小儿急性肠梗阻肠坏死A2B腺苷受体的表达及其临床意义

发布时间：2017-05-11 18:08

  本文关键词：小儿急性肠梗阻肠坏死A2B腺苷受体的表达及其临床意义，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:观察并探讨小儿急性肠梗阻肠坏死时肠黏膜上皮细胞A2B腺苷受体(A2B Adenosien Receptor,A2BAR)的表达变化及其可能的机制和临床意义。方法:收集2014年9月-2015年10月以急性肠梗阻为首发症状急诊入院的患儿42例,入院后急诊行手术探查,术中见肠管颜色发黑、蠕动消失考虑肠坏死,行肠切除肠吻合术,术后病理均证实肠坏死,作为病变组;选择20例消化道畸形患儿(如梅克尔憩室、肠重复畸形等),术前无发热、感染及上呼吸道感染等其他原发病或合并症,择期行肠切除肠吻合术,作为对照组。应用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)技术检测并观察肠黏膜上皮细胞A2BAR及紧密连接蛋白Occludin的表达情况,通过美国Aperio公司Scanscope数字病理扫描系统对图像进行半定量分析检测,检测二者阳性反应产物的平均灰度值。应用酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测两组术前及术后7天的血清肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)的浓度水平。通过蛋白印迹(Western Blot,WB)技术测定两组肠黏膜上皮细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 Mitogen Activated Protein Kinase,p38MAPK)和磷酸化p38MAPK(phosphorylation of p38 Mitogen Activated Protein Kinase,p-p38MAPK)表达量。结果:1.病变组A2BAR染色强度强于对照组,阳性反应产物较多,广泛表达于肠黏膜上皮细胞顶端膜和基底膜上,对照组A2BAR表达极少,染色较浅,病变组平均灰度值明显低于对照组(P0.001);2.病变组紧密连接蛋白Occludin阳性反应产物较少,表现为染色较浅,表达水平下降,分布不均匀,连续性中断,对照组紧密连接蛋白Occludin表达较多,染色较深,连续性完整,病变组平均灰度值明显高于对照组(P0.001);3.病变组术前血清TNF-α浓度明显高于对照组(P0.001);病变组经手术治疗原发病、术后积极抗感染补液对症支持治疗后,术后7天血清TNF-α浓度较术前明显降低(P0.001);与对照组相比,病变组术后7天血清TNF-α浓度无明显差异(P0.05)。4.与对照组相比,病变组肠黏膜上皮细胞中p38MAPK的表达量无明显差异,而p-p38MAPK表达量明显增高。5.相关性分析:病变组术前血清TNF-α浓度与A2BAR平均灰度值呈负相关(r=-0.694,P0.01),A2BAR平均灰度值与紧密连接蛋白Occludin平均灰度值呈负相关(r=-0.581,P0.01)。结论:1.小儿急性肠梗阻肠坏死时,早期肠黏膜缺血缺氧引起TNF-α大量释放,持续缺氧及高浓度TNF-α可继发性诱导肠黏膜上皮细胞表面A2BAR表达量明显增多;2.持续性肠缺血时A2BAR被激活后启动并活化细胞内p38MAPK信号传导途径,可能是紧密连接蛋白Occludin表达下降引起细菌和内毒素移位的机制之一;3.A2BAR表达量增多可能参与了肠黏膜屏障功能损伤与破坏的病理生理过程,有望成为小儿急性肠梗阻潜在的治疗靶点。
【关键词】：急性肠梗阻 肠坏死 A2B腺苷受体 Occludin TNF-α
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R725.7
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 常用缩写词中英文对照表10-12
• 前言12-15
• 1 材料和方法15-21
• 1.1 临床资料研究对象15
• 1.2 实验试剂与实验仪器15-16
• 1.3 实验方法16-20
• 1.4 统计学分析20-21
• 2 实验结果21-28
• 2.1 免疫组织化学观察两组肠黏膜上皮细胞 A2BAR 的表达情况21-22
• 2.2 免疫组织化学观察两组肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白 Occludin 的表达情况22-23
• 2.3 蛋白印记测定两组肠黏膜上皮细胞 p38MAPK 和 p-p38MAPK 表达量23-24
• 2.4 两组 A2BAR 与 Occludin 平均灰度值、血清 TNF-α浓度的比较24-27
• 2.5 相关性分析27-28
• 3 讨论28-33
• 4 结论33-34
• 参考文献34-39
• 综述39-51
• 参考文献46-51
• 致谢51-52
• 在学期间研究成果52-53
• 个人简历53

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