川崎病外周血单个核细胞iNOS及相关趋化因子表达的研究

发布时间：2020-07-24 12:49

【摘要】： 目的：观察川崎病(Kawasaki Disease，KD)患者体内血浆一氧化氮/诱导型一氧化氮合酶(Nitric Oxide/Inducible Nitric Oxide Synthase，NO/iNOS)及相关趋化因子基质细胞衍生因子-1/CXC型趋化因子受体4(Stromal cell-derived factor-lalpha/CXC chemokine receptor 4，SDF-1α/CXCR4)、单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)表达变化，为探索临床早期诊断、治疗及预后判断新方法提供实验和理论依据。 方法：采用ELISA方法及qRT-PCR技术分别测定12例合并冠脉损害和44例无冠脉损害KD患者的急性期与缓解期血浆(NO_3~-+NO_2~-)水平、SDF-1α水平、MCP-1水平及PBMC中iNOS mRNA表达、SDF-1α的受体CXCR4 mRNA表达、MCP-1 mRNA表达变化，并与60例非感染患儿、66例发热病人、35例过敏性紫癜(Henoch Schoenlein Purpura，HSP)患儿进行统计学比较。 结果：1、KD患者缓解期血浆(NO_3~-+NO_2~-)水平(60.96±18.43umol/L)和PBMC中iNOS mRNA表达水平(1.76±0.50)较急性期血浆(NO_3~-+NO_2~-)水平(329.62±96.57umol/L)和PBMC中iNOS mRNA表达水平(2.72±0.84)明显下降，但高于各对照组；急性期KD组中冠状动脉损害者血浆(NO_3~-+NO_2~-)水平(416.17±44.25umol/L)和PBMC中iNOS mRNA表达水平(4.00±0.38)明显高于无冠状动脉损害者血浆(NO_3~-+NO_2~-)水平(306.02±93.63umol/L)和PBMC中iNOS mRNA表达水平(2.37±0.52)； 2、血浆SDF-1α水平变化：KD急性期(1833±395ng/L)与缓解期(1551±404ng/L)均高于各对照组；KD冠状动脉损害者急性期(1769±278ng/L)和缓解期(1446±279ng/L)与无冠状动脉损害者相比均无统计学差异； 3、PBMC中CXCR4mRNA表达水平变化：KD急性期(6.57±2.81)明显高于各对照组；缓解期(4.01±2.47)与非感染对照组、HSP组比较差异有显著性，但与发热组无显著差异；急性期KD冠状动脉损害者(8.19±2.39)高于无冠状动脉损害者(6.13±2.77)；缓解期KD冠状动脉损害者(5.17±2.32)与无冠状动脉损害者(3.71±2.45)相比无统计学差异； 4、KD患者急性期血浆MCP-1水平(409.55±97.42pg/ml)与PBMC中MCP-1 mRNA表达水平(1.97±0.77)明显高于各对照组；KD患者缓解期血浆MCP-1水平(301.64±71.55pg/ml)与PBMC中MCP-1 mRNA表达水平(1.31±0.39)明显高于非感染对照组、HSP组，与发热组相比无显著差异；KD组中冠状动脉损害者血浆MCP-1水平与PBMC中MCP-1 mRNA表达水平在急性期与缓解期均明显高于无冠状动脉损害者。 结论：1、NO/iNOS在KD及其冠脉损害的发病机制中扮演了重要角色，可能通过影响多种免疫级联反应过程发挥重要作用 2、SDF-1α/CXCR4主要在KD急性期发挥作用，可能参与了KD发病过程，但参与冠脉损害的可能性不大，并非本病中关键的趋化因子 3、MCP-1在川崎病患儿体内持续增高，可能参与了促使单个核细胞聚集于冠状动脉局部的趋化作用过程，有可能作为判断KD病情活动状态及冠脉损害的免疫学指标之一
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R725.4
【图文】：

采用 ABI7000型实时荧光PCR仪进行扩增和分析，每个样本、阴性对照及标准品均设两个平行反应管，定量结果取其均值。循环结束后，根据同时扩增的不同拷贝数的标准品制作出标准曲线，计算机将给出各个样本的初始拷贝数(图1一图3)，各样本iNOS、CXCR4、MCP一l定量结果均用其相应的p一aetin结果标化。四、统计学处理:所有计量资料均采用均数士标准差表示，并进行正态性检验。应用SPSSll.0统计软件包对数据进行t检验，以P<0.05为有统计意义。

图2实时扩增时荧屏显示待测样品的曲线一一月.....「————厂厂厂{{{{{{{{{{{{{.{{{--一刁刁趣趣趣趣趣趣趣趣---一刁刁厦厦厦厦厦厦厦-----砚砚砚砚砚砚砚翔一一一......日日日自娜曰曰.目蔺臼臼臼月里_____味味味味味味矛飞飞飞巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨巨吧吧罗孑....，....刁刁尸~一~一一门门llll亡卜一1111111]]]]]]]]]]]]]]]厅厅图3循环结束后进行溶解曲线分析

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本文编号：2768867