儿童白血病与白血病细胞株中WWOX、FHIT基因的表达研究
发布时间:2020-08-02 16:56
【摘要】:第一章儿童白血病WWOX、FHIT的mRNA表达研究 目的:了解包含WW域的氧化还原酶(WW domain-containing oxidoreductase, WWOX)基因和脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad, FHIT)基因在儿童白血病中的表达,分析WWOX、FHIT基因与儿童白血病的关系;探讨WWOX与FHIT基因在儿童白血病中的发病机制。 方法:收集2009年1月至2011年3月白血病的儿童51例作为白血病组,同期湖南省人民医院非白血病儿童10例作为对照组,检测两组儿童骨髓单个核细胞(Bone marrow mononuclear cells, BMMCs)中WWOX和FHIT基因的mRNA表达。 结果: 1.白血病组的WWOXmRNA表达阳性率明显低于对照组(31.37% vs 100.00%,P0.01)。 2.白血病缓解组WWOXmRNA表达阳性率明显低于对照组(33.33%vs 100%,P0.01)。 3.白血病组WWOXmRNA表达阳性率在不同性别、年龄、白血病类型、治疗阶段、肿瘤负荷组别间无显著差异(P0.05)。 4.白血病组FHITmRNA表达阳性率明显低于对照组(54.90% vs100.00%,P0.05)。 5.白血病缓解组FHITmRNA表达阳性率为66.67%,对照组FHITmRNA表达阳性率为100.00%,两组间无明显差异(P0.05) 6.白血病组FHITmRNA表达阳性率在不同性别、年龄、白血病类型、治疗阶段组别间无显著差异(P0.05)。 7.高肿瘤负荷组FHITmRNA表达阳性率明显低于低肿瘤负荷组(33.33% vs 66.67%,P0.05)。 8.51例白血病儿童FHITmRNA与WWOXmRNA同时表达缺失的有15例。 结论: 1.WWOXmRNA、FHITmRNA在儿童白血病中低表达。 2. WWOXmRNA表达阳性率在不同性别、年龄、白血病类型、治疗阶段、肿瘤负荷的白血病儿童间无差异。 3.FHITmRNA表达阳性率在不同性别、年龄、白血病类型、治疗阶段的白血病儿童间无差异。 4.高肿瘤负荷的白血病患儿FHITmRNA表达阳性率低于低肿瘤负荷患儿。 第二章Zebularine对K562、Jurkat细胞WWOX、FHIT表达的影响 目的:研究1-(β-D-呋喃核糖苷)-1,2-二氢嘧啶-2-酮(Zebularine, Zeb)干预K562和Jurkat后WWOX和FHIT的表达变化,分析zeb作用于WWOX和FHIT基因的机制;探讨zeb在白血病治疗中的意义。 方法:K562与Jurkat按Zeb的不同干预浓度各分为三个组,分别为control组、250μM组(Zeb终浓度为250μM)、500μM组(Zeb终浓度为500μM)。巢式PCR (nested PCR)方法检测细胞Zeb干预48小时后WWOX和FHITmRNA的表达;Western-Blot方法检测细胞Zeb干预48小时后WWOX和FHIT蛋白表达。 结果: 1.在k562中,control组未检测到有WWOXmRNA表达,而250μM组和500μM组能检测到WWOXmRNA的表达,但250μM组与control组相比,差异无统计学意义(P0.05),而500μM)组表达高于control与250μM组,差异有统计学意义(P0.01)。 2.在Jurkat中,control组和250μM组未检测到有WWOXmRNA表达,而500μM组能检测到WWOXmRNA的表达,差异有统计学意义(P0.01)。 3.K562与Jurkat在Zeb干预48h后,250μM组、500μM组与control组相比,WWOX与FHIT蛋白表达明显升高,差异有统计学上意义(P0.01),500μM组与250μM组相比,WWOX与FHIT蛋白表达明显升高,差异有统计学上意义(P0.01)。 结论: Zeb能够上调WWOXmRNA、FHITmRNA与WWOX、FHIT蛋白的表达,并有一定的浓度依赖性。 第三章Zebularine对K562、Jurkat细胞增殖及凋亡的影响 目的:研究Zeb对K562、Jurkat增殖及凋亡的影响;探讨Zeb在白血病中的的抑癌机制;探讨其在白血病治疗中的价值。 方法:K562与Jurkat按Zeb的不同干预浓度各分为三个组,分别为control组、250μM组(Zeb终浓度为250μM)、500μM组(Zeb终浓度为500μM)。MTT试剂盒检测12h、24h、36h、48h和72h后两种细胞株的OD570值;倒置显微镜观察细胞Zeb干预48h后的细胞形态;用Annexin V/FITC试剂盒与细胞周期检测试剂盒检测细胞Zeb干预48h后的细胞凋亡。 结果: 1.k562与Jurkat在zeb干预48h后,随着Zeb处理浓度的增加,细胞OD570值明显降低。 2.Zeb干预48h后倒置显微镜观察,K562与Jurkat中,control组生长良好,成团分布,250μM组细胞成团分布细胞减少,呈分散趋向,500μM细胞散在分布,未见成团分布的细胞。 3.K562与Jurkat在Zeb干预48h后,250μM组、500μM组与control组相比,早期凋亡细胞比例与细胞凋亡峰(APO峰)值明显增大,差异有统计学意义(P0.01),500μM组与250μM组相比,早期凋亡细胞比例与细胞凋亡峰(APO峰)值明显增大,差异有统计学意义(P0.01)。 结论: Zeb可抑制K562与Jurkat的增殖,促进其凋亡,并有一定的浓度依赖性。
【学位授予单位】:湖南师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R733.7
本文编号:2778802
【学位授予单位】:湖南师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R733.7
【参考文献】
相关期刊论文 前9条
1 殷鹏;张月飞;;Zebularine抗肿瘤研究进展[J];广东医学;2007年04期
2 尤程程;黄利鸣;;DNA甲基化与肿瘤[J];广东医学;2009年08期
3 陈锦萍;王效民;张忠英;;抑癌基因WWOX及其与肿瘤关系的研究进展[J];国际外科学杂志;2006年04期
4 刘明利;p73基因的研究进展[J];国外医学.输血及血液学分册;2001年05期
5 周民;岑岭;蒋红;;儿童与成人急性淋巴细胞白血病的临床及细胞遗传学比较分析[J];临床荟萃;2007年22期
6 许红霞;周建农;莫伏根;侯宁;胡赛男;束永前;;抑癌基因WWOX和FHIT在结直肠癌中的表达及其临床意义[J];南京医科大学学报(自然科学版);2007年08期
7 王晓;晁岚;藏益秀;陈连胜;田斌;刘惠萍;孙靖中;;乳腺癌组织WWOX基因表达及其与ER、绝经状态的相关性[J];山东大学学报(医学版);2007年09期
8 杨文峰;孙志熙;孔垂泽;刘涛;毕建斌;刘贤奎;孙长城;逯强;崔肃;;膀胱移行细胞癌中WWOX蛋白的表达及临床意义[J];山东医药;2008年41期
9 李秋芳;杨瑞玲;王静;吴逸明;;WWOX蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义[J];实用癌症杂志;2008年04期
本文编号:2778802
本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/eklw/2778802.html
最近更新
教材专著