结肠癌候选糖蛋白生物标志物的鉴定及验证和新型娃儿藤碱衍生物NK-007在肠炎模型中的作用及机制探讨

发布时间：2021-07-23 21:25

　　结肠癌是一个重要的世界性的公共卫生问题,新的肿瘤生物标志物将有助于提高结肠癌病人在疾病的早期发现、预后或监视。本研究主要是评估结肠癌患者组织的糖蛋白质谱,以期发现潜在的糖蛋白生物标志物。我们首先使用凝集素芯片比较结肠癌组织和对应的正常组织蛋白之间糖链表达谱。结果表明与正常组织相比,结肠癌组织中有着广泛的糖基化的表达,并且糖基化的强度较高。为了验证芯片的结果,我们使用了凝集素组织化学的方法。我们的结果发现马铃薯凝集素（STL）所结合的N-乙酰氨基葡萄糖（GlcNAc）的水平在结肠癌中升高,这与凝集素芯片的结果一致。为了进一步探究N-乙酰氨基葡萄糖所结合的糖蛋白究竟是何种,我们首先使用凝集素亲和的方法,利用磁珠为载体分离富集能与凝集素STL特异性结合的糖蛋白/糖肽,洗脱后用于液相色谱和质谱进行蛋白的分析和鉴定。通过蛋白质组学定量分析,我们确定了72个具有高可信度的蛋白质。这些蛋白质当中,有17个特异性的在结肠癌组织中检测到,14个蛋白在肿瘤组织中显著上调。随后,我们选取两个仅在癌组织中表达或在癌组织中上调的蛋白进行进一步的验证,它们分别为Annexin A1和HSP90β。首先我们通过免疫... 

【文章来源】：南开大学天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：90 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
第一章 结肠癌候选糖蛋白生物标志物的鉴定及验证
    第一节 前言
        1.1.1 糖蛋白的研究现状
        1.1.2 糖蛋白质组研究技术
        1.1.3 糖蛋白组的应用
    第二节 技术路线
    第三节 实验材料与方法
        1.3.1 实验材料
        1.3.2 实验方法
    第四节 实验结果
        1.4.1 凝集素芯片比较结肠癌组织与癌旁对照间的糖链差异
        1.4.2 凝集素组织化学验证
        1.4.3 STL富集蛋白的鉴定以及相对定量
        1.4.4 凝集素印迹验证
        1.4.5 Western blot验证Annexin A1和HSP90β在结肠癌组织中的表达
        1.4.6 免疫组化验证Annexin A1和HSP90β在结肠癌组织中的表达
    第五节 讨论
        1.5.1 结肠癌研究的现状
        1.5.2 结肠癌的诊断与治疗
        1.5.3 糖基化与肿瘤
        1.5.4 糖基化研究手段
        1.5.5 糖蛋白的鉴定及验证
    第六节 结论
第二章 新型娃儿藤碱衍生物NK-007在肠炎模型中的作用及机制探讨
    第一节 引言
    第二节 材料与方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 实验方法
    第三节 实验结果
        2.3.1 NK-007在DSS诱导的急性肠炎中的治疗作用
        2.3.2 NK-007缓解慢性肠炎的加重
        2.3.3 NK-007可缓解由醋酸诱导的大鼠肠炎
        2.3.4 MK-007可抑制BMDC中细胞因子的产生
        2.3.5 NK-007抑制肠炎的作用可能是通过抑制磷酸化P65的产生来实现的
    第四节 讨论
参考文献
致谢
个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果



本文编号：3300066