新生儿表面蛋白A1基因多态性与支气管肺发育不良相关性研究

发布时间：2020-10-19 17:50

　　 【目的】研究表面蛋白A1基因多态性频率分布,探讨其与新生儿支气管肺发育不良(BPD)相关性 【方法】选择2008年7月至2010年10月同济医院接诊武汉汉族BPD患儿,满足入选条件共38例,同期非呼吸系统疾病入院患儿55例为对照。两组均取静脉血2mL,EDTA-Na抗凝,用传统酚氯仿方法抽提DNA,无水乙醇沉淀干燥后溶解于TE中-20℃保存。SPA1与SPA2同源性极高,故应用巢式PCR(nested-PCR)与限制性酶切(RFLP)技术相结合。每一个样本需进行一次PCR,将PCR产物用双蒸水按1:99稀释后作为用nested-PCR的模板进行第二次PCR。将PCR结果取5μl于2﹪琼脂糖凝胶电泳。取PCR产物5μl分别加入适量的相应特异性内切酶。A219位点65℃水浴2小时,AA62、AA50、AA19位点37℃水浴过夜。酶消化产物10μl或15μl于8%或12﹪聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,参照DNA分子量标准根据电泳条带判断基因型。 【结果】BPD组和对照组AA219,AA62,AA50,AA19基因和基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05)。说明本实验人群均具有群体代表性。对各基因位点的基因型和等位基因频率分布进行比较显示BPD组和对照组之间AA50基因型分布(P=0.038)和等位基因频率(P=0.012)差异有统计学意义。AA219,AA62,AA19三个位点基因型分布和等位基因频率差异无统计学意义(P0.05)。AA50 BPD组CC基因型明显低于对照组(7vs23,P0.05),差异有统计学意义。 【结论】SPA1上AA50位点基因多态性可能与新生儿支气管肺发育不良有关,CC基因型可能对BPD患病有保护作用。
【学位单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2011
【中图分类】：R722.1
【部分图文】：

图 1：为 AA219 位点基因多态性 PAGE 电泳结果：M 泳道：分子量标准；1、7子 T/T 基因型；2、3：为纯合子 C/C 型；4、5、6：为杂合子 T/C 型。AA62 位点 PCR 产物经 HhaⅠ酶切后 PAGE 电泳后银染结果见图 2。表现为A/A 型：222bp；纯合子 G/G 型：196bp；杂合子 A/G 型：222bp 和 196bp。图 2：为 AA62 位点基因多态性 PAGE 电泳结果：1、2、4、8 为纯合子 G/G 型为杂合子 A/G 型；7、9 为纯合子 A/A 型。AA50，AA19 位点 PCR 产物分别经 DdeⅠ和 BbvⅠ酶切后琼脂糖电泳结果见

图 1：为 AA219 位点基因多态性 PAGE 电泳结果：M 泳道：分子量标准；1、子 T/T 基因型；2、3：为纯合子 C/C 型；4、5、6：为杂合子 T/C 型。AA62 位点 PCR 产物经 HhaⅠ酶切后 PAGE 电泳后银染结果见图 2。表现为A/A 型：222bp；纯合子 G/G 型：196bp；杂合子 A/G 型：222bp 和 196bp。

AA62 位点 PCR 产物经 HhaⅠ酶切后 PAGE 电泳后银染结果见A/A 型：222bp；纯合子 G/G 型：196bp；杂合子 A/G 型：222bp 和图 2：为 AA62 位点基因多态性 PAGE 电泳结果：1、2、4、8 为纯为杂合子 A/G 型；7、9 为纯合子 A/A 型。AA50，AA19 位点 PCR 产物分别经 DdeⅠ和 BbvⅠ酶切后琼脂糖AA50 纯合子 G/G 型：143bp；纯合子 C/C 型:123bp； 杂合子 G/C 型AA19 纯合子 T/T 型：143bp；纯合子 C/C 型:103bp； 杂合子 T/C 型
【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 常立文;;新生儿支气管肺发育不良的诊治[J];中国实用儿科杂志;2007年04期

本文编号：2847524