川崎病循环内皮细胞和其表面S100A12蛋白的研究

发布时间：2020-07-12 05:01

【摘要】： 【目的】 川崎病(Kawasaki disease，KD)又称皮肤粘膜淋巴结综合征(MucocutaneousLymphnode Syndrome，MCLS)，是小儿时期的一种急性发热性血管炎，主要影响中小型动脉，特别是冠状动脉，虽然及时静脉注射丙种球蛋白(IntravenousImmunoglobulin,IVIG)可以缩短病程和减少冠状动脉病变(Coronary ArteryLesions，CAL)的发生率，仍约有10％的病人对注射IVIG没有反应，而这些病人有很高的CAL发生率。在许多国家KD已成为儿童最常见的获得性心脏病，也是成人CAL的病因之一。CAL的发生原因和机制至今未明，并且尚无早期判断IVIG耐药(Intravenous immunoglobulin non-responder,IVIG-NR)和CAL的实验室指标。循环内皮细胞(Circulating endothelial cells，CECs)及S100A12蛋白作为血管病变和炎症调节的指标，近年来引起国内外学者的高度关注。为了明确CECs和其表面S100A12蛋白与KD的关系，本研究采用单克隆抗体与流式细胞术(FlowCytometry,FCM)结合的手段进行检测和分析，评价KD病患者外周血循环内皮细胞与单个核细胞比值(Ratio of CECs to mono-nuclear cells，CECs／MNC)、循环内皮细胞上S100A12蛋白阳性率(Positive rate of S100A12 on CECs，CECs-S100A12／CECs)及循环内皮细胞上S100A12蛋白荧光强度(Flourescentintensity of S100A12 on CECs，FI-S100A12-CECs)，探讨川崎病CAL可能的病理生理机制，并为KD临床治疗及预后判断提供依据。 【材料与方法】 1、病例与分组： 1．1急性期川崎病组(Acute stage of Kawasaki Disease，A-KD)55人，男29例，女26例；年龄3～128月，平均34．00±25．80月，确诊后给予大剂量IVIG及阿斯匹林治疗。IVIG剂量：1g／kg/d，连续2天(起病10天内使用)，其中IVIG-NR 5例，伴CAL者9例。 1.2亚急性期川崎病组(Subacute stage of Kawasaki Disease，SA-KD)29人，男18例，女11例；年龄6-128月，平均35．55±31．99月，其中IVIG-NR者6例，伴CAL者9例。 1．3恢复期川崎病组(Convalescent stage of Kawasaki Disease，C-KD)14人，男8例，女6例；年龄7-72月，平均33．29±23．62月，其中IVIG-NR者5例，伴CAL者6例。 1．4正常对照组(Control)26人，均来自我院儿保门诊健康体检儿童，其中男13例，女13例；年龄4-85月，平均23．92±19．87月。 2、FCM测定：采用单克隆抗体与FCM结合方法进行检测和分析，评价KD患者外周血CECs／MNC、CECs-S100A12／CECs和FI-S100A12-CECs。 3、统计学处理：应用SPSS11．0统计软件，正态分布的资料组内行One-WayANOVE分析，组间行LSD检验；非正态分布的资料用Mann-Whitney Test检验；P0．05为差异有显著性。正态分布资料采用均值士标准差(x±s)表示，非正态分布资料用中位数(2．5-97．5)％表示。 【结果】 1、KD外周血CECs／MNC、CECs-S100A12／CECs和FI-S100A12-CECs的变化： A-KD患者外周血CECs／MNC、CECs-S100A12／CECs和FI-S100A12-CECs均明显升高，分别为0．39(0．04-11．10)％、67．58±24．45％、214．00(9．99-2511．80)。正常对照组分别为0．24(0．05-1．10)％、39．35±19．58％、23．26(12．07-237．30)；两组比较P值均0,05。 应用WIG后SA-KD患者外周血CECs／MNC、CECs-S100A12／CECs和FI-S100A12-CECs分别为0．16(0．01-1．00)％、65．99±22．40％、246．00(17．40-2613．00)，与应用IVIG前A-KD比较，CECs／MNC明显下降(P=0．001)。 C-KD患者CECs／MNC则基本恢复到正常水平0．24(0．06-1．70)％。但无论在SA-KD，还是在C-KD，CECs-S100A12／CECs和FI-S100A12-CECs仍保持较高水平。 2、IVIG-NR与IVIG敏感(IVIG responder,IVIG-R)KD患者外周血CECs／MNC、CECs-S100A12／CECs和FI-S100A12-CECs的变化： IVIG-NR-A-KD组外周血CECs／MNC、CECs-S100A12／CECs和FI-S100A12-CECs分别为0．38(0．13-6．25)％、69．34±26．81％、110．40(23．39-1622．00)。IVIG-R-A-KD组分别为0．40(0．04-11．48)％、67．41±24．49％、228．15(9．88-2669．95)。两组比较差异无显著性，P值均0．05。 IVIG-R-SA-KD外周血CECs／MNC为0．1 5(0．01-1．00)％，与IVIG-R-A-KD比较有明显下降(P0．01)。IVIG-NR-SA-KD外周血CECs／MNC为0．29(0．11-0．65)％，与IVIG-NR-A-KD比较无明显下降。 3、KD合并冠脉病变(KD-CAL)及冠脉正常组(KD-No-CAL)外周血CECs／MNC、CECs-S100A12／CECs和FI-S100A12-CECs的变化： A-KD-CAL组外周血CECs／MNC、CECs-S100A12／CECs和FI-S100A12-CECs分别为0．36(0．07-0．70)％、62．50±26．37％、119．00(9．25-3105．00)。A-KD-No-CAL组分别为0．50(0．03-11．79)％、68．58±24．24％、264．50(10．76-1604．68)。两组比较差异无显著性，P值均0．05。 SA-KD-No-CAL组外周血CECs／MNC为0．1 5(0．01-1．00)％，与A-KD-No-CAL比较下降明显(P0．01)。SA-KD-CAL组外周血CECs／MNC为0．21(0．08-0．83)％，与A-KD-CAL比较无明显下降。 【结论】 1．A-KD患者外周血CECs／MNC明显升高，提示A-KD患者血管内皮受炎症因子攻击，其血管内皮细胞脱落明显增加；在SA-KD CECs／MNC不下降或下降缓慢可作为IVIG-NR-KD及KD-CAL的指标之一。 2．与A-KD相比，IVIG治疗后的SA-KD及C-KD，外周血CECs／MNC明显降低，提示WIG可能通过抑制炎症因子对血管内皮的攻击，减少血管内皮细胞脱落起到治疗和预防CAL的作用。 3．外周血CECs-S100A12／CECs和FI-S100A12-CECs可作为A-KD临床辅助诊断指标之一。 4．C-KD时CECs／MNC再度升高，高度提示KD-CAL可能。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R725.4
【图文】：

图SA一KD外周血CECslMNC、CECs一S100A12/CECs和Fl一S100A12一CECs的测定

正常对照红吵卜周血eEes乃dNC、CECs一sl00A12lCECs和n一sl00A12一CECs的测定

SA一KD外周血CECslMNC、CECs一SlooA12/CECs和Fl一S100A12一CECs的测定

【共引文献】

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本文编号：2751466