巢式RT-PCR和FISH联合应用检测儿童ALL常见融合基因

发布时间：2020-09-01 20:12

　　 目的:建立巢式RT-PCR和FISH技术检测融合基因的方法,检测TEL-AML1、E2A/PBX1、MLL/AF4、BCR/ABL 4种融合基因在儿童急性淋巴细胞白血病中的阳性率,并对巢式RT-PCR和FISH技术在融合基因检测方面的侧重点进行初步比较。方法:采用巢式逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和荧光原位杂交技术(FISH)检测63例初诊ALL患儿骨髓单核细胞中TEL-AML1、E2A/PBX1、BCR/ABL、MLL/AF4融合基因。患儿疾病达到完全缓解后又用巢式RT-PCR和FISH技术检测5例TEL-AML1阳性患儿骨髓中TEL-AML1融合基因。 结果: ①巢式RT-PCR技术在初诊ALL患儿中检测到14例TEL-AML1阳性、3例E2A/PBX1阳性、1例BCR/ABL阳性、2例MLL/AF4阳性。 ②FISH技术在初诊ALL患儿中检测到16例TEL-AML1阳性、3例E2A/PBX1阳性、1例BCR/ABL阳性、2例MLL/AF4阳性。 ③5例TEL-AML1阳性患儿完全缓解后,巢式RT-PCR检测其中有2例TEL-AML1阳性。而FISH技术并未发现异常。 结论: ①儿童ALL染色体易位形成的融合基因需用巢式RT-PCR或FISH等分子生物学检测方法加以证实。 ②在初发ALL儿童中的TEL-AML1阳性率为25.4%(16/63),E2A/PBX1阳性率为4.8%(3/63),BCR/ABL阳性率为1.6%(1/63),MLL/AF4阳性率为3.1%(2/63)。 ③FISH技术在初诊ALL患儿检测过程中较巢式RT-PCR更加准确和直观。 ④巢式RT-PCR技术比FISH技术在MRD检测方面更有优势。
【学位单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2009
【中图分类】：R733.7
【部分图文】：

注：2 红 2 绿为正常细胞，1 个黄色信号为 TEL/AML1融合信号，1 个绿信号、1 个红信号为同源染色体上的TEL 和 AML1 基因。TEL/AML1 阳性细胞个数＞5.4%图 6 BCR/ABL FISH 图 7 MLL/AF4 FISH注:2 红 2 绿为正常细胞，黄色信号为融合基因阳性细，E2A/PBX1 阳性细胞数＞4.1%注:BCR/ABL 双色标记单融合信号探针，BCR标记为绿色，ABL 标记为红色，BCR/ABL 阳性注:2 红 2 绿为正常细胞，黄色信号为融合基因阳性细胞，MLL/AF4 阳性细胞个数＞4.8%

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本文编号：2810203