HPLC-MS/MS分析干血滤纸片维生素A及其前体的方法学研究

发布时间：2021-03-08 04:13

　　目的将高灵敏度的串联质谱检测技术与高效能、高分离能力的高效液相色谱技术相结合,建立干血滤纸片中视黄醇及其乙酸酯、棕榈酰酯、β-胡萝卜素的定量分析方法,为微量血检测诊断新生儿维生素A缺乏症奠定方法学基础。方法本文详细考察了干血滤纸片中视黄醇、视黄醇乙酸酯、视黄醇棕榈酰酯和β-胡萝卜素质谱、色谱分离分析和提取的最佳条件。在质谱分析中研究分子离子峰、碎片离子峰、解簇电压、碰撞能量、碰撞室入口电压和出口电压等,以获得分析的最佳质谱条件；在色谱分析中,通过对固定相、流动相、柱温的研究,以优化色谱分离条件；比较几种常用的不同前处理方法,通过计算不同前处理方法所获得的各物质峰面积,确定最适萃取方法。在最佳质谱、色谱和萃取条件下,采用内标法建立HPLC-MS/MS定量分析干血滤纸片中视黄醇、视黄醇乙酸酯、视黄醇棕榈酰酯和β-胡萝卜素的方法,考察基质效应、线性范围、检出限、准确度、精密度,以及本方法分析干血滤纸片视黄醇结果与HPLC方法检测血清视黄醇的相关性。结果视黄醇、视黄醇乙酸酯、视黄醇棕榈酰酯和p-胡萝卜素质谱检测条件得到优化；选择了C8柱作为固定相,含5%二氯甲烷的甲醇作为流动相,流速0.2 m... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：85 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．１视黃醇及其乙酸醋、踪禍酷酷的Ｑ１／Ｑ３离子对??

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＜一－??Ｅ??图１．４视黄醇及其艺酸醋、栋桐醜醋质谱分析条件的优化??Ｆｉｇ?１．４?Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ?ＤＰ，?ＥＰ?ＣＥＰ，?ＣＥ?ａｎｄ?ＣＸＰ?ｎｏｆ?ＭＳ／ＩＶＩＳ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｆｏｒ?ｒｅｔｉｎｏｌ?ａｎｄ?ｉｔｓ?ｅｓｔｅｒｓ??Ｔｈｅ?ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ?ＤＰ（Ａ），ＥＰ（Ｂ），?ＣＥＰ（Ｃ），?ＣＥ（Ｄ）?ａｎｄ?ＣＸ巧Ｅ）?ｏｆ?ＭＳ／ＭＳ?ａｎａｌｙｓｉｓ?化ｒ?ｒｅｔｉｎｏｌ?ａｎｄ??ｒｅｔｉｎｙｌ?ａｃｅｔａｔｅ，?ｒｅｔｉｎｖｌ?ｐａｌｍｈａｔｅ?ｗｅｒｅ?４４．２８ｖ，?４．７０ｖ，?１３．９６ｖ，?３４．７２ｖ?ａｎｄ?２．５６ｖ，?ｉ＊ｅｓｐｅｃｔｉｖｄｙ．??２）?Ｐ－胡萝ｈ素质谱条件优化??Ｑ１?ＳＩＭ模式扫描小同Ｄ条件下Ｐ－胡萝ｈ素准分子离子的离子强度，??发现ＤＰ在Ｏ．ＯＯＶ－５４．３２Ｖ，随名ＤＰ增加准分子离子离子强度逐渐增加，ＤＰ在５４．３２Ｖ??－１５化ＯＯｖ，随着ＤＰ增加准分子离子离子强度逐渐降低，ＤＰ为５４．３２Ｖ时，准分子??离了离子强度最高，即为优化的ＤＰ参数。同理，ＥＰ、ＣＥＰ在４．１３Ｖ、２７．２１Ｖ时，??准分子离子ｍ／ｚ５３６．９的离子强度最高

【参考文献】：
期刊论文
[1]“方法学比较”法评价临床检验定量测量方法正确度时应注意的问题与对策[J]. 陈宝荣.  临床检验杂志. 2012(10)
[2]高效液相色谱串联质谱法同时测定大黄鱼肝和鲟鱼肝中的脂溶性维生素[J]. 孙伟红,冷凯良,邢丽红,苗均魁,王志杰,谭志军,翟毓秀,李兆新.  分析试验室. 2010(S1)
[3]液质联用法测定血浆中罗红霉素的内标法与外标法的比较[J]. 张丽芳,薛飞群.  分析试验室. 2009(S2)
[4]液相色谱-质谱分析中的基质效应[J]. 向平,沈敏,卓先义.  分析测试学报. 2009(06)
[5]维生素分析方法研究进展[J]. 王延华.  农产品加工. 2009(01)
[6]标准加入法在仪器分析中的应用释疑[J]. 卢洁.  广西农业生物科学. 2008(S1)
[7]液质联用仪离子源与质量分析器的类型及其在食品安全检测中的应用[J]. 孙良娟,蔡泓.  检验检疫科学. 2008(02)
[8]高效液相色谱法测定微量全血中维生素A[J]. 陈东,张瑞云,杨柳桦,孙成均.  分析试验室. 2008(03)
[9]高效液相色谱法测定人血中脂溶性维生素的含量[J]. 徐军,张慧芬,邵裕坤,王珏.  中国药学杂志. 2006(02)
[10]临床检验项目评价方法的初步探索[J]. 张锦锋,黄维纲,胡晓波,陈慧英,娄峥,李泳,周华文.  检验医学. 2004(04)

硕士论文
[1]生物样品中药物浓度的HPLC-MS/MS测定及其药代动力学研究[D]. 李国樑.南方医科大学 2012



本文编号：3070390