牛乳蛋白过敏儿童肠道菌群结构及短链脂肪酸分析
发布时间：2021-10-10 22:11
牛乳蛋白过敏（cow milk protein allergy,CMPA）是婴儿及儿童中常见的食物过敏之一,一般情况下儿童的过敏症状会在5岁左右逐渐减轻,直至消失,但仍有10%左右的过敏儿童不能自动康复,会持续过敏症状且日益严重。肠道菌群作为人体最大的“微生物器官”与健康息息相关,正常情况下肠道菌群处于动态平衡的状态。当这种平衡被破坏,可能引起过敏疾病等疾病的发生。短链脂肪酸（short-chain fatty acids,SCFA）作为肠道中微生物代谢的最终产物,参与机体免疫调节和发育。目前研究多集中于发生牛乳蛋白过敏的婴儿的肠道菌群结构及粪便中SCFAs的变化,针对5-10岁的CMPA儿童肠道菌群及SCFAs的研究还很少,因此,本研究选择5-8岁CMPA儿童的肠道菌群和粪便中SCFAs及乳酸的变化进行探究。本研究选取了2016年6月至2016年12月经哈尔滨儿童医院确诊为牛乳蛋白过敏的5-8岁儿童共6例,并在同一时间段选取了8例哈尔滨地区相同年龄段的健康儿童作为对照。采集所有儿童的粪便样品用于试验。试验主要分为两部分,第一部分为通过16S rDNA扩增子测序对所有的粪便样品进行分析...
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
儿童粪便中细菌DNA的PCR扩增产物质量分析
图 3-2 OTU 获得情况分析Figure 3-2 Analysis of OTU accepted3.3 样品复杂度分析3.3.1 Alpha 多样性指数分析通常情况下，同一个种的序列指的是在 97%以上的序列都一致的条件下，可聚类成一个OTU 的序列[90]。通过使用 Qiime 软件（Version 1.7.0）对不同样品在 97%一致性阈值下的 alpha多样性分析指数（Chao 1 指数、Shannon 指数、Simpson 指数和 ACE 指数）进行统计[91]，进而可以分析两组儿童的肠道菌群的丰度及多样性的差异。表 3-1 为两组样品的 alpha 多样性分析指数的统计结果，两组样品的 4 个指数在统计学上都没有显著的的差异（P ＞ 0.05），这表明两组儿童的肠道菌群在丰度和多样性上都没有明显的差异。一般在婴幼儿时期，不同个体的肠道菌群会有显著性的差异[92]。当儿童年龄达到 3 岁左右，其肠道菌群基本达到了一个动态的平衡，结构类似于成人的肠道菌群结构[93]。由于本研究中的儿童年龄在 5-8 岁，且都生活在一个环境中，所以不同个体的肠道菌群的结构没有显著性的差异也是合理的。表 3-1 Alpha 多样性指数分析
3.2 物种多样性曲线分析3.2.1 稀释曲线分析稀释曲线是指在所有的样品中通过随机抽取获得部分数据，进而分析它们所代表的Us 数目[94]。由稀释曲线可看出数据是否安排合理且能间接地看出样品中物种的丰度情 3-3 为 14 个儿童样品的稀释曲线图，health 1-health 8 表示健康组的 8 个样品，cmpa 1- c示过敏组中的 6 个样品。由图可看出，cmpa 6、health 4、health 5、health 6、health 7alth 8 这六个样本随着测序条数的增多，曲线基本平行，这表明所用的数据已经足够，表验取样合理。而其他的八个样本随着测序条数的增多还没有进入平台期，这也意味着当数量逐渐变大时，新的物种也会逐渐增多。
【参考文献】：
期刊论文
[1]肠道微生物与过敏性疾病关系研究进展[J]. 李海亮,毛绍名,邓颖,尹业师. 中国微生态学杂志. 2017(11)
[2]乳酸菌与健康[J]. 温晓庆,王奇. 农业开发与装备. 2017(09)
[3]肠道菌群功能与影响因素研究进展[J]. 郭亮,陈国薇,谢曼曼,丁承超,刘武康,董庆利,刘箐. 微生物学杂志. 2017(04)
[4]过敏性紫癜患儿粪便细菌代谢相关产物短链脂肪酸水平测定及其意义[J]. 胡红卫,潘媛,赵波,刘梅,熊晶晶,廖亚彬,吉晓菲,张婷婷,张丽芝,黄永坤. 中国实用儿科杂志. 2017(07)
[5]高通量测序分析老年血液透析患者肠道菌群的改变[J]. 胡建广,钟小仕,闫静,覃丹平,郑媛媛,谭荣韶,刘岩. 中国中西医结合肾病杂志. 2017(02)
[6]长双歧杆菌BBMN68诱导的树突状细胞对小鼠牛乳β-乳球蛋白过敏的缓解作用[J]. 杨景,罗绪刚,任发政. 现代食品科技. 2016(07)
[7]牛奶蛋白过敏诊断方法的研究现状[J]. 黄秋香,金玉. 检验医学与临床. 2016(08)
[8]壮族人群肠道菌群多样性分析[J]. 郑艺,张家超,乔健敏,霍东雪,黄卫强,侯强川,张和平. 中国食品学报. 2016(01)
[9]荧光定量RT-PCR检测PRRSV方法的建立及初步应用[J]. 周一媚,劳秀杰,黄巧莲,徐露凝,郑悦,叶笑,王晓杜,邵春艳,杨永春,宋厚辉. 畜牧与兽医. 2016(01)
