慢病毒介导RNA干扰NgR基因对新生大鼠缺氧缺血性脑白质损伤的修复作用

发布时间：2021-04-04 14:11

　　目的:构建NgR特异性siRNA慢病毒重组体,在新生大鼠缺氧缺血性脑白质损伤模型水平,探讨NgR特异性siRNA慢病毒重组体干扰大鼠NgR mRNA表达及其对新生大鼠缺氧缺血性脑白质损伤的修复作用。方法:1、建立P3新生SD大鼠缺氧缺血性脑白质损伤模型,从生物行为学、组织形态学进行验证。2、设计、构建NgR特异性siRNA慢病毒重组体并鉴定。3、Western Blot方法外源筛靶、内源筛靶,选择最有效的靶点,并包装成慢病毒。4、40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、空病毒组、慢病毒组（每组10只）,新生大鼠缺氧缺血性脑白质损伤3天后（P6）经侧脑室注射给药,观察大鼠的行为学改变。5、80只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、空病毒组、慢病毒组（每组20只）,新生大鼠缺氧缺血性脑白质损伤3天后（P6）经侧脑室注射给药,RT-PCR检测P6、P7、P9、P13 SD大鼠NgR mRNA表达情况。结果:1、结扎P3新生SD大鼠双侧颈总动脉建立缺氧缺血性脑白质损伤模型,从生物行为学、组织形态学进行验证,模型组都出现了有意义的改变。2、设计、构建NgR特异性siRNA慢病毒重组体经PCR鉴定、... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

动物模型制作a结扎颈总动脉b造模术后ab

台上休息 30s。大鼠休息 2min 后进入下一个象限训练。2.3.3 测试阶段训练 2d 后的第 3d 进行正式测试。用微机追踪系统记录整个实验过程，应系统软件进行视频记录及数据分析。分析大鼠找到平台的时间（平均逃避潜期）、距离靶心的距离，检测大鼠空间学习能力。在第 5d 第四象限结束后，撤平台，观察 60s 内大鼠在平台附近停留的情况，检测大鼠空间记忆能力，见图

结 果验动物术后情况前大鼠全身粉嫩，吸吮有力，术后大鼠全身变得苍白，自发运动减少，多数于 48h 后恢复正常。Sham 组术中死亡 1 只，可能是术中麻醉术后 48h 内无死亡。WMD 组术中死亡 3 只，1 只可能是剥离动脉和神干净，误把迷走神经与颈总动脉一起结扎造成死亡；2 只是用力过猛拉扯断，引起大出血死亡，术后 48h 内死亡 2 只，估计与手术创伤及力差有关。物行为学观察重比较MD 组大鼠平均体重（31.094±1.285 g）明显低于相应日龄 Sham 组大（36.256±1.363 g），两组比较有统计学意义（P＜0.05）。两组平均图 3，统计数据分析见表 1。

【参考文献】：
期刊论文
[1]NgR在新生大鼠少突胶质前体细胞系的表达和缺氧缺血后变化的意义[J]. 唐军,姚裕家,钟琳.  中国当代儿科杂志. 2007(05)
[2]缺氧缺血新生鼠损伤脑组织中Nogo-A,Ng-R mRNA的表达[J]. 王华,姚裕家.  郑州大学学报(医学版). 2005(02)
[3]Nogo-66受体在成年大鼠脊髓白质内胶质细胞的分布[J]. 胡泽岚,刘莹莹,金卫林,刘惠玲,鞠躬.  第四军医大学学报. 2004(16)



本文编号：3118181