双歧杆菌对新生大鼠坏死性小肠结肠炎模型肠损伤保护作用及肠组织PAF、TNF-α影响

发布时间：2020-07-19 23:39

【摘要】：目的 采用新生SD大鼠NEC模型，以添加双歧杆菌为阳性对照，客观评价添加双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型肠损伤的保护作用，同时，通过对肠黏膜组织匀浆中PAF、TNF-α含量检测，探讨补充双歧杆菌的保护作用是否与降低肠组织PAF和TNF-α浓度有关，为应用双歧杆菌防治新生儿坏死性小肠结肠炎提供科学依据。 方法 Sprague-Dewley新生鼠出生后48小时给予鼠配方奶人工喂养，100％氮气缺氧90秒，4℃冷刺激10分钟，每天2次连续3天建立新生鼠NEC模型。32只新生鼠按析因设计随机分成4组，每组动物各8只。A组为NEC模型组并添加双歧杆菌(0.4×10~8CFU／天)，B组为NEC模型组，但未添加双歧杆菌；C组为对照组，且未添加双歧杆菌；D组为对照组并添加同样剂量双歧杆菌。在最后一次缺氧、冷刺激后24小时空腹断头处死小鼠，解剖留取十二指肠下端至直肠上端肠道组织，其中，回盲部近端肠管进行病理学检查及肠损伤评分，剩余所有肠管用于检测肠组织PAF、TNF-α含量。根据固有层分离、中性粒细胞浸润，绒毛脱落、坏死，血管扩张，间质水肿，将肠损伤分为0～4级；组织学评分≥2确定为NEC。肠组织中PAF、TNF-α含量采用ELISA双抗体夹心法检测，试剂盒购自上海朗卡公司；组织PAF、TNF-α含量以每毫克肠组织蛋白中PAF／TNF-α含量表示(pg／mg pro)。应用Kruskal-Wallis H检验、析因方差分析、Fisher确切概率法进行统计学分析，α=0.05为显著性检验标准，采用SPSS11.0统计学软件进行统计分析。 结果 [1]在剔除鼠乳喂养前提下，经过连续多次的缺氧冷刺激后(B组)相继出现腹泻、腹胀、生长发育减慢、活动度减少等，肠管可见肠管出血、肠腔积气及肠管坏死，显微镜下见肠粘膜坏死，粘膜下层出血以及肌肉层坏死等肠损伤表现；但添加双歧杆菌的模型组(A组)新生鼠腹泻、腹胀、胃潴留程度明显较B组的模型组轻，生长发育及活动度也得到改善，肠出血、肠腔积气及肠管坏死少见，HE染色显微镜下肠损伤减轻。[2]A、B、C和D4组肠损伤组织病理评分((?)+S)分别为1.63±1.302、3.25±0.886、0.25±0.463和0.50±0.535；各组之间肠损伤组织病理评分差别有显著意义，H=20.731，P＜0.01；与B组相比，A组肠损伤组织评分明显降低，但仍高于C、D两个对照组，差异均有显著意义；析因设计的方差分析显示肠组织损伤分级评分受到造模和双歧杆菌干预两个因素的影响，造模与双歧杆菌干预之间存在交互作用，在控制造模因素后，添
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R722.1

【共引文献】

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本文编号：2763128