高氧暴露和小分子干扰RNA对A549细胞核转录相关因子-2与NAD（P）H：醌氧化还原酶1表达的影响及其与细胞凋亡的关系

发布时间：2021-07-11 18:29

　　目的研究高氧暴露和小分子干扰RNA（siRNA）对A549细胞中细胞核转录相关因子2（Nrf2）、NAD（P）H:醌氧化还原酶1（NQO1）表达的影响,探讨其在高氧肺损伤中的作用及其与细胞凋亡的关系。方法将体外培养A549细胞随机分为4组:Ⅰ组为无干扰空气组;Ⅱ组为无干扰高氧组;Ⅲ组为Nrf2 siRNA转染空气组;Ⅳ组为Nrf2 siRNA转染高氧组;将Ⅱ组、Ⅳ组持续暴露于常压高浓度氧（950 mL/L O2,50 mL/L CO2）中;Ⅰ组、Ⅲ组仍置于50 mL/L CO2培养箱中。通过预实验从目的基因靶点siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3（分别加入对应脂质体复合物）中筛选出抑制Nrf2效率最高的Nrf2 siRNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）、Western blot分别检测4组Nrf2、NQO1的mRNA及蛋白表达水平,应用免疫荧光和激光共聚焦显微镜分析干扰Nrf2后A549细胞中Nrf2、kelch样ECH相关蛋白1（Keap1）、抗氧化物反应元件蛋白的分布,观察各组细胞凋亡情况。结果 1.Nrf2 siRNA可抑制Nrf2表达,siRNA-1组、s... 

【文章来源】：中华实用儿科临床杂志. 2020,35(21)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3278620