病突变,c.29AG:p.Y10C、c.421-13TC、c.1207AG:p.R403G、c.1517AG:p.N506S、c.1855_1856del:p.K619fs各1例,c.1531-15TA 3例,正常组未检测到突变;(2)发现2种新的基因突变,分别为内含子上c.421-13TC和17号外显子上c.1855_1856del:p.K619f s;(3)正常组中CD2AP血清浓度水平为204.10(124.60,358.00)pg/mL,患病组中CD2AP血清浓度水平为83.40(37.90,208.83)pg/mL(Z=-5.094,P0.001),患病组显著低于正常组。结论:(1)广西壮族儿童原发性肾病综合征患者存在CD2AP基因突变,4种外显子突变(c.29AG、c.1207AG、c.1517AG、c.1855_1856del)考虑为致病突变,其中c.1855_1856del为新发现的致病突变。2种内含子突变(c.421-13TC、c.1531-15TA)中,新发现的突变(c.421-13TC)致病性不明确,而c.1531-15TA突变考虑可能与P NS发病有关;(2)与国内外不同地区及种族相关文献中报道的FSGS患者CD2AP突变高检出率不同,在壮族人群中,47例FSGS患者中未见检测到CD2AP突变,因此CD2AP基因突变可能存在种族及地域差异;(3)患病组血清中CD2AP浓度显著低于正常组,提示血清中CD2AP是一种保护性蛋白,可能通过参与调节细胞免疫及足细胞凋亡对肾脏起到保护作用。
【学位授予单位】：右江民族医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R726.9
【图文】：

电镜观察,无明,肾小球,醋酸泼尼松

该突变在1名13岁男童患者血液样本中检出，家属否认肾病家族史，该患者因全身水肿就诊，诊断为“肾病综合征”，规律予足量醋酸泼尼松治疗1年后病情缓解。半年后复发，再次出现水肿住院治疗，行肾穿提示：微小病变型肾病（图2-1）。继续予醋酸泼尼松治疗2年，病情反复，考虑为SRNS，随后联合吗替麦考酚酯治疗至今。电镜检查电镜检查HE见肾小球轻微病变 PAS见系膜细胞和基质无明显增生PASM见毛细血管襻开放，基底膜无明显增厚 Masson见肾小球内无明显嗜复红蛋白沉积图2-1 肾脏活组织检查（HE、PAS、PASM、Masson染色和电镜观察）Fig. 2-1 Renal biopsy (HE,PAS,PASM,Masson staining and electron microscopy)a. 肾小球病变轻微，未见肾小球球性硬化及节段性硬化 b.肾小球系膜细胞和基质无明显增生，基底膜无明显增厚，未见钉突样结构，无系膜插入及双轨形成，上皮下、内皮下无明显嗜复红蛋白沉积，壁层上皮细胞无增生未见新月体形成，免疫荧光未见免疫复合物沉积 c.脏层上皮细胞肿胀

异环磷酰胺,刚果红,特殊染色,阴性

该突变在1名10岁女孩血液DNA样本中检测出，家族史阴性，予醋酸泼尼松治疗1年3个月仍有反复尿蛋白阳性，联合异环磷酰胺治疗3个月后，病情未见缓解。随后改用甲泼尼龙+异环磷酰胺联合治疗，该患者肾脏穿刺活检提示：III期膜性肾病（图2-2）。电镜检查电镜检查特殊染色：刚果红：阴性特殊染色：氧化刚果红：阴性HE 见少数肾小管管腔扩张，刷毛缘消失 PAS 见硬化的肾小球

【参考文献】