隐睾生精细胞ALR表达及其作用机制研究
发布时间：2021-10-27 04:07
背景:隐睾（Cryptorchidism）是小儿时期最常见的泌尿生殖畸形,在足月男婴中的发生率高达4%;由于隐睾睾丸位置异常,睾丸生精功能受到严重影响。隐睾的曲细精管出现退行性变,曲细精管内精子数量减少,畸形精子比率上升,甚至无正常精子。尽管存在多种学说,至今导致隐睾生精细胞变化的细胞和分子生物学机制仍不清楚。肝再生增强因子（augmenter of liver regeneration ,ALR）的发现和研究为研究生精细胞的发育和探讨隐睾生精细胞病变机制开辟了新的途径。ALR在睾丸各级生精细胞均有表达,尤其精原细胞和早期初级精母细胞表达最强,表达强度与精子发生存在一致的周期性。早期研究证实,胎儿期精原干细胞转化为Ad型精原细胞及进一步分化为初级精母细胞是精子发生的关键,而隐睾精子发生过程中,这两个重要环节均存在明显功能障碍。精子发生是一个复杂的细胞分化过程,该过程与线粒体的形态和功能改变密切相关。ALR定位于线粒体膜间隙,具有巯基氧化酶活性,参与线粒体形态改变,胞质铁硫簇（Fe/S）蛋白合成及细胞外基质形成,并且对于细胞铁的动态平衡至关重要,因此,定位于线粒体的ALR,可能是精子发生...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
60日龄各组睾丸重量比较
图 1 30、60 日龄各组睾丸重量比较 图 2 30、60 日龄各组睾丸体积比较Fig 1 Testis weights of rats at PND30 and PND60 Fig 2 Testis volume of rats at PND30 and PND602. 光学显微镜观察光镜下观察发现，PND30 正常对照组和手术对照组睾丸组织形态表现一致，显示曲细精管上皮所包含的支持细胞和处于不同发育阶段的各层生精细胞，层次清楚结构正常，管腔内可见精子细胞和少量精子（图片 3）；PND60正常对照组和手术对照组睾丸组织曲细精管管腔进一步增大，且管腔内可见大量精子（图片 5）。各对照组睾丸间质分布于曲细精管之间，呈小三角形的疏松结缔组织，内含间质细胞、巨噬细胞等。PND30 和 PND60 隐睾组均出现明显的病理改变：①睾丸生精细胞层次减少、稀疏，PND60 隐睾组较 PND30 隐睾组更严重，部分曲细精管细胞减少至 1～2 层（图片 4，6）；②睾丸生精细
图 3 30、60 日龄各组睾丸平均曲细精管直径比较 图 4 30、60 日龄各组睾丸活检评分比较Fig 3 Mean seminiferous tubule diameter of rats atPND30 and PND60Fig 4 Testicular biopsy score of rats at PND30 andPND60二． 各组睾丸细胞分类计数应用碘化丙啶（PI）和 10-N 壬基吖啶橙（NAO）分别对各组睾丸组织细胞色体和线粒体内膜心磷脂进行荧光染色，经流式细胞仪检测根据 PI 红色荧光强将细胞分为单倍体、双倍体和四倍体，在此基础上，根据 NAO 绿色荧光和 PI色荧光的比例区分同倍体细胞中不同代谢状态的细胞。结果显示：睾丸组织中胞分为六群，单倍体、双倍体和四倍体分别含有高 NAO 荧光强度群和低 NAO光强度群（见图 5、6，表 5）。如表 6、图 7 所示 PND30 隐睾组与同年龄段正常对照组和手术对照组相比：
【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠肝再生增强因子在酵母菌中的表达及生物活性研究[J]. 余慧峰,刘杞. 中华肝脏病杂志. 2003(07)
[2]肝细胞生成素及肝部分切除诱导肝再生基因PC3的表达[J]. 王阁,张晓荣,胡辂,王军,冷恩仁,房殿春,杨晓明,张咏,贺福初. 中华肝脏病杂志. 2002(04)
[3]重组肝再生增强因子对大鼠肝纤维化的保护作用[J]. 邱德凯,沈敏,熊伍军,陈颖. 肝脏. 2002(01)
[4]肝再生增强因子的免疫组化定位及其在肝炎病患者血清水平观察[J]. 杨联萍,邹清雁,曾平鲁,易学瑞,李茹冰,郑茉丽,孔祥平. 中国病理生理杂志. 2002(01)
[5]大鼠肝再生增强因子mRNA在损伤肝组织的表达[J]. 黄志刚,刘殿武,杨维青,吴作栋,刘树贤. 中华肝脏病杂志. 2001(S1)
[6]重组人肝再生增强因子可逆转免疫损伤性肝纤维化[J]. 王爱民,杜双存,杨晓明,郭瑞峰,王清明,贺福初. 中国病理生理杂志. 2000(04)
