褪黑素对母婴分离新生鼠行为发育及脑区糖皮质激素受体的调节

发布时间：2020-08-19 08:24

【摘要】：目的探讨外源性褪黑素(melatonin, MT)对母婴分离(maternal separation, MS)新生大鼠行为发育及脑区糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor, GR)表达的调节作用。方法新生同窝雄性SD大鼠随机分为单纯母婴分离(MS)组、褪黑素(MT)组和对照组,每组15只。大鼠于P24 h ~ P14 d进行母婴分离实验;P7 d ~ P20 d,MS组及对照组大鼠分别予以生理盐水腹腔注射,MT组大鼠则予以MT(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))腹腔注射注射,容积均为10 mL·kg~(-1)。大鼠行为学检测采用水迷宫试验及悬吊试验测试,于P28 d~P29 d进行。P30 d取各组大鼠海马及前额皮质组织,采用免疫组化检测GR阳性细胞表达,RT-PCR法检测GR mRNA表达。结果(1) MS组大鼠水迷宫测试学会正确上台所需的训练次数[(13.33±1.88)次]较对照组[(8.87±1.46)次]明显增加(P0.05),MT组大鼠学会正确上台所需的训练次数[(9.20±1.61)次]与对照组比较差异无统计学意义(P0.05),较MS组明显减少(P0.05)。在悬吊试验中,与对照组[(28.27±2.09)s]相比,MS组悬吊时间[(15.67±2.26)s]明显缩短,差异具有统计学意义(P0.05),在予以MT干预后,MS大鼠悬吊时间明显延长,差异具有统计学意义(P0.05)。MT组[(27.40±2.35)s]与对照组比较差异无显著性差异(P0.05)。(2) MS组海马GR蛋白(79.63±10.95)及mRNA(0.64±0.29)表达均较对照组[(135.24±11.75),(0.96±0.32)]均明显下降,差异有统计学意义(P0.05),经MT处理后,大鼠海马GR蛋白(129.57±12.76)及mRNA (0.95±0.34)表达明显升高,与对照组相仿(P0.05)。在前额皮质组织中,也得到近似的结果,即MS组前额皮质组织中GR蛋白(73.04±8.55)及mRNA(0.57±0.30)表达均较对照组[(116.15±9.94),(0.88±0.33)]均明显下降,差异有统计学意义(P0.05),经MT处理后,大鼠前额皮质GR蛋白(111.99±10.45)及mRNA (0.87±0.34)表达明显升高,与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论早期母婴分离所致的应激可导致大鼠远期行为能力发育受损。HPA轴参与母婴分离所致的远期行为问题。外源性MT可能通过降低脑区GC与其受体的亲和力及上调海马及前额皮质中GR表达水平,减轻早期母婴分离所致高浓度GC带来的神经损伤,而改善远期行为发育。
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R722.1
【图文】：

大鼠,试验结果

表 1 三组大鼠水迷宫试验及悬吊试验结果比较( x ±s)e comparison of the results in water maze test and suspension test of ratdifferent groups ( x ±s) n 水迷宫试验(次) 悬吊试验 15 13.33±1.88* 15.67±2.2 15 9.20±1.61* 27.40±2.3 15 8.87±1.46 28.27±2. 33.779 148.68 0.000 0.000比较，*P<0.05。 with control group, *P<0.05.

大鼠,实验结果,前额皮质,免疫反应

图 2 三组大鼠悬吊实验结果比较The comparision of the results in suspension test of rats among diffe大鼠海马及前额皮质组织中 GR 免疫组化染色结果疫反应阳性产物为胞浆内褐色沉淀物，在海马及前额皮质GR 免疫反应阳性产物主要定位于细胞核内，胞浆免疫染色，阴性表达呈淡蓝色。MS 组与对照组比较，海马和前反应阳性物显著减低，差异有统计学意义(P<0.05)，予 M皮质组织中 GR 免疫反应阳性物较 MS 组显著增强(P<0.无统计学意义(P>0.05) (见表 2、图 3、图 4)。

前额皮层,对照组,前额,免疫反应

Table 2 The comparison of the OD value of GR immunoactivity in hippocampcortex of rats among different groups ( x ±s)组别 n 海马前额MS 组 15 79.63±10.95* 73.04MT 组 15 129.57±12.76* 111.99对照组 15 135.24±11.75 116.1F 值 100.162 90P 值 0.000 0注：与对照组比较，*P<0.05。Compared with control group, *P<0.05.

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