自噬在环境内分泌干扰物致睾丸发育异常和功能障碍中的作用及机制研究
发布时间：2020-12-24 03:16
目的:环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二（2-乙己基）酯（Di-2-ethylhexylphosphate,DEHP）及氟他胺（Flutamide,Flu）构建隐睾模型和未成熟睾丸损伤模型,探究内分泌干扰物暴露致睾丸发育异常和功能障碍的分子机制,并探讨自噬信号通路在其中的作用。方法:第一部分:Sprague-Dawley rat（SD）孕鼠随机分为3组:第一组:不予任何处理作为对照组,Ⅱ组:孕11-19天予以Flu 25mg/kg/bw/d注射,III组:孕7-19天予以DEHP 750 mg/kg/bw/d灌胃。筛选隐睾模型后代并采集睾丸,通过分析凋亡相关蛋白Fas,细胞色素C和caspase-3以及自噬信号通路中关键信号分子LC3I/II、p62、Beclin-1的表达情况,探讨凋亡和自噬信号通路在内分泌干扰物孕期暴露诱导隐睾所致的睾丸损伤中的作用。第二部分:SD大鼠于生后（postnatal day,PND）1-35天分别予以0、250、500 mg/kg DEHP灌胃,于PND35天取睾丸组织,探究LC3I/II、p62、Beclin-1以及睾丸血睾屏障连接蛋白β-catenin、C...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：85 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
氟他胺诱导和DEHP诱导的隐睾大鼠的附睾精子异常对照组雄性大鼠精子（100）（A）
正常对照组 氟他胺诱导单侧隐睾组氟他胺诱导双侧隐睾组DEHP 诱导单侧隐睾组DEHP 诱导双侧隐睾组血清睾酮(nmol/L)19.26±2.56 8.84±2.61 * 3.02±1.78 *# 7.46±3.52 * 5.582.5 隐睾致雄性大鼠睾丸组织形态学变化通过 HE 染色观察 3 组大鼠睾丸的组织形态变化。如图 1.2 所示，与对照组相比（图 1.2.A 和 D），DEHP 组管腔直径变小，生殖细胞显著减少且细胞核深染（图1.2.C 和 F）。所有种类的生殖细胞，包括未分化的精原细胞，分化的精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和长形精子细胞均受到影响。同时，睾丸支持细胞也受到破坏，该镜下改变在氟他胺诱导隐睾组表现更明显（图 1.2.B 和 E）。表 1. 7. 隐睾对大鼠血清睾丸水平的影响Table 1. 7. Effects of cryptorchidism on serum testosterone in rats.
(200 and 400 ) (Fig 1. 2. A and D). Compared with control group, abnormalities of germcells and sertoli cells were in DEHP-induced group (200 and 400 ) (Fig 1. 2. C and F) andFlu-exposure group (200 and 400 ) (Fig 1. 2. B and E) with cells types not identifiable,hyperchromaticnuclei,greatlyreducedtubulediametersandspermatogeniccellsdramaticallydecreased. Detachment and sloughing of spermatogenic cells into the lumen were alsoobviously seen (arrows).2.6 隐睾所致大鼠睾丸超微结构异常与正常组相比，隐睾组睾丸组织生精小管发生严重损伤，出现空泡化样的结构，线粒体也发生肿胀变性（图 1. 3.D-I）。在 DEHP 诱导隐睾大鼠的睾丸生精细胞胞质内，可见许多自噬样小体结构（里面包裹着线粒体和其他破损细胞器成分）（Fig1. 3. D-F）。有趣的是，在氟他胺诱导隐睾大鼠睾丸生精细胞内未见这样的自噬体结构。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Uchl1及其关联蛋白参与小鼠实验性隐睾中精母细胞凋亡(英文)[J]. 杜平,姚余卫,石燕,顾正,王健,孙兆贵,左嘉客. 生理学报. 2014(05)
本文编号：2934872
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：85 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
氟他胺诱导和DEHP诱导的隐睾大鼠的附睾精子异常对照组雄性大鼠精子（100）（A）
正常对照组 氟他胺诱导单侧隐睾组氟他胺诱导双侧隐睾组DEHP 诱导单侧隐睾组DEHP 诱导双侧隐睾组血清睾酮(nmol/L)19.26±2.56 8.84±2.61 * 3.02±1.78 *# 7.46±3.52 * 5.582.5 隐睾致雄性大鼠睾丸组织形态学变化通过 HE 染色观察 3 组大鼠睾丸的组织形态变化。如图 1.2 所示，与对照组相比（图 1.2.A 和 D），DEHP 组管腔直径变小，生殖细胞显著减少且细胞核深染（图1.2.C 和 F）。所有种类的生殖细胞，包括未分化的精原细胞，分化的精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和长形精子细胞均受到影响。同时，睾丸支持细胞也受到破坏，该镜下改变在氟他胺诱导隐睾组表现更明显（图 1.2.B 和 E）。表 1. 7. 隐睾对大鼠血清睾丸水平的影响Table 1. 7. Effects of cryptorchidism on serum testosterone in rats.
(200 and 400 ) (Fig 1. 2. A and D). Compared with control group, abnormalities of germcells and sertoli cells were in DEHP-induced group (200 and 400 ) (Fig 1. 2. C and F) andFlu-exposure group (200 and 400 ) (Fig 1. 2. B and E) with cells types not identifiable,hyperchromaticnuclei,greatlyreducedtubulediametersandspermatogeniccellsdramaticallydecreased. Detachment and sloughing of spermatogenic cells into the lumen were alsoobviously seen (arrows).2.6 隐睾所致大鼠睾丸超微结构异常与正常组相比，隐睾组睾丸组织生精小管发生严重损伤，出现空泡化样的结构，线粒体也发生肿胀变性（图 1. 3.D-I）。在 DEHP 诱导隐睾大鼠的睾丸生精细胞胞质内，可见许多自噬样小体结构（里面包裹着线粒体和其他破损细胞器成分）（Fig1. 3. D-F）。有趣的是，在氟他胺诱导隐睾大鼠睾丸生精细胞内未见这样的自噬体结构。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Uchl1及其关联蛋白参与小鼠实验性隐睾中精母细胞凋亡(英文)[J]. 杜平,姚余卫,石燕,顾正,王健,孙兆贵,左嘉客. 生理学报. 2014(05)
本文编号：2934872
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