丙酮酸乙酯对新生大鼠脑缺血缺氧损伤保护作用及其机制研究

发布时间：2020-08-24 16:11

【摘要】： 新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)是围产期脑损伤最常见原因,不仅威胁新生儿的生命,而且有严重的神经系统后遗症。但对新生儿缺血缺氧性脑病的治疗,目前为止国内外尚无统一、有效的治疗方案。因此,寻找治疗新生儿缺血缺氧性脑病更为有效的方法已成为围产医学中的重要课题,越来越受到医学界广大医务工作者及学者的重视。新生大鼠脑缺血缺氧模型被广泛用于研究新生期脑缺血缺氧损伤的发病机理、早期诊断指标筛选和干预方法的评枯。丙酮酸乙酯是一种安全、稳定且极易被细胞摄取的物质。2001年,Sims等研究发现林格氏丙酮酸乙酯溶液治疗肠系膜缺血再灌,能大大减轻肠粘膜结构和功能的损伤;Yang等人于2002年首次提出了丙酮酸乙酯的抗炎作用,此后对丙酮酸乙酯保护作用抗炎机制研究倍受关注。本实验在7日龄Sprague-Dawley大鼠制备的新生大鼠脑缺血缺氧损伤动物模型基础上,研究丙酮酸乙酯对新生期脑缺血缺氧损伤的作用,并探讨其作用机制。 实验结果如下: (一)丙酮酸乙酯对新生大鼠脑缺血缺氧损伤具有明显保护作用 1.丙酮酸乙酯对新生大鼠脑缺血缺氧保护作用具有剂量依赖性 2.丙酮酸乙酯对新生大鼠脑缺血缺氧保护作用具有时间依赖性,在缺血缺氧后30min腹腔注射依然有明显保护作用 3.丙酮酸乙酯对损伤各个脑区均有明显保护作用 (二)丙酮酸乙酯对新生大鼠脑缺血缺氧损伤的长时程保护作用1.丙酮酸乙酯在新生大鼠脑缺血缺氧损伤后8周依然有明显保护作用 2.丙酮酸乙酯转归了新生大鼠生长发育(缺血缺氧后第2周～第8周)的行为变化 (三)丙酮酸乙酯在新生大鼠脑缺血缺氧损伤保护中的抗凋亡作用 1.抑制促凋亡因子caspase-3和AIF的激活 1)丙酮酸乙酯抑制了新生大鼠脑缺血缺氧损伤后促凋亡因子caspase-3的激活 2)丙酮酸乙酯抑制了新生大鼠脑缺血缺氧损伤后促凋亡因子AIF的核内水平 2.升高抗凋亡因子Bcl-xl水平及抗凋亡信号通路PI3K/Akt中途径p-Akt的水平 1)丙酮酸乙酯升高了新生大鼠脑缺血缺氧损伤后抗凋亡蛋白Bcl-xl的水平 2)丙酮酸乙酯对新生大鼠脑缺血缺氧损伤保护作用机制中抗凋亡途径PI3K/Akt信号通路的作用 a)新生大鼠脑缺血缺氧损伤后大脑皮层p-Akt表达水平降低 b)丙酮酸乙酯升高了新生大鼠脑缺血缺氧损伤后大脑皮层降低的p-Akt水平 c)侧脑室注射LY294002(PI3K/Akt信号通路抑制剂)后,不能抑制丙酮酸乙酯对新生大鼠脑缺血缺氧损伤的保护 (四)丙酮酸乙酯降低了新生大鼠脑缺血缺氧损伤后致炎相关因子水平的升高 1.丙酮酸乙酯降低了新生大鼠脑缺血缺氧损伤后升高的细胞因子表达水平 1)丙酮酸乙酯降低了新生大鼠脑缺血缺氧损伤后升高的炎症因子COX-2,iNOS,TNF-a,IL-1a,IL-1b,IL-6的mRNA水平 2)丙酮酸乙酯降低了新生大鼠脑缺血缺氧损伤后升高的炎症因子COX-2蛋白水平 3)丙酮酸乙酯降低了新生大鼠脑缺血缺氧损伤后核内升高的转录因子NF-κB/p65的水平 2.丙酮酸乙酯抑制了新生大鼠侧脑室注射LPS诱导的炎症反应中炎症因子COX-2,iNOS的表达水平 总之,我们的研究证明了丙酮酸乙酯在新生大鼠脑缺血缺氧损伤中具有显著的保护作用。这种保护作用,至少部分,是由于抗炎作用,使NF-κB入核减少,降低其转录调控的炎症因子,如:COX-2,iNOS,TNF-α,IL-1α,IL-1β,IL-6;同时,丙酮酸乙酯具有抗凋亡作用,抑制促凋亡因子caspase-3、AIF的激活,升高抗凋亡因子Bcl-xl的表达水平,引起抗凋亡通路PI3K/Akt中p-Akt水平增高。我们的研究为临床治疗新生儿缺血缺氧性脑病提供了可能的手段和理论依据。
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R722.1
【图文】：

