大剂量甲氨喋呤化疗对急性淋巴细胞白血病患儿肠道菌群的影响研究

发布时间：2020-08-31 19:51

　　 目的：(1)研究和分析大剂量甲氨喋呤(HDMTX)化疗对急性白血病患儿肠道菌群的影响；(2)探讨16SrRNA／DNA荧光定量PCR技术在临床细菌定量分析中可行性。 方法：(1)提取36例健康儿童和36例急性淋巴细胞白血病患儿行大剂量甲氨喋呤化疗前后粪便标本的细菌DNA，测量和比较对照组和观察组标本细菌的OD_(260)值；(2)采用16SrRNMDNA荧光定量PCR技术对对照组和观察组粪便标本中的双歧杆菌和大肠杆菌进行定量分析和比较。 结果：(1)大便标本中细菌的OD_(260)值分别为：对照组3479.3±870.5ng／μl，观察组化疗前1天2436.3±768.6 ng／μl，化疗后第3天1496.5±577.1 ng／μl，化疗后第7天1966.6±598.3 ng／μl；对照组和观察组以及观察组化疗前后相比，均有显著差异(P＜0.01)；(2)大便标本中双歧杆菌对数值分别为：对照组9.49±0.41，观察组化疗前1天7.24±0.33，化疗后第3天6.00±0.27，第7天6.59±0.33；大肠杆菌对数值分别为对照组7.52±0.43，观察组化疗前1天6.62±0.42，化疗后第3天5.96±0.42，第7天7.02±0.41；对照组和观察组以及观察组化疗前后，大便标本中双歧杆菌和大肠杆菌数量的对数值均有显著差异(P＜0.01)，其中观察组较对照组、观察组化疗后较化疗前的双歧杆菌和大肠杆菌数量均有明显减少，化疗后第3天尤显，而第7天较第3天有所回增。 结论：(1)大剂量甲氨喋呤化疗方案对急性白血病患儿肠道双歧杆菌和大肠杆菌有明显影响，化疗后数量显著下降；(2)急性白血病患儿肠道菌群和健康儿童相比有显著差异，细菌总数和益生菌量都有明显减少，可能与长期化疗及抗生素等因素有关；(3)16SrRNA／DNA荧光定量PCR技术在临床细菌定量分析中切实可行。
【学位单位】：昆明医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2007
【中图分类】：R733.71
【部分图文】：

455 Stage372℃，10minl结果从熔解曲线的产物峰读取Tm，如图2、3，由于二聚体链明显短于产物链，Tm低于产物，故去二聚体温度一般选定产物Tm的低值，据此可以在反应程序的延伸后各加入一个循环温度分别为:双歧杆菌88℃55，大肠杆菌83℃55。:职纂球绷图2:双歧杆菌熔解曲线

图3:大肠杆菌熔解曲线双歧杆菌产物Tm为88℃~90℃;大肠杆菌产物Tm为S3℃一84℃。3.4.2.定量PCR反应反应体系同表3，设定反表5:双歧杆菌荧光定量反应反应步骤Stagel反应温度和时间95oC，smin(预变性)n5s，、反·11反.)S匪毅长5峭11StageZStage395℃60℃，72℃88℃72“C，10min表6:大肠杆菌荧光定量反应

图4:双歧杆菌循环曲线

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 谭东毅,姚宏昌;丽珠肠乐在消化道恶性肿瘤化疗中的应用[J];当代医学;2001年11期

2 谭建美;肠粘膜屏障损伤的机制[J];第一军医大学学报;2001年08期

3 吴仲文;李兰娟;;肝硬化并发症与肠道菌群[J];国际流行病学传染病学杂志;2006年01期

4 张琳 ,段恕诚;婴幼儿期肠道正常菌群演变及影响因素[J];临床儿科杂志;2004年07期

5 郭贵海,王崇文;肠道菌群调节剂的研究进展[J];临床内科杂志;2002年02期

6 陈渝萍,文博;白血病患者化疗前肠道菌群状态初步分析[J];临床血液学杂志;1998年05期

7 段美丽,王彦军,韩德五;急性肝功能衰竭时肠粘膜屏障损伤的研究[J];中国病理生理杂志;1999年10期

8 梁冰,吴力克,姜峰,付海波,熊德鑫,修淑丽;双歧杆菌QJ405、乳杆菌QJ405在试管内对肠道致病菌抑杀效果的初步报告[J];中国微生态学杂志;2000年05期

9 张宝元,马晓红,刘震,鲁杰,赵小元,郭良娟;双歧杆菌及其WPG对S_(180)荷瘤小鼠免疫调节和抑瘤作用研究[J];中国微生态学杂志;2001年01期

10 蓝景刚,胡宏;双歧杆菌的免疫调节作用研究进展(上)[J];中国微生态学杂志;2002年02期

本文编号：2809245