膜联蛋白A2对肺炎支原体诱导的人气道上皮细胞EGFR/NF-κB信号转导及黏蛋白表达的影响

发布时间：2021-06-22 23:34

　　目的探讨沉默膜联蛋白A2（Anx A2）对肺炎支原体（MP）处理后人气道上皮细胞H292表皮生长因子受体（EGFR）/核因子κB（NF-κB）信号转导及黏蛋白表达的影响。方法将H292细胞分为对照组、MP组、NC-si RNA+MP组和Anx A2 si RNA+MP组。MP组上皮细胞采用5μg/m L MP抗原孵育2 h。NC-si RNA+MP组和Anx A2 si RNA+MP组细胞分别转染NC-si RNA和Anx A2 si RNA 24 h后用MP抗原刺激2 h。MTT法检测各组细胞活性;实时荧光定量PCR（q RT-PCR）检测各组细胞中Anx A2 m RNA的表达水平;Western blot法检测各组细胞Anx A2、磷酸化EGFR（p-EGFR）、磷酸化p65 NF-κB（p-p65 NF-κB）的表达水平;酶联免疫吸附试验检测黏蛋白5AC（MUC5AC）和黏蛋白5B（MUC5B）的分泌。结果 MP组和NC-si RNA+MP组细胞活性低于对照组（P<0.05）,Anx A2 si RNA+MP组细胞活性高于MP组和NC-si RNA+MP组,但仍低于对照组... 

【文章来源】：中国当代儿科杂志. 2017,19(07)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

MTT法检测各组H292细胞活性（n=3）

图3Westernblot检测各组H292细胞AnxA2蛋白表达上图为蛋白电泳条带图，下图为统计图（n=3）。a示与对照组比较，P<0.05；b示与MP组比较，P<0.05；c示与NC-siRNA+MP组比较，P<0.05。0.80.60.40.20a,b,c对照组MP组NC-siRNA+MP组AnxA2siRNA+MP组AnxA2β-actin对照组MP组NC-siRNA+MP组AnxA2siRNA+MP组38.6KD42KDnxA2A白相对表达量蛋p-EGFREGFRp-p65p65β-actin对照组MP组NC-siRNA+MP组AnxA2siRNA+MP组134.3kD134.3kD65kD65kD42kD图4Westernblot检测各组H292细胞p-EGFR和p-p65NF-κB蛋白表达电泳图

光密度值计算相对表达量。实验独立重复3次。1.10统计学分析采用SPSS13.0统计软件对数据进行统计学分析。计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，多组均数的比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q法，P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1AnxA2siRNA转染对H292细胞存活的影响与对照组比较，MP组和NC-siRNA+MP组细胞活性明显降低（P<0.05），AnxA2siRNA+MP组细胞活性均高于MP组和NC-siRNA+MP组，但仍低于对照组（P<0.05），NC-siRNA+MP组细胞活性与MP组比较差异无统计学意义（P>0.05），见图1，表1。图1MTT法检测各组H292细胞活性（n=3）0.50.40.30.20.10DO值1234天数（d）对照组MP组NC-siRNA+MP组AnxA2siRNA+MP组


本文编号：3243752