北京地区呼吸道感染住院儿童中人鼻病毒的流行状况和基因特征分析

发布时间：2021-11-27 11:58

　　20世纪80年代后期鼻病毒学研究取得了重大进展,病毒生命周期中的几个重要事件基本清晰,为进一步研究鼻病毒的生物特性及致病机制奠定了基础。人鼻病毒是急、慢性呼吸道感染疾病中最常分离到的病原体,也是人类普通感冒的主要致病因素。人鼻病毒在全球范围内广泛流行,对于婴幼儿和患有呼吸道基础疾病的易感人群,鼻病毒感染后可能会出现较为严重的后遗症,严重影响患者的生活质量,给家庭和社会带来沉重的经济负担,因此对鼻病毒的研究越来越受到人们的重视。人鼻病毒流行病学研究是监测人鼻病毒的一个重要手段,基因特征分析有助于人鼻病毒的检测和流行病调查,以分析人鼻病毒的来源和传播途径。目的研究目前我国北京地区呼吸道感染婴幼儿人鼻病毒流行状况和基因特征。分析鼻病毒在中国北京地区的流行情况,以了解流行现状,探讨流行规律和基因特征,发现人鼻病毒发病相关的危险因素,为我国急性病毒性呼吸道感染的预防和控制积累并丰富病原学和流行病学基础资料,同时为鼻病毒的预防和治疗提供有效地科学依据。方法从2008年4月到2010年9月,北京儿童医院收集427位急性呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物标本,用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time ... 

【文章来源】：泰山医学院山东省

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Real-timeRT-PCR扩增条件6）对照设置

图 2 RT-PCR 扩增条件6 PCR 产物的检测和鉴定6.1 制备 1.7%TAE 琼脂糖凝胶1）取 100ml 电泳缓冲液（1×TAE）加入到干净的三角瓶中，再加入 1.7g 琼粉末，轻轻摇动三角瓶，使琼脂糖微粒呈均匀混浊状态；2）微波炉高温加热 2~3 次，每次 2min 左右，使琼脂糖熔化；3）熔化的琼脂糖自然冷却到 60℃左右，倒入已准备好的胶床中，凝胶厚度约.3~0.5cm；4）室温下静置，凝胶固化；6.2 电泳分析1）将已经聚合的 1.7%的琼脂糖凝胶（带有胶床）放在电泳装置上；2）向电泳糟中加入电泳缓冲液（1×TAE），缓冲液的量以超过凝胶表面 1~2m宜；

图 3 标记反应条件 标记反应产物纯化）称量 2.7g 葡聚糖凝胶 Sephadex G-50 粉末，放在 1 支干净的 50ml 离心中加入去离子水至 50ml。充分混匀后，室温静置 1h，使之充分水化；）向每一支 CENTRI-CEP 柱中加入混匀的葡聚糖凝胶 Sephadex G-50 混，静置 10 分钟；）加压，使过多的水分从 CENTRI-CEP 柱的底部流出；）将 CENTRI-CEP 柱放在 2ml 收集管上，3000rpm，室温下离心 2min；）将 CENTRI-CEP 柱放在 1.5ml 干净的离心管上，向凝胶的斜面中央加20μl；）3000rpm，室温下再次离心 2min；）收集离心管底的纯化后的标记产物。0 序列测定

【参考文献】：
期刊论文
[1]鼻病毒的研究现状[J]. 李军,朱启镕.  中华儿科杂志. 2005(01)



本文编号：3522238