三种MRD检测法在儿童急性B淋巴细胞白血病中的应用与敏感度比较
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【摘要】:目的:运用免疫组库高通量测序技术(IR-SEQ)、实时荧光定量PCR(RQ-PCR)及流式细胞术(FCM)检测儿童急性B淋巴细胞白血病的微小残留病(MRD),并比较三者间的灵敏度,以探讨其临床意义。方法:采用IR-SEQ技术、RQ-PCR法和FCM法,对2014年1月至2015年4月在我院收治并确诊和治疗的B-ALL患儿治疗前、后骨髓(第0天、第15天、第33天、第64或92天)进行MRD检测。采用c2检验比较三种方法检测MRD结果阳性率的差异,P0.05为差异有显著性意义。结果:1.31例B-ALL患儿进入分析,男20例,女11例;年龄1~10(3.8±2.4)岁;31例患儿通过IR-SEQ法均检测出存在Ig H基因重排,其中15例(48.3%)检出一种致病克隆,另外16例(51.6%)检出两种致病克隆。2.在诱导缓解治疗D15天时IR-SEQ法检测MRD阳性率为100%(26/26),RQ-PCR法检测MRD阳性率为100%(25/25),FCM法检测MRD阳性率为79%(19/24)其中,有5例病人MRD结果FCM法检测为阴性,而IR-SEQ法和RQ-PCR法检测均为阳性;诱导缓解治疗D33天时IR-SEQ法检测有6/21例转阴(28.6%),FCM法检测有17/21例转阴(81%),RQ-PCR法检测有9/19(47.4%)例转阴;4例患儿在治疗D64或D92天FCM和RQ-PCR方法检测MRD结果均为阴性,而IR-SEQ检测2例阳性。3.对三种检测方法的阳性率进行两两比较,IR-SEQ技术与FCM法进行比较,差异有显著性意义(P0.01);IR-SEQ技术与RQ-PCR法进行比较,差异无显著性意义(P=0.063);FCM法与RQ-PCR法进行比较,差异有显著性意义(P0.01)。结论:在检测儿童急性B淋巴细胞白血病MRD时,IR-SEQ技术的灵敏度高于FCM和RQ-PCR检测法,但其在病人远期预后的指导意义有待进一步追踪观察。
【关键词】:儿童 急性淋巴细胞白血病 微小残留病 免疫组库高通量测序技术 实时荧光定量 流式细胞术
【学位授予单位】:遵义医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R733.71
【目录】:
- 中英文缩略词表4-5
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 前言9-11
- 材料11-15
- 方法15-22
- 结果22-33
- 讨论33-35
- 结论35-36
- 参考文献36-39
- 综述:免疫组库高通量测序技术检测ALL-MRD的研究进展39-47
- 参考文献44-47
- 致谢47-49
- 作者简介49
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本文编号:389201
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