microRNA let-7促进脑白质损伤中少突胶质祖细胞迁移的体外研究

发布时间：2021-08-18 20:25

　　早产儿脑白质损伤（preterm white matter injury,PWMI）是早产儿出生后并发症中脑损伤的主要类型。早产儿出生后由于反复缺血缺氧和炎症反应的发生,少突胶质祖细胞（oligodendrocyte precursor cells,OPCs）在迁移和发育等方面受到严重干扰,进一步造成髓鞘形成障碍,最终导致早产儿脑白质损伤。OPCs迁移受阻是已知许多脱髓鞘疾病的主要原因之一,因此确定早产儿脑白质损伤过程中的分子机制显得尤为重要。小RNA（micro RNA）是内源性非编码小RNA,长度约为18–25个核苷酸,其在进化中高度保守,在组织中高度特异,小RNA通过转录后调控在细胞迁移和代谢中发挥着重要的调控作用。OPCs的发育是一个高度协调的过程,受多种内源因素和外源因素（如生长因子、递质受体和表观遗传）的调控,但对于调控OPCs迁移的分子机制的研究仍不明确。本文中,我们优化了早产儿脑白质损伤小鼠模型中的OPCs体外培养流程,通过RNA测序和RT-PCR检测,我们发现在PWMI模型中,micro RNA let-7家族表达水平下降,在体外过表达let-7可促进OPCs的迁移。... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PWMI模型优化与检测

浙江大学硕士学位论文 结果 OPCs的培养方法，因Chen所用为转基因胚胎期小鼠，而普通C57小鼠在出生后第3天才造模，其OPCs的培养较胚胎期困难，所以经过反复探索我们改进了若干条件（详见实验方法），在体外建立了造模后小鼠OPCs的培养体系。在培养后第7天，大部分单个神经干细胞聚集形成神经干细胞球，自第7天至第31天（解离细胞球得到单细胞OPCs），Olig2-一种少突胶质细胞谱系的标记物-在上述阶段的细胞球和单细胞的细胞核中均有表达，而干细胞标记物SOX2在解离后第6天单细胞OPCs聚集成球后的阳性荧光成像，进一步表明了OPCs干性的持续表达(图3.2)。

浙江大学硕士学位论文结果16图3.3PWMI中let-7a、let-7g表达降低A.对照组和PWMI组的样品相关性热图矩阵（pearson相关系数均大于0.9）B.对照组和PWMI组的miRNAs差异聚类热图，表达量为log2(PWMI/Control)C.对照组和PWMI组中let-7a、let-7g差异聚类热图，表达量为log2(PWMI/Control)3.4PWMIOPCs中let-7前体转录水平变化我们通过RT-PCR检测了PWMI模型OPCs中miRNAlet-7家族中几个前体形式的表达，结果表明PWMI中let-7a1、let-7a2、let-7a3和let-7g的pri-miRNA表达量显著降低（图3.3）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]胎膜早破对胎龄<37周早产儿并发症的影响[J]. 段顺艳,孔祥永,徐凤丹,吕红艳,巨容,李占魁,曾淑娟,武辉,张雪峰,刘卫鹏,刘芳,程红斌,丁艳洁,陈铁强,许平,杨李红,吴素静,汪瑾,彭立,赵小林,丘惠娴,温伟溪,李莹,李楠,文峥,郭果,王凤,李改梅,李薇,赵晓英,许云波,陈文超,尹欢,王晓亮,单瑞艳,韩梅盈,杨春燕,封志纯.  南方医科大学学报. 2016(07)
[2]Negative regulation of miRNA-9 on oligodendrocyte lineage gene 1 during hypoxic-ischemic brain damage[J]. Lijun Yang,Hong Cui,Ting Cao.  Neural Regeneration Research. 2014(05)



本文编号：3350567