rhIFN-α1b对RSV感染鼠肺病变及JAK/STAT和TLR4/NF-κB信号通路的影响

发布时间：2022-01-24 03:25

　　呼吸道合胞病毒（RSV）是全球范围内引起婴幼儿肺炎、毛细支气管炎等下呼吸道感染的重要病原体,可引起或加重儿童哮喘,是婴幼儿住院的主要病因,严重者甚至可导致死亡。RSV也可引起成人严重的呼吸系统疾病,特别是老年人及免疫缺陷病患者。目前临床上尚无特异性针对其的抗病毒药物,所以开发研究新的治疗RSV药物及疫苗已成为全球迫在眉睫的需要。重组人干扰素α1b（rh INF-α1b）抗病毒及免疫调节等作用已被越来越多的学者研究证实,最近其作用于RSV的研究被积极开展,前期我们已有部分实验表明rh INF-α1b对RSV的抗病毒作用,但其作用机制尚不明确。据文献报道JAK/STAT、TLR4/NF-κB等信号通路与RSV感染有密切的相关性。因此,我们推测这些信号通路与RSV感染的致病机制及rh INF-α1b干预治疗的效果可能有着一定的相关性。目的本课题通过rh INF-α1b不同剂量的雾化吸入给药及腹腔注射给药,采用光镜下观察病理学改变、免疫荧光法观察STAT1、STAT2蛋白的表达及免疫组化法观察TLR4和NF-κB蛋白的表达,探讨rh INF-α1b不同剂量及给药方式对RSV感染小鼠的抗病毒作用... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略语表
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前言
文献回顾
实验一rhIFN-α1b对RSV感染小鼠肺组织病变的影响
    1 材料
        1.1 细胞株及病毒株
        1.2 实验动物及实验室等级
        1.3 主要试剂及液体配置
        1.4 主要实验仪器及耗材
    2 方法
        2.1 Hep-2 细胞培养方法
        2.2 RSV病毒增殖
        2.3 RSV病毒悬液的鉴定
        2.4 实验分组、造模及给药
        2.5 标本采集
        2.6 HE染色
        2.7 肺组织病理学评分
        2.8 统计学分析
    3 结果
        3.1 正常Hep-2 细胞形态
        3.2 RSV感染的Hep-2 细胞
        3.3 病毒悬液RNA纯度及完整性检测
        3.4 荧光RT-PCR核酸鉴定结果
        3.5 TCID50 & Reed-Muench法
        3.6 RSV感染小鼠模型成功建立
        3.7 小鼠病理学改变及评分
    4 讨论
实验二 rhIFN-α1b对RSV感染小鼠JAK/STAT信号通路的影响
    1 材料
        1.1 主要试剂
        1.2 实验仪器
        1.3 动物肺组织蜡块标本
    2 方法
        2.1 免疫荧光染色
        2.2 统计学分析
    3 结果
        3.1 各组小鼠肺组织STAT1和STAT2蛋白表达荧光显色图
        3.2 Image J软件检测各组灰度值
    4 讨论
实验三 rhIFN-α1b对RSV感染小鼠TLR4/NF-κB信号通路的影响
    1 材料
        1.1 主要实验试剂
        1.2 实验仪器
        1.3 动物肺组织蜡块标本
    2 方法
        2.1 免疫组化染色
        2.2 统计学分析
    3 结果
        3.1 TLR4和NF-κB蛋白表达情况
        3.2 Image-pro plus 6.0 测定各组肺组织IOD
    4 讨论
小结
参考文献
个人简历及研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]热毒宁对呼吸道合胞病毒感染哮喘模型小鼠的影响[J]. 卢协勤,杜强,高天明,张扬,翁晓琴,冯旰珠.  药学与临床研究. 2014(06)
[2]重组人干扰素α1b不同给药方式治疗儿童病毒性肺炎的临床观察[J]. 靳秀红,汤昱,梁利红,张向峰,陈海燕,李会娟,常会娟.  中国药房. 2014(28)
[3]喜炎平与利巴韦林治疗小儿手足口病疗效和安全性的系统评价[J]. 刘兵兵,华丽霞,董艳,姚冲.  中国实验方剂学杂志. 2014(09)
[4]呼吸道合胞病毒与TLR3、TLR4的关系及其中医药研究进展[J]. 李涛,戴启刚,汪受传.  中华中医药杂志. 2014(01)
[5]重组人干扰素α1b与炎琥宁和喜炎平抗呼吸道合胞病毒感染的对照研究[J]. 黄可飞,张国成,刘瑞清,邓军霞,黄艳娴,吕香萍,林海波,刘雪,成胜权,许东亮,曹云新,马福成.  中华实验和临床感染病杂志(电子版). 2013(06)
[6]拉米夫定联合干扰素治疗乙型肝炎病毒感染疗效及对免疫功能的影响[J]. 邢现峰.  安徽医药. 2013(12)
[7]喜炎平注射液治疗呼吸道合胞病毒肺炎50例临床观察[J]. 刘淑梅,修国权.  中国临床研究. 2013(09)
[8]甘草醇沉淀物有效部位对RSV作用的体外实验研究[J]. 蔡旭玲,黄晓晖,周俊立,邹志辉,陈思东.  中国热带医学. 2013(07)
[9]黄芩苷经由TLR4信号转导通路抗呼吸道合胞病毒作用的研究[J]. 云云,汪长中,桂丽,李振兴.  中成药. 2013(06)
[10]重组人干扰素α1b对呼吸道合胞病毒感染小鼠外周血T淋巴细胞亚群及肺组织病理学的影响[J]. 刘瑞清,张国成,黄可飞,邓军霞,杨晓蕾,吕香萍,林海波,刘雪,成胜权,许东亮,付蓉,曹云新,马福成.  现代生物医学进展. 2013(09)



本文编号：3605747