HAUS5在小儿神经母细胞瘤中的表达及意义
发布时间：2022-01-06 12:02
背景:神经母细胞瘤来源于交感神经系统,是小儿最常见的颅外实体恶性肿瘤,其发病率及死亡率均较高,对患儿及其家庭影响很大。高度异质性是神经母细胞瘤主要特点之一,临床上根据风险因素指标的不同将神经母细胞瘤划分为低危组、中危组和高危组。低、中危组患儿预后较好,但对于高危组患儿而言,即使综合多种治疗方案,其预后仍不理想,目前针对神经母细胞瘤的治疗仍是临床研究的难点。微管蛋白是中心体和纺锤体的基本结构单位,在细胞有丝分裂过程中发挥重要作用。研究表明微管蛋白在神经母细胞瘤中特异表达,且可作为该肿瘤的特异治疗靶点。HAUS5是人类Augmin复合物的亚基之一,主要参与纺锤体组装,维持中心体完整以及胞质分裂等过程。HAUS5表达异常可诱导中心体的微管片段化以及中心体体积的增大,导致染色体错位以及双极纺锤体功能缺陷等,而双极纺锤体的异常又可诱发肿瘤形成。据国外研究报道,敲减HAUS5基因可抑制胶质母细胞瘤干细胞样细胞增殖以及肿瘤形成能力。综上,HAUS5有可能对神经母细胞瘤的发生、发展起作用,然而目前国内外对HAUS5在神经母细胞瘤组织中表达状况,及其在神经母细胞瘤中的作用影响等方面研究尚不足。目的:本研...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１?ＨＡＵＳ５在ＮＢ肿瘤组织中免疫组化染色结果（２０〇ｘ），图Ａ为高表达，??染色阳性率为８０％，总评分为８分；图Ｂ为低表达，染色阳性申．为１０％，总评??
?＾???２?ＲＴ－ｑＰＣＲ检测不同ＮＢ细胞中ＨＡＵＳ５表达结果??以ＧＡＰＤＨ作为内参基因，以ＡＣｔ值反应目的基因表达丰度高低（ＡＣｔ＝目??的基因Ｃｔ值－内参基因Ｃｔ值）。测得ＡＣｔ值￡１２表示该细胞中基因表达丰度高；??１２＜ＡＣｔ值＜１６表示基因表达丰度为中；ＡＱ值２１６表示基因表达丰度低。本实验??ＲＴ－ｑＰＣＲ检测ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、ＳＫ－Ｎ－ＡＳ两组细胞中ＨＡＵＳ５基因表达结果如下（表??２．１）?〇??表?２．１?ＲＴ－ｑＰＣＲ?检测?ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、ＳＫ－Ｎ－ＡＳ?两组细胞?ＨＡＵＳ５?基因?Ａ?Ｃｔ?值??细胞名称?ＧＡＰＤＨＣｔ值?ＨＡＵＳ５Ｃｔ值?ＡＣｔ?ＡＣｔ均值??ＳＨ－ＳＹ５Ｙ?１４．４６?２４．４８?１０．０２?１０．０５??１４．４９?２４．４９?１０??１４．４３?２４．５５?１０．１２??ＳＫ－Ｎ－ＡＳ?１２．９９?２２．５３?９．５４?９．５７??１２．８５?２２．４８?９．６３???１１９?２２．４３?＾５３???以ＧＡｒｏＨ为内参的ＲＴ－ｑＰＣＲ检测结果可以看出，ＨＡＵＳ５基因在ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、??ＳＫ－Ｎ－ＡＳ两组细胞中的表达丰度均高（图２．１）。??１２．０??ｆ８．°．?■?■??０．０??■■■■?＾???ＳＨ－ＳＹ５Ｙ?ＳＫ－Ｎ－ＡＳ??图２．１?ＲＴ－ｑＰＣＲ技术检测ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、ＳＫ－Ｎ－ＡＳ两种ＮＢ细胞中ＨＡＵＳ５基因??表达丰度??２２??
