白血病儿童骨髓间充质干细胞的分离、培养及其生物学特性和免疫调节功能的初步研究

发布时间：2021-01-11 14:09

　　目的通过体外实验研究白血病儿童骨髓来源的间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）的生物学特性及其免疫调节作用,从而探讨白血病儿童骨髓来源的MSCs在白血病儿童化疗后实行自体回输的可行性及可能出现的免疫重建作用。方法通过Ficoll-Hypaque梯度密度离心法分离出白血病儿童骨髓单个核细胞,贴壁法体外纯化扩增MSCs,获得第3～4（P3⁴）代细胞用于实验。光镜观察细胞生长形态,瑞氏染色观察细胞核浆比例及形态,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测免疫表型,油红O染色及茜素红染色检测其向脂肪及骨细胞分化等观察其生物学特性。取外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cells, PB-MNCs）,用植物凝集素（PHA）及白细胞介素2（IL-2）进行刺激后将MSCs按照不同比例（1/5¹/1000）加入MNCs中,进行细胞相互接触的共培养、transwell体系的细胞非接触性共培养,在培养第5天后收集悬浮细胞,用LDH法检测各组中MNCs的增殖情... 

【文章来源】：广州医科大学广东省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

骨髓单个核细胞接种于塑料培养瓶，24h后部分细胞开始贴壁，形成集落

CD34、CD14双阴性表达率98%以上；HLA-DR表达阴性；CD29、CD105、CD13阳性表达率99%

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2970913