先天性巨结肠肠壁微环境的改变及其与RET基因相关性的研究

发布时间：2021-03-01 18:59

　　目的先天性巨结肠（HD）发病率高，居先天性消化道畸形第二位，是小儿外科领域研究的热点。病理学研究发现病变段有神经节细胞缺乏、多种类型的神经纤维异常增生以及肠壁起搏细胞的异常，这些形态上的异常表明肠神经系统发育缺陷可能是先天性巨结肠发病的原因，但如何出现肠神经系统的发育异常，其病因并不明确。本课题采用免役组织化学方法研究层粘连蛋白（LN）、层粘连蛋白受体（LNR）、纤维粘连蛋白（FN）在先天性巨结肠病儿狭窄段、移行段、正常段的表达；通过RT-PCR、荧光定量PCR对层粘连蛋白基因、RET基因在先天性巨结肠病儿狭窄段、移行段、正常段的表达以及层粘连蛋白基因与RET基因表达的相关性进行研究，探讨先天性巨结肠肠壁微环境改变对肠道神经系统发育的影响，以及这些改变与RET基因的相关性，旨在探讨先天性巨结肠的病因。方法标本取自山东大学齐鲁医院小儿外科2004年均经病理证实的27例HD病儿，以狭窄段为无神经节细胞段，查见有神经节细胞的移行段为有神经节细胞段，扩张段近端为正常段，分别取200mg新鲜标本放入无菌试管中于负84℃冰箱中保存，另取新鲜组织用10％福尔马林固定，常规石蜡包埋。用二步法对27例H... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：97 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

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山东大学博士学位论文图ZLN的免疫组化染色(标尺=50切口)A狭窄段傲膜及粘膜下层基底膜棕黄色颗粒多，片状，色深)B移行段(基底膜棕黄色颗粒减少，点线状)C正常段(染色点少，色浅)Fig.2加叨unohistoche而stlystainingofLN伪ar=50切m)Aaganglioulcseg叮entB加劝siti。耐朋gme爪Cdilatedseg口eni

因的产物亮度依次下降，即其表达水平有依次下降趋势;RET基因的产物亮度依次上升，即其表达水平则依次升高(图4)。卜actin317bP枷叮ininalPha1I86bPRET10IbP图4Rl’-pCR检测l出九ininalphal，既T，p一actin基因mRNA在三段组织的表达，1、2、3:狭窄段、移行段、正常段1别旧ininalphal;4、5、6:狭窄段、移行段、正常段RET.(3)由alpha990()凝胶分析系统分别得到larni址n吻hal基因、RET基因与p一actin基因灰度值的直方图(图5、图6)。密度值

【参考文献】：
期刊论文
[1]先天性巨结肠与其同源病的RET基因突变的研究[J]. 钭金法,李民驹,李继承,管涛,冯志刚.  中华小儿外科杂志. 2004(02)
[2]实时荧光定量PCR技术及其应用[J]. 欧阳松应,杨冬,欧阳红生,马鹤雯.  生命的化学. 2004(01)
[3]先天性巨结肠c-kit+肠间质细胞分布的免疫组织化学研究[J]. 刘兴攀,张文同,董志行,张金哲.  中华小儿外科杂志. 2003(02)
[4]先天性巨结肠症肠壁微环境改变的免疫组织化学研究[J]. 赵雅男,聂绍发,魏明发,朱桂宝.  中华小儿外科杂志. 2003(02)
[5]先天性巨结肠分子遗传学研究最新进展[J]. 舒晓钢.  医学理论与实践. 2003(01)
[6]先天性巨结肠相关基因研究进展[J]. 柳宏,陈克能.  国外医学.遗传学分册. 2002(04)
[7]先天性巨结肠病肠壁NOS阳性神经元光镜和电镜观察[J]. 章明,潘剑威,任天荣,韩永坚,章锁江,钟海玲,熊启明.  解剖学报. 2001(03)
[8]先天性巨结肠症C-fos原癌基因表达的研究[J]. 高红,白玉作,刘红宇,孔娟,景士兵.  中华消化杂志. 2000(04)
[9]ECM,MMPs/TIMPs及其调节研究进展[J]. 袁发焕,王海燕,李惊子.  国外医学(生理、病理科学与临床分册). 2000(02)
[10]先天性巨结肠RET基因转录水平的研究[J]. 詹江华,房志勤,谷继卿.  中华小儿外科杂志. 1999(01)



本文编号：3057891