[7]重组人肝细胞生成素的理化性质研究[J]. 王清明,陈吉中,谭英才,范国才,江海龙,陈惠鹏,贺福初. 军事医学科学院院刊. 2000(01)
[8]人肝再生增强因子阅读框的cDNA克隆和序列分析[J]. 刘杞,王志毅,罗娅,黄爱龙,张定凤. 中华肝脏病杂志. 1999(03)
[9]不同肝病患者血清中肝再生增强因子水平的检测及意义[J]. 周平,杨晓明,李奇芬,何浩,贺福初,张木森. 华人消化杂志. 1998(09)
[10]肝部分切除后肝再生增强因子信使核糖核酸（mRNA）表达增强[J]. 杨晓明,谢玲,吴祖泽,贺福初. 生理学报. 1997(05)
本文编号：3460840
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
60日龄各组睾丸重量比较
图 1 30、60 日龄各组睾丸重量比较 图 2 30、60 日龄各组睾丸体积比较Fig 1 Testis weights of rats at PND30 and PND60 Fig 2 Testis volume of rats at PND30 and PND602. 光学显微镜观察光镜下观察发现，PND30 正常对照组和手术对照组睾丸组织形态表现一致，显示曲细精管上皮所包含的支持细胞和处于不同发育阶段的各层生精细胞，层次清楚结构正常，管腔内可见精子细胞和少量精子（图片 3）；PND60正常对照组和手术对照组睾丸组织曲细精管管腔进一步增大，且管腔内可见大量精子（图片 5）。各对照组睾丸间质分布于曲细精管之间，呈小三角形的疏松结缔组织，内含间质细胞、巨噬细胞等。PND30 和 PND60 隐睾组均出现明显的病理改变：①睾丸生精细胞层次减少、稀疏，PND60 隐睾组较 PND30 隐睾组更严重，部分曲细精管细胞减少至 1～2 层（图片 4，6）；②睾丸生精细
图 3 30、60 日龄各组睾丸平均曲细精管直径比较 图 4 30、60 日龄各组睾丸活检评分比较Fig 3 Mean seminiferous tubule diameter of rats atPND30 and PND60Fig 4 Testicular biopsy score of rats at PND30 andPND60二． 各组睾丸细胞分类计数应用碘化丙啶（PI）和 10-N 壬基吖啶橙（NAO）分别对各组睾丸组织细胞色体和线粒体内膜心磷脂进行荧光染色，经流式细胞仪检测根据 PI 红色荧光强将细胞分为单倍体、双倍体和四倍体，在此基础上，根据 NAO 绿色荧光和 PI色荧光的比例区分同倍体细胞中不同代谢状态的细胞。结果显示：睾丸组织中胞分为六群，单倍体、双倍体和四倍体分别含有高 NAO 荧光强度群和低 NAO光强度群（见图 5、6，表 5）。如表 6、图 7 所示 PND30 隐睾组与同年龄段正常对照组和手术对照组相比：
【参考文献】：
期刊论文
[1]大鼠肝再生增强因子在酵母菌中的表达及生物活性研究[J]. 余慧峰,刘杞. 中华肝脏病杂志. 2003(07)
[2]肝细胞生成素及肝部分切除诱导肝再生基因PC3的表达[J]. 王阁,张晓荣,胡辂,王军,冷恩仁,房殿春,杨晓明,张咏,贺福初. 中华肝脏病杂志. 2002(04)
[3]重组肝再生增强因子对大鼠肝纤维化的保护作用[J]. 邱德凯,沈敏,熊伍军,陈颖. 肝脏. 2002(01)
[4]肝再生增强因子的免疫组化定位及其在肝炎病患者血清水平观察[J]. 杨联萍,邹清雁,曾平鲁,易学瑞,李茹冰,郑茉丽,孔祥平. 中国病理生理杂志. 2002(01)
[5]大鼠肝再生增强因子mRNA在损伤肝组织的表达[J]. 黄志刚,刘殿武,杨维青,吴作栋,刘树贤. 中华肝脏病杂志. 2001(S1)
[6]重组人肝再生增强因子可逆转免疫损伤性肝纤维化[J]. 王爱民,杜双存,杨晓明,郭瑞峰,王清明,贺福初. 中国病理生理杂志. 2000(04)
[7]重组人肝细胞生成素的理化性质研究[J]. 王清明,陈吉中,谭英才,范国才,江海龙,陈惠鹏,贺福初. 军事医学科学院院刊. 2000(01)
[8]人肝再生增强因子阅读框的cDNA克隆和序列分析[J]. 刘杞,王志毅,罗娅,黄爱龙,张定凤. 中华肝脏病杂志. 1999(03)
[9]不同肝病患者血清中肝再生增强因子水平的检测及意义[J]. 周平,杨晓明,李奇芬,何浩,贺福初,张木森. 华人消化杂志. 1998(09)
[10]肝部分切除后肝再生增强因子信使核糖核酸（mRNA）表达增强[J]. 杨晓明,谢玲,吴祖泽,贺福初. 生理学报. 1997(05)
本文编号：3460840
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