C/EBPα对高氧暴露后AECⅡ分泌肺泡表面活性蛋白和细胞增殖及凋亡的影响

发布时间：2021-10-05 07:05

　　目的支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）是早产儿常见的慢性肺部疾病,BPD的发生与机械通气及长期吸入高浓度氧密切相关。CCAAT增强子结合蛋白α（CCAAT enhancer binding proteinα,C/EBPα）在肺发育及成熟等过程中作为关键转录因子发挥重要作用。本研究首先利用早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（Alveolar typeⅡEpithelial Cell,AECⅡ）,探讨高氧暴露对C/EBPα、肺泡表面活性蛋白A（SP-A）、SP-B、SP-C、SP-D表达及细胞增殖的影响;同时利用人AECⅡ细胞株,研究过表达C/EBPα对高氧暴露后AECⅡ增殖、凋亡及SP-C的影响,明确C/EBPα在高氧肺损伤中的作用。方法SD雌雄大鼠交配,雌鼠孕20 d-21 d时腹腔注射麻醉药后,剖宫取出胎鼠,分离纯化AECⅡ,进行原代培养。利用95%O₂构建高氧损伤AECⅡ细胞模型作为高氧组后续实验。将细胞随机分为空气对照组和高氧组。两组细胞分别在培养的24 h、48 h及72 h进行收集。使用倒置相差显微镜观察各组细胞的形态... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

空气组和高氧组AECⅡ形态（倒置相差显微镜，×100）

各组AECⅡ细胞中C/EBPα、SP-A、SP-B、SP-C及SP-DmRNA表达Figure2.2ExpressionsofC/EBPα,SP-A,SP-B,SP-CandSP-DmRNAinAECⅡs*P<0.05vs同时间点空气组

图 2.3 Western blot 法检测各组 AECⅡ中 C/EBPα 和 SP-A、SP-B、SP-C 及 SP-D 蛋白表达Figure 2.3 The expression of C/EBPα, SP-A, SP-B, SP-C and SP-D protein levels in AECⅡsA: Western blot 法检测 AECⅡ中 C/EBPα 和 SP-A、SP-B、SP-C 及 SP-D 蛋白表达各泳道分别为(1：空气组 24 h；2：高氧组 24 h ；3：空气组 48 h；4：高氧组 48 h；5：空气组 72 h；6：高氧组 72 h）B-F: AEC Ⅱ中 C/EBPα 和 SP-A、SP-B、SP-C 及 SP-D 蛋白的半定量分析*P<0.01 vs 同时间点空气组。2.4.4 高氧暴露对 AECⅡ细胞增殖的影响采用 CCK-8 法检测 AECⅡ细胞增殖。研究发现随着培养时间的延长，空气组 AECⅡ增殖不断增加；而高氧组 AECⅡ增殖呈先递增后递减的趋势，在培养24 h 与同时间点空气组相比较，高氧组 AECⅡ增殖略低于空气组，在 72 h 明显低于同一时间的空气组，差异具有统计学意义（P <0.01）。而在 48 h时细胞增殖

【参考文献】：
期刊论文
[1]转录因子CCAAT增强子结合蛋白α的研究进展[J]. 应霁,王伟铭.  上海交通大学学报(医学版). 2015(02)
[2]肺表面活性物质蛋白C研究新认识[J]. 韩笑,尹晓娟.  中国儿童保健杂志. 2015(01)
[3]早产儿支气管肺发育不良的定义演变及其诊断[J]. 常立文.  中国实用儿科杂志. 2014(01)

硕士论文
[1]CCAAT增强子结合蛋白α在高氧肺损伤新生大鼠肺组织中的动态表达及其意义[D]. 杜志云.苏州大学 2010



本文编号：3419237