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高氧对早产大鼠肺组织细胞色素氧化酶表达的影响

发布时间:2020-10-16 07:03
   目的迄今高氧肺损伤发病机制尚未完全阐明,多数学者认为氧化应激反应在其发生发展中扮演重要角色。线粒体是细胞内活性氧生产的主要场所和氧化损伤的主要靶细胞器。本课题旨在观察85%高浓度氧暴露对早产新生大鼠肺组织中线粒体DNA编码细胞色素氧化酶亚基(COXⅠ、COXⅡ、COXⅢ)动态表达的影响,探讨其在早产大鼠高氧肺损伤发生、发展中的可能作用。 方法早产SD大鼠生后1 d随机分为空气组、高氧组。高氧组持续暴露于85%氧气中,空气组置于同一室内常压空气中。两组分别于暴露满1、4、7、10和14 d时,每组取动物8只,提取肺组织RNA,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定COXⅠ、COXⅡ和COXⅢmRNA的表达,凝胶电泳条带用凝胶成像分析系统照相并进行分析,比较COXⅠ、COXⅡ和COXⅢ与β-actin扩增条带灰度比值。同时采用免疫组化、免疫印迹(Western-blot)法检测COXⅠ蛋白的表达。 结果(1)mRNA的表达:与同时间点空气组相比,高氧1 d和4 d时,COXⅠmRNA的表达显著增强(P﹤0.05和P﹤0.01),其后开始下降,7 d时二者无显著性差异(P﹥0.05),10 d时较空气组显著降低(P﹤0.01),14 d时复又增高(P﹤0.01);COXⅡ和COXⅢmRNA的表达未见显著性差异。(2)COXⅠ蛋白水平的表达:与同时间点空气组相比,高氧1 d和4 d时,COXⅠ表达显著增强(P﹤0.01和P﹤0.05),7 d时二者无显著性差异(P﹥0.05),其后开始下降,10 d和14 d时较空气组显著降低(P﹤0.01和P﹤0.05)。 结论85﹪高浓度氧暴露诱导早产新生大鼠线粒体DNA编码COXⅠ异常表达,这种变化可能参与了高氧肺损伤的发生。
【学位单位】:华中科技大学
【学位级别】:硕士
【学位年份】:2007
【中图分类】:R722.6
【部分图文】:

时间点,高氧,空气


00.20.40.60.81 d 4 d 7 d 10 d 14 d空气高氧图 3 高氧对 COXⅢ mRNA 动态表达的影响(与空气组相比,无显著性差异)M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10C200900

时间点,高氧,空气


图 5 各时间点 COXⅡ mRNA 的表达M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10图 6 各时间点 COXⅢ mRNA 的表达图 4~6 中,M:Marker;1~10 分别代表: 高氧 1 d;空气β-aCO1200900700500300100

时间点


M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10图 5 各时间点 COXⅡ mRNA 的表达M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10β-CO2009007005003001001200900
【参考文献】

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