雷帕霉素通过p62-Keap1-Nrf2途径抑制肺上皮细胞铁死亡对支气管肺发育不良的影响机制研究

发布时间：2021-09-16 21:44

　　目的:随着NICU救治技术的发展,小胎龄早产儿的存活率不断提高,但随之而来,支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）的发病率逐年上升。BPD是早产儿常见的呼吸系统疾病之一,以肺泡发育不良为主要特点,其主要病理特征为肺泡数量少、体积大、结构简单化并伴随肺微血管发育不良,其远期结局主要有反复呼吸道感染、气道高反应性、肺功能异常等。因此探寻肺泡发育障碍的关键机制亟待解决。肺泡II型上皮（type II alveolar epithelial cells,AECII）作为肺泡上皮中的“干细胞”,在肺损伤时能够分化成为AECI,共同维持肺泡结构的稳定,保证肺泡表面积,在肺组织修复过程中发挥重要作用。在本课题组前期对BPD模型超微结构进行观察时,我们发现AECII线粒体发生了体积变小、外膜断裂、嵴结构消失等改变,这种特征性改变符合一类新型细胞死亡模式-铁死亡（Ferroptosis）。铁死亡是一类Fe依赖性的氧化损伤引起的细胞死亡模式。这一细胞死亡过程与凋亡、坏死和自噬在形态学特征及生理生化方面均有差异。目前针对铁死亡的研究主要集中在肿瘤、神经退行性疾病、缺... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：94 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

肺组织形态学改变（200×）

原代AECⅡ的提取与鉴定（400×）

中国医科大学博士学位论文93.1.2原代肺泡II型上皮的提取与鉴定按照原代AECII提取方法，细胞差速贴壁法进行分离、纯化、并对培养后的细胞进行了鉴定。可见纯化培养的细胞呈椭圆形，细胞与细胞抱团形成细胞岛，呈铺路石样改变，AECII细胞特异性标志物pro-SPC免疫荧光染色可见AECII细胞为细胞浆染成红色的阳性细胞，阳性细胞占细胞总数的90%以上（图1-2）。图1-2原代AECⅡ的提取与鉴定（400×）AECⅡ细胞标志物SP-C免疫荧光染色，红色为荧光标记SP-C，蓝色为DAPI标记细胞核。3.1.3透射电镜下观察细胞超微结构透射电镜下可见，对照组AECII呈圆形，表面有短小微绒毛，胞质内含有形状和大小不一的分泌颗粒，为AECII标志物，嗜锇性板层小体，还可见完整的细胞器，内质网结构正常，线粒体双层膜完整，嵴结构清晰。7d模型组AECII可见微绒毛减少，线粒体体积减小，嵴结构出现断裂。14d模型组AECII，可见微绒毛基本消失，板层小体大量排出，空泡化，线粒体内嵴结构破碎，双层膜断裂（图1-3）。图1-3透射电镜观察肺泡II型上皮细胞


本文编号：3397348