染色质重塑因子Brg1通过STAT6促进哮喘气道黏液高分泌的研究
发布时间：2021-07-18 14:37
目的:本实验旨在研究染色质重构复合物核心催化亚基（Brg1）对哮喘小鼠气道黏液高分泌的影响及探讨其可能作用机制。方法:将68周龄SPF级雌性野生型C57bl/6小鼠和Brg1-/-小鼠（AEC2s上特异性条件敲低Brg1的C57bl/6小鼠）随机分为四组:Control（正常对照组）、Asthma（哮喘组）、Brg1-/-（Brg1敲低对照组）和Brg1-/-+Asthma（Brg1敲低后构建哮喘模型组）,每组10只。Asthma组和Brg1-/-+Asthma组用鸡卵清蛋白OVA制备过敏性哮喘模型,对照组用生理盐水代替。于最后一次雾化后24h内收取建模标本。PAS染色检测各组小鼠气道杯状细胞的增生情况和黏液分泌量;ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液中黏蛋白MUC5AC和细胞因子IL-13水平;荧光定量PCR检测肺组织匀浆黏蛋白MUC5AC水平;免疫组化检测各组小鼠气道黏蛋白MUC5AC和STAT6的表达和定量;Western blot检测各组小鼠肺组织中STAT6、p-STA...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：44 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组小鼠肺组织PAS染色Fig.1PASstainingofeachgroup（A为各组小鼠肺组织PAS染色，B为其统计结果，*P<0.01与Control组比较，#P<0.01与Asthma组比较）
图 2 各组小鼠 BALF 上清液中 MUC5AC、IL-13 含量Fig.2 Expression of MUC5AC and IL-13 in BALF of each group（A 为 BALF 中 MUC5AC 表达统计，B 为 BALF 中 IL-13 表达统计，*P<0.01 与 Control 组比较，#P<0.01 与 Asthma 组比较）2.3 各组小鼠气道上皮黏蛋白 MUC5AC 表达情况MUC5AC 免疫组化染色的阳性信号为气道上皮细胞的细胞质和细胞膜显示出黄色或黄棕色颗粒。与 Control 组（12.29±3.336）比较，免疫组化染色显示 Asthma组（44.62±11.76）气道上皮细胞中 MUC5AC 高表达（P<0.01），而 Brg1-/-+Asthma组（22.71±3.510）气道上皮细胞中 MUC5AC 较 Asthma 组表达显著减少，差异具有统计学意义（P<0.01）。（A）Control Asthma（B）
重庆医科大学硕士研究生学位论文图 3 各组小鼠气道上皮黏蛋白 MUC5AC 表达情况（200×）Fig.3 Expression of mucin MUC5AC in each group(magnification: ×200).（A为MUC5AC免疫组化染色，B为其统计结果，*P<0.01 与Control组比较，#P<0.01 与组比较）2.4 各组小鼠肺组织 MUC5AC mRNA 表达情况通过 q-PCR 检测黏蛋白 MUC5AC mRNA 的表达发现：Asthma 组小鼠中黏蛋白 MUC5AC mRNA 与 Control 组比较，表达明显增高，差异具有统义( P<0.01) 。与 Asthma 组比较，Brg1-/-+Asthma 组 MUC5AC mRNA 表降低，差异有统计学意义( P<0.01)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]针刺对哮喘模型大鼠肺组织中TGF-β1表达的调控[J]. 韩君萍,李双,赵叶,杨金华,虞跃跃,孙娜,崔建美. 中国针灸. 2017(07)
[2]Ⅱ型肺泡上皮细胞Brg1基因条件敲低小鼠的基因型鉴定[J]. 司道祝,彭单伊,张荣,夏耘秋,牛超,苟好,刘姜,王莉佳,田代印,刘恩梅,邹琳,符州. 中国细胞生物学学报. 2017(03)
本文编号：3289773
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
各组小鼠肺组织PAS染色Fig.1PASstainingofeachgroup（A为各组小鼠肺组织PAS染色，B为其统计结果，*P<0.01与Control组比较，#P<0.01与Asthma组比较）
图 2 各组小鼠 BALF 上清液中 MUC5AC、IL-13 含量Fig.2 Expression of MUC5AC and IL-13 in BALF of each group（A 为 BALF 中 MUC5AC 表达统计，B 为 BALF 中 IL-13 表达统计，*P<0.01 与 Control 组比较，#P<0.01 与 Asthma 组比较）2.3 各组小鼠气道上皮黏蛋白 MUC5AC 表达情况MUC5AC 免疫组化染色的阳性信号为气道上皮细胞的细胞质和细胞膜显示出黄色或黄棕色颗粒。与 Control 组（12.29±3.336）比较，免疫组化染色显示 Asthma组（44.62±11.76）气道上皮细胞中 MUC5AC 高表达（P<0.01），而 Brg1-/-+Asthma组（22.71±3.510）气道上皮细胞中 MUC5AC 较 Asthma 组表达显著减少，差异具有统计学意义（P<0.01）。（A）Control Asthma（B）
重庆医科大学硕士研究生学位论文图 3 各组小鼠气道上皮黏蛋白 MUC5AC 表达情况（200×）Fig.3 Expression of mucin MUC5AC in each group(magnification: ×200).（A为MUC5AC免疫组化染色，B为其统计结果，*P<0.01 与Control组比较，#P<0.01 与组比较）2.4 各组小鼠肺组织 MUC5AC mRNA 表达情况通过 q-PCR 检测黏蛋白 MUC5AC mRNA 的表达发现：Asthma 组小鼠中黏蛋白 MUC5AC mRNA 与 Control 组比较，表达明显增高，差异具有统义( P<0.01) 。与 Asthma 组比较，Brg1-/-+Asthma 组 MUC5AC mRNA 表降低，差异有统计学意义( P<0.01)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]针刺对哮喘模型大鼠肺组织中TGF-β1表达的调控[J]. 韩君萍,李双,赵叶,杨金华,虞跃跃,孙娜,崔建美. 中国针灸. 2017(07)
[2]Ⅱ型肺泡上皮细胞Brg1基因条件敲低小鼠的基因型鉴定[J]. 司道祝,彭单伊,张荣,夏耘秋,牛超,苟好,刘姜,王莉佳,田代印,刘恩梅,邹琳,符州. 中国细胞生物学学报. 2017(03)
本文编号：3289773
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