Ｓ细胞中ＨＡＵＳ５??基Ｗ在ｍＲＮＡ水平的农达量较ｓｈＣｔｒｌ组明显受到抑制［相对衣达倍数??（０．３１８±０．０３８）?ｖｓ?（?１．０２０±０．２５３），尸＝０．０３８］，差异有统计学意义（如图?３．１）。??ＲＴ－ｑＰＣ’Ｒ检测结汜敲减效率达到６８．２％，说明ｓｈＲＮＡ慢病毒感染ＮＢ细胞成功，??ＨＡＵＳ５基因敲减成功。??１?４００??Ｉ?Ｉ??？?１．２００??３?１?ＯＯＯ??ｚ?＆?｜Ｈ｜｜｜｜??＾?＾?０?８００??ｓｈＣｔｒｌ?ｓｈＨＡＵＳＳ??图３＿?１敲减ＨＡＵＳ５基因后ｓｈＨＡＵＳ５组和ｓｈＣｔｒｌ组细胞中ｍＲＮＡ水平表达??中．度比较，＊表不？厂＜?（）．〇５??４?Ｃｅ?Ｉ?ｉ?ｇｏ细胞计数检测结果??Ｃｅｌｉｇｏ细胞成像分析仪器４读取被病海感染后带荧光的细胞并进行细胞??计数，实验中所绘的细胞增殖曲线图和增殖倍数的生长曲线图均可反应细胞的??生！？＜：增殖状态。本实验中检测结果为，在第４天和第５天ｓｌｉ丨ＩＡＵＳ５组较ｓｈＣｔｒｌ??组的细胞数量比较分别为［ｄａｙ４?（２２４１?士?１８８）?ｖｓ?（４４７２?±３９７）?，?Ｚ５＜０．０５〕，［ｄａｙ５??（２４２７±１３１）?ｖｓ?（５４６７?±３９５），尸〈０．?Ｏｆ；］。在第?４?大和第［；天?ｓｈＨＡＵＳ５?组较??ｓｈＣｔｄ组细胞数量的变化倍数比较分别为［ｄａｙ４?（１．１４±０．０２）?ｖｓ?（１．６８±０．０６），??Ｐ＜０．０５］，?［ｄａｙ５?（?１．２４±０＿０３）?ｖｓ?（２．０６±０．０３），尸?＜０．０５］。结果提示?ｓｈＨＡＵＳ５??２３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]分子靶向肿瘤治疗研究现状[J]. 宋文静,冀慧雁,金若云,王宁. 中国药物与临床. 2018(11)
[2]神经母细胞瘤分子治疗研究进展[J]. 陈吉,黄磊,易军. 中华小儿外科杂志. 2018 (05)
[3]DKK-1在神经母细胞瘤中的表达及其意义[J]. 张蛟,王家祥,刘秋亮,高敬尧,汪琪. 中华小儿外科杂志. 2016 (09)
[4]Ras-MAPK通路在肝癌发病机制中的作用[J]. 李蕊,宋威江,张少鹏,姚树坤. 中日友好医院学报. 2016(01)
本文编号：3572415
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１?ＨＡＵＳ５在ＮＢ肿瘤组织中免疫组化染色结果（２０〇ｘ），图Ａ为高表达，??染色阳性率为８０％，总评分为８分；图Ｂ为低表达，染色阳性申．为１０％，总评??
