儿童单纯性肥胖症的基础与临床研究

发布时间：2024-07-01 23:05

　　一、下调下丘脑弓状核TLR4表达对肥胖相关性代谢紊乱的影响目的:探讨下调下丘脑弓状核TLR4表达是否能够改善肥胖相关性代谢紊乱。方法:通过给予5周龄SD大鼠高脂喂养14周来建立食源性肥胖大鼠模型,然后在第15周,采用立体定位注射技术,将TLR4 sh RNA慢病毒颗粒导入下丘脑弓状核区,限制性地下调弓状核区TLR4的表达。注射慢病毒颗粒4周后,采用经腹腔注射糖耐量试验检测大鼠体内葡萄糖稳态;采用经腹腔注射胰岛素耐量试验检测大鼠的胰岛素抵抗情况;经腹腔注射丙酮酸试验用来检测大鼠的糖异生情况。采用常规H&E染色方法检测肝脏及脂肪组织的病理变化。下丘脑Tlr4,Tnf,Npy和Pomc基因的m RNA表达以及肝脏的Ccl2,Tnf以及几种代谢酶基因(包括Pklr,G6pc,Fasn和Acaca)的m RNA均通过荧光定量RT-PCR进行检测。结果:我们的研究证实下调下丘脑弓状核TLR4的表达可以显著地减少大鼠的体重增长和进食量,改善外周的葡萄糖稳态、胰岛素的敏感性以及减少糖异生,同时伴随着下丘脑TNF-α,NPY表达下调,以及POMC表达上调。另外,我们的研究结果发现特异性下调下丘脑...

【文章页数】：107 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1-1脑立体定位注射操作

图1-1脑立体定位注射操作量试验（ipGTT）夜后，于第二天早上9:00-10:00之间，经腹腔注射别于注射后0min、15min、30min、60min、90m罗氏活力型血糖仪检测血糖水平（RocheDiag过计算糖耐量曲线下面积来定量评估血糖水平的量试验（ipIT....

图1-2绿色荧光蛋白标记的慢病毒颗粒在下丘脑弓状核内的表达

大连医科大学博士学位论文结果GFP慢病毒颗粒被用来监测本研究中TLR4shRNA慢病毒颗粒在率，如图1-1所示，注射4周后，下丘脑弓状核区域绿色荧光蛋白达，说明本研究中的慢病毒颗粒在弓状核的感染效率较高且持续时

图1-3TLR4shRNA慢病毒对下丘脑TLR4mRNA表达的影响NCD：正常饮食组，HFD：高脂饮食组，白色柱为对照组，黑色柱为慢病毒干预组，*P<0.05

1-2绿色荧光蛋白标记的慢病毒颗粒在下丘脑弓状核内的表shRNA慢病毒颗粒4周后，应用RT-PCR方法检测大化。如图1-3所示，慢病毒干预后，肥胖大鼠下丘脑降，降低约56%，正常大鼠的TLR4表达水平也明显下

图1-4抑制TLR4表达对下丘脑炎症因子TNFα（A）及饮食调控因子NPY（B）和POMC

大连医科大学博士学位论文3、抑制TLR4表达对丘脑炎症因子TNFα及饮食调控因子NPY和POMC表达的影响。如图1-4A所示，与对照相比，TLR4shRNA慢病毒干预明显降低了肥胖大鼠下丘脑TNFα的表达，说明抑制下丘脑TLR4的表达，减轻了下丘脑....

本文编号：3999321