[10]短链脂肪酸的作用及其调控机理[J]. 刘虎,任傲,方热军. 中国猪业. 2015(11)
博士论文
[1]16S rRNA高通量测序分析条锈菌侵染对小麦根部菌群影响及新种放线菌鉴定[D]. 赵军伟.东北农业大学 2016
硕士论文
[1]新生儿肠道菌群分布特征及其影响因素[D]. 胡润芳.上海交通大学 2015
[2]B-LACTOGLOBULIN致敏性降低的免疫学机制[D]. 段翠翠.东北农业大学 2010
本文编号：3429242
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
儿童粪便中细菌DNA的PCR扩增产物质量分析
图 3-2 OTU 获得情况分析Figure 3-2 Analysis of OTU accepted3.3 样品复杂度分析3.3.1 Alpha 多样性指数分析通常情况下，同一个种的序列指的是在 97%以上的序列都一致的条件下，可聚类成一个OTU 的序列[90]。通过使用 Qiime 软件（Version 1.7.0）对不同样品在 97%一致性阈值下的 alpha多样性分析指数（Chao 1 指数、Shannon 指数、Simpson 指数和 ACE 指数）进行统计[91]，进而可以分析两组儿童的肠道菌群的丰度及多样性的差异。表 3-1 为两组样品的 alpha 多样性分析指数的统计结果，两组样品的 4 个指数在统计学上都没有显著的的差异（P ＞ 0.05），这表明两组儿童的肠道菌群在丰度和多样性上都没有明显的差异。一般在婴幼儿时期，不同个体的肠道菌群会有显著性的差异[92]。当儿童年龄达到 3 岁左右，其肠道菌群基本达到了一个动态的平衡，结构类似于成人的肠道菌群结构[93]。由于本研究中的儿童年龄在 5-8 岁，且都生活在一个环境中，所以不同个体的肠道菌群的结构没有显著性的差异也是合理的。表 3-1 Alpha 多样性指数分析
3.2 物种多样性曲线分析3.2.1 稀释曲线分析稀释曲线是指在所有的样品中通过随机抽取获得部分数据，进而分析它们所代表的Us 数目[94]。由稀释曲线可看出数据是否安排合理且能间接地看出样品中物种的丰度情 3-3 为 14 个儿童样品的稀释曲线图，health 1-health 8 表示健康组的 8 个样品，cmpa 1- c示过敏组中的 6 个样品。由图可看出，cmpa 6、health 4、health 5、health 6、health 7alth 8 这六个样本随着测序条数的增多，曲线基本平行，这表明所用的数据已经足够，表验取样合理。而其他的八个样本随着测序条数的增多还没有进入平台期，这也意味着当数量逐渐变大时，新的物种也会逐渐增多。
【参考文献】：
期刊论文
[1]肠道微生物与过敏性疾病关系研究进展[J]. 李海亮,毛绍名,邓颖,尹业师. 中国微生态学杂志. 2017(11)
[2]乳酸菌与健康[J]. 温晓庆,王奇. 农业开发与装备. 2017(09)
[3]肠道菌群功能与影响因素研究进展[J]. 郭亮,陈国薇,谢曼曼,丁承超,刘武康,董庆利,刘箐. 微生物学杂志. 2017(04)
[4]过敏性紫癜患儿粪便细菌代谢相关产物短链脂肪酸水平测定及其意义[J]. 胡红卫,潘媛,赵波,刘梅,熊晶晶,廖亚彬,吉晓菲,张婷婷,张丽芝,黄永坤. 中国实用儿科杂志. 2017(07)
[5]高通量测序分析老年血液透析患者肠道菌群的改变[J]. 胡建广,钟小仕,闫静,覃丹平,郑媛媛,谭荣韶,刘岩. 中国中西医结合肾病杂志. 2017(02)
[6]长双歧杆菌BBMN68诱导的树突状细胞对小鼠牛乳β-乳球蛋白过敏的缓解作用[J]. 杨景,罗绪刚,任发政. 现代食品科技. 2016(07)
[7]牛奶蛋白过敏诊断方法的研究现状[J]. 黄秋香,金玉. 检验医学与临床. 2016(08)
[8]壮族人群肠道菌群多样性分析[J]. 郑艺,张家超,乔健敏,霍东雪,黄卫强,侯强川,张和平. 中国食品学报. 2016(01)
[9]荧光定量RT-PCR检测PRRSV方法的建立及初步应用[J]. 周一媚,劳秀杰,黄巧莲,徐露凝,郑悦,叶笑,王晓杜,邵春艳,杨永春,宋厚辉. 畜牧与兽医. 2016(01)
[10]短链脂肪酸的作用及其调控机理[J]. 刘虎,任傲,方热军. 中国猪业. 2015(11)
博士论文
[1]16S rRNA高通量测序分析条锈菌侵染对小麦根部菌群影响及新种放线菌鉴定[D]. 赵军伟.东北农业大学 2016
硕士论文
[1]新生儿肠道菌群分布特征及其影响因素[D]. 胡润芳.上海交通大学 2015
[2]B-LACTOGLOBULIN致敏性降低的免疫学机制[D]. 段翠翠.东北农业大学 2010
本文编号：3429242
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