?＾???２?ＲＴ－ｑＰＣＲ检测不同ＮＢ细胞中ＨＡＵＳ５表达结果??以ＧＡＰＤＨ作为内参基因，以ＡＣｔ值反应目的基因表达丰度高低（ＡＣｔ＝目??的基因Ｃｔ值－内参基因Ｃｔ值）。测得ＡＣｔ值￡１２表示该细胞中基因表达丰度高；??１２＜ＡＣｔ值＜１６表示基因表达丰度为中；ＡＱ值２１６表示基因表达丰度低。本实验??ＲＴ－ｑＰＣＲ检测ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、ＳＫ－Ｎ－ＡＳ两组细胞中ＨＡＵＳ５基因表达结果如下（表??２．１）?〇??表?２．１?ＲＴ－ｑＰＣＲ?检测?ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、ＳＫ－Ｎ－ＡＳ?两组细胞?ＨＡＵＳ５?基因?Ａ?Ｃｔ?值??细胞名称?ＧＡＰＤＨＣｔ值?ＨＡＵＳ５Ｃｔ值?ＡＣｔ?ＡＣｔ均值??ＳＨ－ＳＹ５Ｙ?１４．４６?２４．４８?１０．０２?１０．０５??１４．４９?２４．４９?１０??１４．４３?２４．５５?１０．１２??ＳＫ－Ｎ－ＡＳ?１２．９９?２２．５３?９．５４?９．５７??１２．８５?２２．４８?９．６３???１１９?２２．４３?＾５３???以ＧＡｒｏＨ为内参的ＲＴ－ｑＰＣＲ检测结果可以看出，ＨＡＵＳ５基因在ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、??ＳＫ－Ｎ－ＡＳ两组细胞中的表达丰度均高（图２．１）。??１２．０??ｆ８．°．?■?■??０．０??■■■■?＾???ＳＨ－ＳＹ５Ｙ?ＳＫ－Ｎ－ＡＳ??图２．１?ＲＴ－ｑＰＣＲ技术检测ＳＨ－ＳＹ５Ｙ、ＳＫ－Ｎ－ＡＳ两种ＮＢ细胞中ＨＡＵＳ５基因??表达丰度??２２??
Ｓ细胞中ＨＡＵＳ５??基Ｗ在ｍＲＮＡ水平的农达量较ｓｈＣｔｒｌ组明显受到抑制［相对衣达倍数??（０．３１８±０．０３８）?ｖｓ?（?１．０２０±０．２５３），尸＝０．０３８］，差异有统计学意义（如图?３．１）。??ＲＴ－ｑＰＣ’Ｒ检测结汜敲减效率达到６８．２％，说明ｓｈＲＮＡ慢病毒感染ＮＢ细胞成功，??ＨＡＵＳ５基因敲减成功。??１?４００??Ｉ?Ｉ??？?１．２００??３?１?ＯＯＯ??ｚ?＆?｜Ｈ｜｜｜｜??＾?＾?０?８００??ｓｈＣｔｒｌ?ｓｈＨＡＵＳＳ??图３＿?１敲减ＨＡＵＳ５基因后ｓｈＨＡＵＳ５组和ｓｈＣｔｒｌ组细胞中ｍＲＮＡ水平表达??中．度比较，＊表不？厂＜?（）．〇５??４?Ｃｅ?Ｉ?ｉ?ｇｏ细胞计数检测结果??Ｃｅｌｉｇｏ细胞成像分析仪器４读取被病海感染后带荧光的细胞并进行细胞??计数，实验中所绘的细胞增殖曲线图和增殖倍数的生长曲线图均可反应细胞的??生！？＜：增殖状态。本实验中检测结果为，在第４天和第５天ｓｌｉ丨ＩＡＵＳ５组较ｓｈＣｔｒｌ??组的细胞数量比较分别为［ｄａｙ４?（２２４１?士?１８８）?ｖｓ?（４４７２?±３９７）?，?Ｚ５＜０．０５〕，［ｄａｙ５??（２４２７±１３１）?ｖｓ?（５４６７?±３９５），尸〈０．?Ｏｆ；］。在第?４?大和第［；天?ｓｈＨＡＵＳ５?组较??ｓｈＣｔｄ组细胞数量的变化倍数比较分别为［ｄａｙ４?（１．１４±０．０２）?ｖｓ?（１．６８±０．０６），??Ｐ＜０．０５］，?［ｄａｙ５?（?１．２４±０＿０３）?ｖｓ?（２．０６±０．０３），尸?＜０．０５］。结果提示?ｓｈＨＡＵＳ５??２３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]分子靶向肿瘤治疗研究现状[J]. 宋文静,冀慧雁,金若云,王宁. 中国药物与临床. 2018(11)
[2]神经母细胞瘤分子治疗研究进展[J]. 陈吉,黄磊,易军. 中华小儿外科杂志. 2018 (05)
[3]DKK-1在神经母细胞瘤中的表达及其意义[J]. 张蛟,王家祥,刘秋亮,高敬尧,汪琪. 中华小儿外科杂志. 2016 (09)
[4]Ras-MAPK通路在肝癌发病机制中的作用[J]. 李蕊,宋威江,张少鹏,姚树坤. 中日友好医院学报. 2016(01)
本文编号：3572415
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