生大鼠脑缺血缺氧损伤形态学特征及缺氧不同伤程度新生大鼠脑缺血缺氧损伤形态学特征究采用新生大鼠脑缺血缺氧模型引起一种不完全性可逆的前脑:神经元损伤仅出现于C以结扎同侧半球，而对侧半球未受累及结扎侧大脑中动脉(middleCerebralartery，MCA)的供血区，在:大脑皮层、纹状体、海马。损伤主要表现为神经元变性、元丢失伴胶质细胞增生，可见囊状或空腔梗塞灶。镜下观察:胞肿胀、胞体缩小变形、胞质尼氏小体消失和细胞核固缩等特(假手术组)未见神经元损伤，镜下显示两侧脑组织结构对称、常形态特征。Contralateral

间点是动物缺氧前3Omin。腹腔注射不同浓度的丙酮酸乙醋，注射完毕后放于母鼠身边恢复直到缺氧时间，缺氧2.5h。动物于缺血缺氧后7天灌注处死，冰冻切片，CV染色，分析同侧比对侧减少体积百分比，实验结果如图3所示:图3丙酮酸乙醋改善新生人鼠脑缺血缺氧损伤H一I，缺血缺氧;H一卜EP，缺血缺氧后lomin腹腔注射SOm叭g丙酮酸乙酷。上排显示皮层和纹状体，一卜排显示皮层和海马。缺血缺氧后7天灌注处死，CV染色。新生大鼠脑缺血缺氧损伤后7天灌注处死，分析脑损伤程度。左侧，脑冠状切片可见明显组织缺损;右侧，丙酮酸乙醋(som眺g)缺氧一前30min预给药，未见明显梗塞灶

鼠身边恢复直到缺氧时间，缺氧2.5h。动物于缺血缺氧后7天灌注处死，冰冻切片，CV染色，分析同侧比对侧减少体积百分比，实验结果如图3所示:图3丙酮酸乙醋改善新生人鼠脑缺血缺氧损伤H一I，缺血缺氧;H一卜EP，缺血缺氧后lomin腹腔注射SOm叭g丙酮酸乙酷。上排显示皮层和纹状体，一卜排显示皮层和海马。缺血缺氧后7天灌注处死，CV染色。新生大鼠脑缺血缺氧损伤后7天灌注处死，分析脑损伤程度。左侧，脑冠状切片可见明显组织缺损;右侧，丙酮酸乙醋(som眺g)缺氧一前30min预给药，未见明显梗塞灶

【引证文献】

相关期刊论文 前2条

1 刘娇;李杰;于艳;赵雪梅;;代谢有机酸对AA肉鸡生长和抗氧化性能的影响[J];饲料工业;2014年11期

2 顾镜月;王凤娟;;丙酮酸乙酯对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤中MMP-9表达的影响[J];黑龙江医药科学;2011年06期

本文编号：2802674